陈亚芹
- 作品数：4 被引量：4H指数：1
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- 短发夹RNA靶向抑制环氧化酶-2基因表达对肺癌细胞A_(549)增殖的影响
- 2007年
- 目的评价短发夹 RNA(short hairpin RNA,shRNA)靶向肺癌细胞 A_(549)环氧化酶-2(COX-2)基因表达的抑制作用,并观察对肺癌细胞 A_(549)生长和细胞周期的影响。方法将抑制 COX-2基因的 shRNA DNA 模板插入到真核表达载体 pGenesil-1的 U_6启动子下游,构建靶向抑制 COX-2基因的重组表达载体 pshRNA-COX-2。将试验分为3组:未转染肺癌细胞 A_(549)组、阴性对照 HK 组和pshRNA-COX-2转染组。用脂质体 Lipofectamine^(TM)2000转染肺癌细胞 A_(549)9,逆转录(RT)-PCR 和免疫印迹法(Wb)分别检测 COX-2基因 mRNA 和蛋白表达情况,流式细胞术检测细胞周期,细胞计数检测细胞生长变化。结果与阴性对照组相比,pshRNA-COX-2重组表达载体抑制 COX-2 mRNA 及蛋白表达的抑制率分别为72.2%和48.6%;G_0-G_1,期细胞由63.7%上升为71.0%,S 期细胞由26.5%下降为20.0%;细胞生长明显减慢。结论 pshRNA-COX-2 重组表达载体能显著抑制肺癌细胞 COX-2表达,引起 G_0-G_1期细胞增多,S 期细胞减少,从而抑制肺癌细胞生长。
- 杨义明刘预涂植光甘晓协刘靳波陈亚芹
- 关键词：肺肿瘤基因表达短发夹RNA
- shRNA抑制COX-2基因表达对肝癌细胞HepG_2生长的影响被引量：1
- 2007年
- 目的:应用RNA干扰技术抑制COX-2基因,观察其对肝癌细胞HepG2生长的影响.方法:构建靶向抑制COX-2基因表达的短发夹双链RNA(shRNA)真核表达载pshRNA-COX-2,转染肝癌细胞HepG2,用RT-PCR和Western Blot分别从mRNA和蛋白水平检测其对COX-2的抑制效应,MTT法检测对HepG2细胞生长的影响.结果:与未转染组相比,pshR-NA-COX-2重组表达质粒抑制了HepG2细胞COX-2mRNA及蛋白表达,抑制率分别为69.9%和50.3%;并可抑制HepG2细胞生长,72h后有统计学差异(P<0.05).结论:pshRNA-COX-2重组表达载体能显著抑制肝癌细胞COX-2基因表达,从而抑制肿瘤细胞增殖.
- 杨义明刘预涂植光陈亚芹刘靳波
- 关键词：RNA干扰重组表达载体环氧化酶-2肝肿瘤
- 生存素及其剪接变体在肿瘤中的研究进展
- 2006年
- 生存素基因是近年来发现的凋亡抑制蛋白家族中的一个新成员,具有高度的组织分布特异性和强大的抗凋亡功能,与肿瘤的关系密切。生存素前体RNA的选择性剪接产生了4种生存素的剪接变体,它们在肿瘤的发生中具有不同的作用。
- 陈亚芹刘预涂植光
- 关键词：肿瘤微管相关蛋白质类细胞凋亡剪接体生存素
- 短发夹RNA抑制肝癌细胞HepG_2 COX-2基因表达的探讨被引量：4
- 2007年
- 目的:研究shRNA对肝癌细胞株HepG2中COX-2基因表达的抑制作用,同时检测对细胞周期和细胞生长的影响。方法:设计、合成一对环氧化酶-2(COX-2)基因编码的反向重复序列,中间间隔9个核苷酸序列,定向克隆至质粒载体pGenesil-1,构建抑制COX-2基因的短发夹RNA(short hairpin RNA shRNA)的重组表达质粒pshRNA-COX-2,用脂质体LipofectamineTM2000转染肝癌细胞HepG2,经RT-PCR和Westernblot分别检测pshRNA-COX-2重组表达质粒对COX-2mRNA和蛋白抑制效应,流式细胞仪检测细胞周期、细胞计数检测细胞生长变化。结果:pshRNA-COX-2重组表达质粒能够抑制COX-2基因表达。与未转染肝癌细胞HepG2相比,pshRNA-COX-2重组表达质粒转染肝癌细胞后,COX-2mRNA和蛋白表达明显降低,抑制率分别为69.9%和50.3%;G0-G1期细胞由55.4%上升为77.9%,S期细胞由31.1%下降为16.2%;细胞生长明显减慢。结论:构建的pshRNA-COX-2重组表达载体能够显著抑制COX-2基因表达;引起G0-G1期细胞增多,S期细胞减少,从而阻止肝癌细胞生长。
- 杨义明刘预涂植光陈亚芹刘靳波
- 关键词：短发夹RNA环氧化酶-2重组表达质粒细胞周期
