陈文艳
- 作品数：9 被引量：8H指数：2
- 供职机构：扬州大学医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家级大学生创新创业训练计划江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 髓系抑制性细胞诱导高分泌IL-10调节性B细胞的产生及其机制
- 研究目的 :髓系抑制性细胞(Myeloid-derived suppressor cells,MDSCs)是近年来首先在肿瘤中发现的一群异质细胞。生理状态下,MDSCs主要集中在骨髓中,并能分化为成熟的树突状细胞,巨噬细...
- 钱莉陈文艳秦宏超芮程磊贾筱琴龚卫娟田芳季明春
- 关键词：MDSCS调节性B细胞IL-10免疫调控
- 文献传递
- 从黑色素瘤荷瘤小鼠中分离纯化髓系抑制性细胞
- 2014年
- 目的从黑色素瘤荷瘤小鼠脾脏中分离得到CD11b+Gr-1+的髓系抑制性细胞(Myeloid derived suppressor cells,MDSCs)。方法给C57BL/6小鼠注射LPS或者小鼠黑色素瘤细胞株B16BL6后,取小鼠的脾脏细胞,检测其中CD11b+Gr-1+的MDSCs细胞的比例。通过流式细胞仪(flow cytometry,FCM)分选出CD11b+Gr-1+的细胞,培养24小时后,CBA(cytometric bead array)法检测其分泌IL-10的情况;提取CD11b+Gr-1+细胞的总RNA,利用RT-PCR的方法检测其表达IFN-β、TGF-β、iNOS、ARG-1和IDO的情况。结果与注射LPS相比,注射B16BL6细胞株的小鼠脾脏中CD11b+Gr-1+的MDSCs细胞的比例更高;利用FCM分选得到CD11b+Gr-1+的MDSCs,进一步鉴定发现其表达IL-10、IFN-β、TGF-β、iNOS、ARG-1和IDO。与先前报道的MDSCs的特征相一致。结论可从B16BL6荷瘤小鼠脾脏中获得高纯度的MDSCs用于实验研究。
- 芮程磊秦宏超陈文艳薛冰川田芳龚卫娟季明春钱莉
- 关键词：髓系抑制性细胞黑色素瘤脾脏
- 髓系抑制性细胞诱导高分泌IL-10调节性B细胞的产生及其机制
- 研究目的：髓系抑制性细胞(Myeloid-derived suppressor cells,MDSCs)是近年来首先在肿瘤中发现的一群异质细胞。生理状态下,MDSCs主要集中在骨髓中,并能分化为成熟的树突状细胞,巨噬细胞...
- 钱莉陈文艳秦宏超芮程磊贾筱琴龚卫娟田芳季明春
- 关键词：MDSCS调节性B细胞IL-10免疫调控
- FcγRIIb抑制B细胞内TLR4介导的CD40和CD80表达被引量：2
- 2016年
- 利用磁珠法分选野生型和FcγRIIb缺陷小鼠脾脏CD19+B细胞,体外用LPS和/或FcγRIIb配体(IC)刺激24h后,流式细胞术(FCM)检测细胞表面共刺激分子的表达。用蛋白质印迹法检测IC刺激后B细胞内相关蛋白激酶的磷酸化情况。用Lyn抑制剂作用后,FCM检测LPS活化B细胞表面共刺激分子表达探讨B细胞内FcγRIIb对TLR4激动剂(LPS)诱导共刺激分子表达的影响。结果表明:IC抑制LPS活化B细胞表面CD40和CD80的表达,而在FcγRIIb缺陷小鼠B细胞内这一抑制作用消失。IC诱导B细胞内蛋白激酶Lyn的磷酸化,但不能诱导FcγRIIb缺陷小鼠B细胞内Lyn磷酸化。使用Lyn抑制剂后LPS活化B细胞表面CD40的表达上调。说明B细胞内FcγRIIb通过活化Lyn抑制TLR4激动剂诱导的CD40表达。
- 钱莉王少卿刘阳陈文艳龚卫娟田芳李国才
- 关键词：FCΓRIIBB细胞
- TLR9激动剂CpG ODN对B细胞分泌细胞因子的影响被引量：5
- 2016年
- 利用免疫磁珠法分选小鼠脾脏CD19+B细胞,体外用CpG寡脱氧核苷酸(ODN)刺激24h后,流式细胞术(FCM)检测B细胞表面共刺激分子的表达;CBA法检测培养上清中IL-6、IL-10、IL-12p70、IFN-γ和TNF浓度;利用相关的信号转导抑制剂检测参与B细胞内细胞因子分泌的信号转导通路,探讨TLR9激动剂CpG ODN刺激小鼠B细胞后,对B细胞表面共刺激分子表达和细胞因子分泌的影响。结果表明:CpG ODN可以上调B细胞表面CD40、CD80、CD86和MHC II类分子的表达,促进IL-6、IL-10和TNF的高分泌。JNK、p38和NF-κB信号转导通路调控B细胞IL-6、IL-10和TNF的分泌。说明CpG ODN可以通过上调B细胞共刺激分子表达和促进细胞因子分泌等多方面调节B细胞功能。
- 秦宏超芮程磊陈文艳傅奕贾筱琴田芳龚卫娟季明春钱莉
- 关键词：B细胞信号转导
- 免疫复合物通过FcγRⅡb负向调节B细胞的TLR信号
- Toll样受体(toll like receptor,TLR)是目前发现的一类极为重要的免疫识别受体,能够识别不同的病原体成分如LPS等,从而触发一系列免疫应答,但对TLR刺激剂的过度应答会对机体造成损害,导致慢性炎症和...
- 钱莉陈文艳秦宏超芮程磊贾晓琴傅奕龚卫娟田芳季明春
- 免疫复合物通过FcγRIIb负向调节B细胞的TLR信号
- <正>Toll样受体(toll like receptor,TLR)是目前发现的一类极为重要的免疫识别受体,能够识别不同的病原体成分如LPS等,从而触发一系列免疫应答,但对TLR刺激剂的过度应答会对机体造成损害,导致慢性...
- 钱莉陈文艳秦宏超芮程磊贾晓琴傅奕龚卫娟田芳季明春
- 文献传递
- miR-15a/16-1基因敲除小鼠的鉴定及其脾脏免疫细胞频率分析被引量：1
- 2016年
- 目的 :探讨mi R-15a/16-1基因敲除小鼠的繁育与子代鼠的鉴定,及其脾脏免疫细胞频率。方法 :从子鼠鼠尾中提取基因组DNA,采用PCR方法进行基因型鉴定。mi R-15a/16-1基因敲除小鼠眼眶取血,用动物血液分析仪进行全血细胞分析。采用流式细胞仪分析mi R-15a/16-1基因敲除小鼠脾脏中免疫细胞频率。结果:mi R-15a/16-1+/+、mi R-15a/16-1+/-、mi R-15a/16-1-/-各表型小鼠互交繁殖结果基本符合孟德尔遗传规律。流式结果显示,mi R-15a/16-1基因敲除小鼠与野生型小鼠相比,CD19+、NKG2D+细胞增多,其余无明显差异。全血细胞分析结果显示淋巴细胞增多。结论:实验所用PCR方法可以鉴定mi R-15a/16-1-/-小鼠;mi R-15a/16-1-/-小鼠的获得为进一步探究mi R-15a/16-1的作用提供了较理想的动物模型;敲除mi R-15a/16-1基因,小鼠脾脏CD19+、NKG2D+细胞增多。
- 沈娅婷胡春霞陈文艳李晓敏刘浩李国利龚卫娟贾筱琴
- 关键词：基因敲除小鼠免疫功能全血细胞分析
- 转基因细胞株BaF3-mb15-RAE对IKDC功能分子表达的影响
- 2014年
- 目的:探讨单独或共同表达视黄酸早期转录因子1ε(retinoic acid early transcript 1ε,RAE1ε)和膜型IL-15的B淋巴细胞BaF3对小鼠产生IFN的杀伤性DC(IFN producing killer DC,IKDC)功能分子表达的影响。方法:以小鼠原B淋巴细胞株BaF3为基础,分别构建表达膜型IL-15的BaF3-mb15细胞和表达RAE1ε的BaF3-RAE细胞及同时表达膜型IL-15和RAE1ε的BaF3-mb15-RAE细胞。通过体外细胞因子诱导产生骨髓来源的小鼠成熟DC,将丝裂霉素灭活后的3株BaF3工程细胞株作为刺激细胞,分别与DC共培养,流式细胞术检测其对DC中CD11clowB220+NK1.1+IKDC比例和DC表面CD40、CD80表达的影响。流式细胞术分选DC中的IKDC,将丝裂霉素灭活后的3株BaF3工程细胞株与其共培养24 h,流式细胞术检测共培养对IKDC表面CD40、CD80、CD86、NKG2D、MHCⅡ类分子、CD107a和FasL表达的影响。结果:成功获得骨髓来源的小鼠成熟DC。与BaF3-mb15细胞和BaF3-RAE细胞相比,BaF3-mb15-RAE细胞刺激显著提高DC中IKDC比例[(50.0±5.6)%vs(30.3±8.2)%、(36.0±4.6)%,均P<0.05],并且有效刺激IKDC表面CD40(180.1±28.2 vs 44.7±7.8、36.0±3.1,P<0.01)和FasL(P<0.05)表达上调;与BaF3细胞和BaF3-mb15细胞相比,BaF3-mb15-RAE细胞有效刺激IKDC表面CD80(P<0.05)表达上调,而3株BaF3工程细胞刺激均不影响DC表面CD40、CD80的表达(P>0.05);同时,3株BaF3工程细胞对IKDC表面CD86、MHCⅡ类分子、NKG2D和CD107a的表达也没有显著影响(P>0.05)。结论:RAE-1ε和膜型IL-15协同作用可促进IKDC增殖并诱导其高表达CD40和FasL。
- 钱莉陆家辉秦宏超芮程磊陈文艳贾筱琴傅奕龚卫娟田芳胡茂志季明春
- 关键词：IL-15FASL
