陈永军
- 作品数：72 被引量：262H指数：9
- 供职机构：中国农业科学院上海兽医研究所更多>>
- 发文基金：公益性行业(农业)科研专项中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目上海市科学技术委员会科研基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学环境科学与工程轻工技术与工程更多>>
- 弓形虫SAG1单抗的研制及其初步应用被引量：3
- 2013年
- 为开展弓形虫免疫诊断及抗弓形虫感染的相关研究,利用可溶性表达的弓形虫表面抗原SAG1截短型重组蛋白(trSAG1)研制单克隆抗体,筛选出能够稳定分泌高滴度抗体的杂交瘤细胞株,所分泌的单抗不仅适用于在虫体定位该蛋白,而且具有一定的小鼠体内保护作用。共筛选出4株(6H1、6G12、7B4和7A12)特异性好的单抗分泌株,经亚型测定,4株单抗重链均为IgG1,轻链均为κ链。抗体经纯化后测定效价为1∶8 000～1∶25 600;Western blot结果显示4株单抗能够同时识别重组表达及天然弓形虫SAG1抗原。筛选得到的2株抗SAG1单抗(6H1和7B4)可用于间接免疫荧光检测SAG1蛋白在虫体中的表达定位和分布。小鼠被动免疫保护试验表明,6H1和7B4两株单抗分别或联合使用可稍微延长被弓形虫感染的小鼠的存活时间。本试验研制的弓形虫SAG1单克隆抗体对将来研究弓形虫蛋白定位、弓形虫感染的诊断及防治具有一定的应用价值。
- 蒋蔚刘迎春陈永军安立刚张花景王权
- 关键词：弓形虫SAG1单克隆抗体免疫荧光检测免疫保护
- 孔雀石绿单克隆抗体的制备及其鉴定
- 用人工合成的无色孔雀石绿-兔血清白蛋白(LMG-RSA)作抗原免疫BALB/c小鼠，通过杂交瘤细胞融合技术筛选抗无色孔雀石绿的单抗，单抗经纯化后对其特异性和灵敏性进行了鉴定，探讨了建立孔雀石绿的免疫学检测方法。结果显示，...
- 王权龚朋飞陈永军
- 关键词：孔雀石绿单克隆抗体酶联免疫吸附试验抗原免疫杂交瘤细胞
- 文献传递
- 一种液相芯片检测动物源食品中硝基呋喃类代谢物的方法
- 本发明提供了一种液相芯片检测动物源食品中硝基呋喃类代谢物的方法，通过将四种不同编码的微球与硝基呋喃类代谢物AHD、SEM、AOZ和AMOZ人工抗原耦联得到耦联微球；将四种AHD、SEM、AOZ和AMOZ单克隆抗体与BNH...
- 刘迎春王权陈永军蒋蔚张华景张梦肖燕
- 文献传递
- 五种中草药对弓形虫体外增殖的抑制效果
- 探索治疗弓形虫病的有效药物组方,从而为临床合理用药提供科学的指导,通过体外试验,培养Ana-1细胞作为弓形虫宿主细胞,采用MTT法测定了甘草、黄答、百部、苦参和贯众5种中药对细胞的安全浓度,将弓形虫RH株速殖子与Ana-...
- 荆振宇蒋蔚陈永军杨康宋宁宁崔常勇王权
- 关键词：刚地弓形虫中草药体外
- 一种高效检测弓形虫急性感染的方法及其靶标蛋白
- 本发明公开了一种非疾病诊断或治疗目的的检测弓形虫急性感染的方法、其试剂盒及其用到的抗体。所述方法包括下述步骤：使待检测样本与弓形虫Coronin蛋白或所述弓形虫Coronin蛋白的抗体发生反应。本发明所提供的检测方法能够...
- 蒋蔚王权陈永军刘迎春薛俊欣白雪瑞赵梦苏刘景云
- 双抗体夹心ABC-ELISA检测弓形虫循环抗原方法的建立被引量：7
- 2017年
- 为检测弓形虫循环抗原,以实现弓形虫急性感染的早期诊断,本研究建立了基于ABC(avidin biotin-peroxidase complex)放大系统的双抗体夹心ELISA方法。通过制备弓形虫排泄分泌抗原(ESA)并免疫动物,经3种抗原的筛选以获得抗循环抗原(CAg)的单抗,以方阵滴定法确定最佳多抗包被浓度和单抗工作浓度,利用夹心法和ABC放大系统建立检测弓形虫循环抗原的夹心ABC-ELISA方法,用该方法对人工感染犬血清和其他阳性血清样本进行检测以确定该方法的检出时间和准确性,并应用于临床样品的检测。结果:获得了3株针对不同抗原表位的单克隆抗体,并对CAg有较高特异性。双抗体夹心ABC-ELISA反应条件:兔多抗包被浓度为3.7μg/mL,生物素标记3A5、3E5和10F5-3单抗在混合工作液中的浓度分别为0.1、0.13和0.12μg/mL。该ELISA方法对ESA最低检测限为11.9 ng/mL,并与隐孢子虫早期感染牛血清、血吸虫尾蚴早期感染牛血清、艾美耳球虫早期感染鸡血清、犬瘟热急性感染早期血清、犬细小病毒急性感染血清无交叉反应。用该ELISA方法检测人工感染的犬,于感染后2 d血清即显示阳性,该方法能明显区分标准阳性血清和阴性血清。用该方法检测68份猪临床血样(其中包括2份标准阳性血清),检测结果与Nest-PCR结果一致。表明该双抗体夹心ABC-ELISA方法特异性强、敏感性高,可用于弓形虫急性感染的早期或活动期的诊断。
- 宫枫举蒋蔚陈永军薛俊欣王民燕孙卫东王权
- 关键词：弓形虫急性感染循环抗原
- 一种检测弓形虫急性感染的方法及其靶标蛋白
- 本发明公开了一种非疾病诊断或治疗目的的检测弓形虫急性感染的方法、其试剂盒及其用到的抗体。所述方法包括下述步骤：使待检测样本与弓形虫ELMO蛋白或所述弓形虫ELMO蛋白的抗体发生反应。本发明所提供的检测方法能够快速检测弓形...
- 薛俊欣王权蒋蔚陈永军刘迎春宫枫举曾鹏王民燕夏灿陈军霞
- 呋喃它酮代谢物人工抗原及多克隆抗体的制备
- 本文利用对醛基苯甲酸(CPA)与呋喃它酮代谢物(AMOZ)进行衍生化,得到衍生物CPAMOZ,并通过质谱法对其结构进行确证.然后采用混合酸酐法使CPAMOZ与载体蛋白偶联,紫外扫描(UV)法对偶联物进行验证.将确证成功偶...
- 刘迎春蒋蔚陈永军高艺林石金磊王权
- 检测猪尿、猪肉中莱克多巴胺的化学发光间接竞争免疫分析方法的建立被引量：6
- 2013年
- 将莱克多巴胺(RAC)与戊二酸酐反应,用混合酸酐法使反应产物与牛血清白蛋白(BSA)偶联生成免疫原,并采用淋巴细胞杂交瘤技术制备RAC单克隆抗体,建立检测猪尿、猪肉中莱克多巴胺化学发光间接竞争免疫分析法。结果显示:飞行质谱法测得RAC-戊二酸单酯分子量为416.2,RAC-戊二酸单酯与BSA偶联比为3.4∶1;RAC单克隆抗体最佳稀释倍数为1∶8×104,包被抗原最佳质量浓度为0.5μg/mL;标准曲线呈线性,回归方程为Y=-0.188 2x+0.392 2,R2=0.993 4,IC50值为0.267 ng/mL;与RAC类似化合物及其他药品无明显的交叉反应。尿样回收率为76.8%～90.8%,批内变异系数为6.8%～11.5%,批间变异系数为7.2%～13.8%;猪肉样回收率为75.2%～87.4%,批内变异系数为7.1%～11.6%,批间变异系数为8.6%～14.1%。结果表明:用RAC-戊二酸单脂与BSA偶联物作免疫原成功地研制了针对RAC的特异性抗体,以单抗为基础建立了检测猪尿、猪肉中莱克多巴胺化学发光间接竞争免疫分析法,为进一步研制快速筛选检测试剂盒奠定了基础。
- 王权赵新宇蒋蔚陈永军刘迎春宋宁宁石金磊
- 关键词：莱克多巴胺单克隆抗体
- 水产品中霍乱弧菌、副溶血弧菌和创伤弧菌多重PCR检测方法的建立被引量：17
- 2016年
- 霍乱弧菌、副溶血弧菌和创伤弧菌是引起全球范围的食源性疾病的重要病原菌,建立一种能准确鉴别这3种弧菌的方法具有重要意义。groEL基因是包括弧菌属在内的多种细菌检测的分子标记。本研究根据3种弧菌的groEL基因分别设计引物,经PCR扩增及反应条件的优化,建立一种能同时检测这3种弧菌的多重PCR方法。结果表明应用多重PCR技术对霍乱弧菌、副溶血弧菌和创伤弧菌能分别特异性地扩增出418、644、192 bp的目的片段。检测其他非目标供试菌时,不出现任何扩增条带。敏感性检测结果表明,对霍乱弧菌、副溶血弧菌和创伤弧菌最低检测限分别为102、102、103CFU/m L。人工染菌水产品检测结果显示,所建立的多重PCR方法能够有效检测出目的细菌,而未染菌组均为阴性。本文通过建立的多重PCR方法实现了对这3种弧菌的同时检测,具有快速、灵敏度高和特异性强等优点,对水产品中这3种弧菌的检测和流行病学调查具有重要意义。
- 蒋蔚易力陈永军何再平白雪瑞赵梦苏刘景云王权
- 关键词：霍乱弧菌副溶血弧菌创伤弧菌多重PCR
