韩晓
- 作品数：86 被引量：134H指数：6
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- MiRNA-24、miRNA-34a和miRNA-375抑制小鼠胰岛β细胞系MIN6细胞中Neurod1／BETA2的蛋白表达被引量：3
- 2015年
- 目的在小鼠胰岛β细胞系MIN6细胞中分析miRNA-24、miRNA-34a和miRNA-375对Neurod1／BETA2的表达调控以及作用方式。方法设计并合成针对小鼠Neurod1基因3’非翻译区（3’untranslated region,3’UTR）序列的引物，克隆于pMIR-REPORT^TM荧光素酶报告基因载体中；用miranda软件预测可能调控Neurod1表达的miRNAs，挑选在B细胞中有相关功能研究的miRNAs并委托公司合成pre—miRNAs；脂质体法转染至MIN6细胞中。荧光素酶报告基因技术分析这些miRNA对Neurod1的作用；定量RT．PCR分析Neurod1的mRNA水平；Western印迹检测Neurod1的蛋白表达水平；GSIS检测干扰Neurod1后MIN6细胞的功能。结果成功制备小鼠Neurod1基因的3’UTR荧光素酶报告基因载体；选取了预测在Neurod1的3’UTR有互补结合位点的3个miRNAs（miRNA-24、miR-34a和miR．375），并挑选一个没有互补结合位点的miRNA（miR-29a）作为阴性对照；在MIN6细胞中过表达pre-miRNA-24、pre-miR-34a和pre-miR-375能够抑制Neurod1基因3’UTR荧光素酶报告基因的活性，而过表达阴性对照miRNA-29a则不能抑制其活性；pre—miRNA-24、pre-miR-34a和pre-miR-375还可以不同程度抑制Neumd1的蛋白表达；在MIN6细胞中干扰Neurod1蛋白表达能够降低细胞的GSIS功能。结论miRNA-24、miR-34a和miR-375能够抑制小鼠胰岛B细胞系MIN6细胞中Neurod1的蛋白表达。
- 张许朱云霞韩晓
- 关键词：胰岛Β细胞
- 小鼠Derlin-1重组腺病毒的构建及在胰岛中的表达鉴定
- 2014年
- 目的构建小鼠Derlin-1重组腺病毒载体，包装、纯化并检测病毒滴度，观察重组腺病毒在小鼠胰岛中的表达。方法设计合成针对小鼠Derlin-1基因cds区的引物序列，采用PCR的方法以小鼠胰岛cD．NA为模板，扩增目的基因Derlin-1。经XbaⅠ和HindⅢ双酶切后，克隆至AdTrack-CMV穿梭质粒上，与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1在BJ5183细菌中进行同源重组，通过脂质体将正确的重组体包裹并转染293A细胞，在其中包装扩增病毒。利用穿梭质粒中所带绿色荧光蛋白GFP，对病毒滴度和感染效率进行检测。最终得到pAd-Derlin-1重组腺病毒载体，体外转染小鼠胰岛，使用Western印迹法检测Derlin-1蛋白表达水平。结果酶切鉴定证明Derlin-1基因重组腺病毒构建成功，病毒有较强感染能力。并验证其在小鼠胰岛中成功过表达。结论应用同源重组方法成功构建了含小鼠Derlin-1基因的重组腺病毒。为进一步研究Derlin-1在胰岛β细胞中的作用奠定了基础。
- 刘佳汪彦阳吴倜珺单伟韩晓
- 关键词：重组腺病毒糖尿病胰岛Β细胞
- 硅橡胶缓释管的筛选及体内埋植效果验证被引量：2
- 2015年
- 目的筛选出一种制作简便、在体内有效工作的皮下埋植用硅橡胶缓释管，为研究药物的长期效应及毒副作用提供可靠的实验方法。方法以双氢睾酮作为试验用药物、雌性sD大鼠为动物模型，筛选出两种自制硅橡胶缓释管中性能（生物兼容性、体内稳定性）较优者，并进一步验证其在体内的释药效果。结果用医用粘合剂制作的硅橡胶缓释管封闭牢靠（体内稳定性好）、无明显的异物排斥反应（生物兼容性好）。并可在体内有效工作，明显优于用木质敷药棒制作的缓释管。结论用医用粘合剂制作的硅橡胶缓释管是一种适用于体内长期埋植的缓释管，可用于双氢睾酮等药物长期缓释给药和构建动物模型。
- 王霞萍韩晓
- 关键词：双氢睾酮
- P27特异性siRNA重组腺病毒载体的构建及功能鉴定
- 2010年
- 目的构建针对P27的siRNA腺病毒载体及相应的对照病毒载体，并鉴定重组腺病毒在小鼠胰岛中对内源性皿7基因表达的影响。方法合成针对p27的siRNA的靶DNA序列及相应的阴性对照序列，连接至pShuttle-H1质粒中，然后用NotI和HindHI限制性内切酶将H1-siRNA片段从pShuttle—H1-siRNA质粒上双酶切下来，克隆至空载pAdTrack穿梭质粒上，与腺病毒骨架质粒pAdeasy-1在BJ5183细菌中进行同源重组，转染QBI-293A细胞，包装得到pAd—P27-siRNA和pAd—NC重组腺病毒。用病毒体外感染小鼠胰岛，Western印迹法检测P27蛋白表达水平。结果重组腺病毒载体经测序鉴定正确，制备的病毒感染效率高，能有效抑制小鼠胰岛中P27的表达。结论成功构建了针对P27的siRNA重组腺病毒载体，为进一步研究P27在胰岛β细胞生长中的作用提供了基础。
- 林艳汤心怡韩晓
- 关键词：P27小干扰RNA腺病毒载体
- ERα propelled aberrant global DNA hypermethylation by activating the DNMT1 gene to enhance anticancer drug resistance in human breast cancer
- Drug-induced aberrant DNA methylation is the first identified epigenetic marker involved in chemotherapy resis...
- 司鑫鑫刘玥吕京澴丁海建张欣邵立培杨楠程禾孙鸾朱栋梁杨音李安迪韩晓孙玉洁
- 关键词：ERΑ
- 文献传递
- 3T3-L1前脂肪细胞分化过程中自噬的发生与线粒体数目的改变被引量：1
- 2015年
- 目的 :探索3T3-L1前脂肪细胞分化过程中自噬的发生与线粒体数目改变的关系。方法 :培养3T3-L1前脂肪细胞,利用电子显微镜技术观察细胞分化过程中自噬小泡的形成与变化、线粒体数目的改变,同时运用Western blot检测NRF1、mt TFA的表达。结果:电镜结果显示:在3T3-L1前脂肪细胞分化过程中,自噬小泡出现在细胞分化的第2天,随后迅速增加,第4天自噬小泡的面积达到最大,第6天开始消失;线粒体数目在分化第2天显著下降,第4天开始逐渐增加,到第6天超过分化前的水平并在第8天恢复;在分化过程中的自噬小泡内,有被吞噬的线粒体。Western blot结果则显示调控线粒体合成的转录因子NRF1、mt TFA的表达在分化第2天显著下降,第4天迅速升高,至分化末期再次下降。结论 :3T3-L1前脂肪细胞分化过程的早中期形成了大量的自噬小泡,包括一些线粒体自噬,这些线粒体自噬的发生可能是分化早期线粒体数目减少的原因之一。
- 张许林海燕尹业韩晓程光
- 关键词：自噬脂肪细胞分化线粒体
- AhR途径,CYP1A1、CYP1B1,雌激素代谢及作用过程中的调节被引量：7
- 2005年
- 多环芳烃和多卤化烃是环境中广泛分布的有害物质,可通过与细胞芳烃受体结合,从而影响外来化合物代谢酶系如细胞色素氧化酶P450 1A1、1B1的表达,并通过这些酶的催化作用调控雌激素的代谢及作用,进而部分决定了雌激素对机体的作用效应。上述复杂的过程可受到多种因素的影响。
- 周小华韩晓
- 关键词：雌激素
- CGP 57380在制备用于预防或治疗2型糖尿病药物中的应用
- 本发明公开了CGP 57380在制备用于预防和治疗2型糖尿病药物中的用途。CGP 57380是一种细胞渗透的吡唑‑嘧啶类化合物，本申请发现，CGP 57380可以通过抑制BRSK2的激酶活性和蛋白表达量，从而缓解高脂诱导...
- 朱云霞韩晓许茹凤王开远姚正建
- 文献传递
- 抑制RAGE表达的siRNA重组腺病毒载体的构建及鉴定被引量：2
- 2010年
- 目的构建特异性针对细胞膜上晚期糖基化终末产物受体（RAGE）的小干扰RNA（siRNA）腺病毒载体，鉴定其对大鼠胰岛β细胞系INS-1细胞RAGE表达的影响。方法设计并合成针对大鼠RAGE基因的siRNA的靶DNA序列，克隆于穿梭载体pAdTrack中，与腺病毒骨架质粒pAdeasy-1在BJ5183细菌中进行同源重组，脂质体法转染至QB1293A细胞中包装，获得RAGE—siRNA的重组腺病毒，荧光显微镜观察RAGE—siRNA感染INS-1细胞后绿色荧光蛋白（GFP）的表达，Western印迹检测RAGE的蛋白表达。结果成功制备RAGE—siRNA重组腺病毒，在INS-1细胞中RAGE—siRNA感染效率达到90％以上，并能够抑制INS-1细胞RAGE的表达。结论成功构建了携带RAGE的siRNA重组腺病毒载体，能有效沉默INS-1细胞中RAGE的表达。
- 朱云霞束婷婷韩晓
- 关键词：晚期糖基化终末产物受体腺病毒载体小干扰RNA胰岛Β细胞
- 环氧化酶-2与1型糖尿病被引量：2
- 2003年
- 1型糖尿病是以胰岛β细胞破坏为特征,细胞因子对胰岛β细胞损伤在其发病中起重要作用。细胞因子诱导环氧化酶(COX)-2表达,导致前列腺素E2水平增高,后者对胰岛β细胞发挥细胞抑制和毒性效应,造成了β细胞损害。研究还发现COX-2基因的高水平表达与糖尿病并发症的发生关系密切。对胰岛β细胞损伤过程中COX-2参与机制的研究可能为1型糖尿病的防治提供新的措施。
- 凌家俭韩晓
- 关键词：1型糖尿病环氧化酶-2前列腺素E2并发症
