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TK基因转染骨肉瘤U-2细胞体外实验研究被引量：1: 2012年; 目的研究脂质体介导的TK/GCV系统对人骨肉瘤细胞的杀伤作用及其产生的旁观者效应。方法构建重组质粒pIRES-EGFP-tk,制备和转化感受态大肠杆菌BL21以及鉴定测序,提取、纯化重组质粒DNA,培养和转染人骨肉瘤细胞株U-2 OS,流式细胞仪分析和荧光倒置显微镜下观察细胞生长状态,用转染后的培养液的上清加入TK(-)U-2 OS中观察旁观者效应。结果成功地构建出包含有TK基因cDNA片段的重组质粒pIRES-EGFP-tk,通过PCR等方法鉴定质粒大小和位点均符合实验设计。荧光显微镜下观察U-2 OS(TK+)呈现绿色荧光。U-2 OS TK/GCV培养上清液可明显诱导细胞凋亡。但将上清液用0.2μm的滤膜滤过后,诱导凋亡作用消失。结论成功构建重组质粒pIRES-EGFP-tk,体外实验表明人骨肉瘤细胞系U-2 OS对脂质体介导的TK/GCV系统敏感,并且有明显的旁观者效应,可望成为骨肉瘤基因治疗的新途径。; 李晋惠吕智马卓冯毅王军兰彦平张桦栋; 关键词：TK 基因转染骨肉瘤旁观者效应

TK/GCV系统联合顺铂对骨肉瘤MG-63细胞生长的抑制作用研究: 2013年; 目的研究脂质体介导的包含TK基因的质粒pIRES-EGFP-tk在GCV作用下(TK/GCV系统)联合化疗药物顺铂对人骨肉瘤MG-63细胞生长的抑制作用。方法构建重组质粒pIRES-EGFP-tk,制备和转化感受态大肠杆菌BL21及鉴定测序,培养和转染人骨肉瘤MG-63细胞株,流式细胞仪分析和荧光倒置显微镜下观察细胞生长状态,筛选稳定细胞系,MTT法检测GCV与不同浓度顺铂联合应用对骨肉瘤MG-63细胞株生长的抑制作用。结果成功构建含TK基因cDNA片段的重组质粒pIRES-EGFP-tk,通过PCR、酶切电泳等方法鉴定质粒位点和大小均符合实验设计。将重组质粒pIRES-EGFP-tk转染入人骨肉瘤MG-63细胞株,获得稳定表达。荧光显微镜下观察MG-63(tk+)呈现绿色荧光。流式细胞仪检测转染率为67.7%。通过MTT法检测,当GCV浓度为10μg/ml时,骨肉瘤MG-63(tk+)细胞株的生长受到抑制,同时测得顺铂的最低有效浓度为1μg/ml。当顺铂与GCV(5μg/m1)联合应用时,顺铂的有效浓度可降为0.25μg/ml,并对MG-63(tk+)细胞株有明显的抑制作用。结论 TK/GCV系统联合顺铂可对人骨肉瘤MG-63细胞的生长产生抑制作用,并提高MG-63细胞对顺铂的敏感性,降低其有效剂量。可望为骨肉瘤的辅助治疗提供实验依据。; 马卓吕智; 关键词：TK 骨肉瘤

脊柱转移癌的认识与诊治被引量：4: 2012年; 骨骼系统是恶性肿瘤最常见的转移部位之一，仅次于肝、肺之后居第三位，而脊柱为最多见的骨转移部位，约占骨转移的2／3。脊柱转移癌以胸腰椎多见，颈椎和骶椎则少见，发病年龄多为40～65岁。其中最易发生脊柱转移的肿瘤为乳腺癌、肺癌及前列腺癌。; 马卓吕智; 关键词：脊柱转移癌诊治骨骼系统发病年龄前列腺癌骨转移

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马卓