魏晓棠 作品数:59 被引量:44 H指数:3 供职机构: 山东出入境检验检疫局 更多>> 发文基金: 国家质检总局科技计划项目 国家自然科学基金 国家质检总局植物病原检测专项基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 轻工技术与工程 医药卫生 更多>>
番茄溃疡病菌的环介导等温核酸扩增技术检测方法 被引量:3 2013年 目的建立番茄溃疡病菌的环介导等温核酸扩增技术检测方法。方法应用环介导等温核酸扩增技术(LAMP)对番茄溃疡病菌的16SrRNA特异性基因进行扩增,采用4对引物识别目的片段的6个特异性区域,62℃恒温1h完成扩增。结果设计的引物与对照菌皱纹假单胞菌、茄假单胞菌、丁香假单胞菌番茄致病变种都没有扩增反应,表现了较好的特异性。这些对照菌在茄科蔬菜上易引起类似症状。结论 LAMP检测程序便捷,所需设备简单,其结果可以通过肉眼观察来判断,比常规PCR灵敏且能更早得到反应结果,因此该技术具有更大的优势。 封立平 尼秀媚 魏晓棠 邵秀玲 吴兴海 厉艳关键词:番茄溃疡病菌 刺足根螨依赖解旋酶DNA等温扩增快速检测引物、试剂盒、检测方法 本发明公开了一种刺足根螨依赖解旋酶DNA等温扩增快速检测引物、试剂盒、检测方法。CUP1上游引物序列为SEQ ID NO 1;CNP1下游引物序列为SEQ ID NO 2;SUP2上游引物序列为SEQ ID NO 3;S... 魏晓棠 尼秀媚 厉艳 林超文献传递 基于AFLP方法对不同地理种群棉褐带卷蛾遗传分化的研究 被引量:1 2013年 利用3对AFLP引物对我国棉褐带卷蛾4个地理种群进行了遗传分化研究。共扩增得到224个DNA条带,其中多态条带195个;遗传多样性分析表明各群体均具有较高的遗传多样性水平,Nei遗传多样性指数为0.1425~0.1578,Shannon多样性指数为0.2137~0.2383。群体间的遗传分化系数(Gst)和基因流(Nm)分析结果表明,北方的苹小卷叶蛾与南方茶小卷叶蛾之间产生了明显的遗传分化,而北方的苹小卷叶蛾不同种群间则存在着大量的基因交流,遗传分化程度很弱。AMOVA分析结果显示66.81%的变异来源于种群内。UMAGA聚类分析表明,北京种群、陕西种群和山东种群间遗传距离较小,聚在一起为一分支,福建的茶小卷蛾单独为一分支。推测棉褐带卷蛾种群间的遗传分化与寄主有关联,与地理距离不相关。 魏晓棠 张成标 张京宣 尼秀媚 胡东青 宋涛关键词:AFLP 遗传分化 地理种群 解旋恒温基因扩增技术在螨虫鉴定中的应用前景 被引量:2 2014年 螨虫种类多,分布广,危害多样,已成为人们关注的对象。随着进出口植物、植物产品和食品的增加,其携带螨虫的风险越来越高,许多国家把螨虫作为检疫对象设置技术壁垒。由于螨虫体型微小,形态鉴定比较困难,一直是口岸检疫的一大难点。随着现代分子技术的发展,迫切需要建立快速、灵敏、准确的螨类检测方法。解旋酶恒温基因扩增技术(HDA)是一种简便、快速、高效、灵敏度高的体外恒温基因扩增技术。该技术依靠DNA解旋酶解开双链DNA、单链DNA结合蛋白(SSB)维持单链状态、DNA聚合酶催化靶片段的扩增。HDA不需要昂贵的仪器设备,适用于基层实验室。HAD能扩增微生物基因组DNA、病原菌DNA、质粒DNA和c DNA等,从其灵敏性、准确性和可操作性几方面来看,该方法适用于螨虫鉴定。 魏晓棠 林超 朱研研 胡东青关键词:螨虫 入境马蹄莲细菌性软腐病菌的分离鉴定 被引量:5 2014年 目的在参展青岛世界园艺博览会的荷兰进口马蹄莲植株上,发现叶片有明显褐色软腐症状,为明确引起马蹄莲软腐病的病原,对叶片进行病菌的分离鉴定。方法采用组织分离法,从荷兰入境马蹄莲植株的病变叶片中分离纯化到2株致病性细菌菌株(MTL1、MTL2),对该菌株进行鉴定和生物学特性研究。结果形态及培养特征、生理生化特性的研究结果表明该菌株在NA培养基上能形成白色圆形单菌落,薄而平滑、边缘整齐,光滑不透明,KB培养基上划线培养后可产生明显的绿色的荧光。显微镜下菌体呈杆状,具多根极生鞭毛,革兰氏阴性菌。结论经形态鉴定、培养特征、生理生化及16S r DNA序列分析和致病性测定实验,确认引起马蹄莲细菌性软腐病的病原为边缘假单胞菌(Pseudomonas marginalis)。 厉艳 魏晓棠 甘琴华 纪瑛 邵秀玲 王英超关键词:马蹄莲 细菌性软腐病 病原鉴定 用于检测啤酒花矮化类病毒的NASBA扩增引物、试剂盒和检测方法 本发明公开了一种检测啤酒花矮化类病毒的NASBA扩增引物、试剂盒和检测方法,其上游引物、下游引物的序列分别为SEQ ID NO:1~2,试剂盒包括NASBA扩增反应液A和NASBA扩增反应液B;检测方法包括:1)样品RN... 吴兴海 张成标 魏晓棠 甘琴华 张京宣 邵秀玲 历艳 尼秀媚文献传递 快速鉴定兰花细菌性褐腐病菌的特异性引物、试剂盒和检测方法 本发明公开了一种用于快速鉴定兰花细菌性褐腐病菌的特异性引物、试剂盒和检测方法。引物序列如下:EcUP:5'‑TCAACGCCAAGCCGATTTCT‑3';EcNP:5'‑ACGAATGAACCGTCGTCGGC‑3'。... 厉艳 魏晓棠 张京宣 静平 房保海 邵秀玲 封立平文献传递 番茄黑环病毒外壳蛋白基因的克隆与原核表达 被引量:2 2013年 利用RT-PCR方法获得了番茄黑环病毒(TBRV)外壳蛋白(coat protein,CP)基因,将CP基因克隆到pMD19-T Simple载体,并进行测序,大小为1 399 bp。与GenBank中已报道的TBRV的CP基因核苷酸相似度达99%以上。将TBRV CP基因定向插入双酶切的pET30a中,成功构建了原核表达载体pET30a-TBRVCP,转化大肠杆菌BL-21,表达重组蛋白。SDS-PAGE电泳分析发现,通过诱导条件的优化,重组蛋白在37℃,1.0 mmol/L IPTG、4 h条件下表达量最高。 魏晓棠 李伟涛 陈宏 彭青 尼秀媚 白桦 张京宣关键词:外壳蛋白基因 克隆 原核表达 一种检测番茄斑萎病毒的方法 本发明公开了一种焦磷酸测序技术检测番茄斑萎病毒的方法,先依据番茄斑萎病毒N基因设计特异性引物及焦磷酸测序引物;再提取待测样品的核糖核酸,然后分别以N基因的特异性引物进行聚合酶链式反应扩增;用琼脂糖凝胶电泳对扩增产物进行检... 吴兴海 陈长法 封立平 魏晓棠 冯黎霞 张京宣 王简文献传递 跨境农产品中重要有害生物防控技术及标准 张成标 吴兴海 魏晓棠 张京宣 尼秀媚 王英超 李建勇 林超 肖海 自中国加入世贸以来,农产品国际贸易日益活跃,有害生物跨境传播风险激增。在入境方面,中国已成为遭受外来生物入侵最严重的国家之一,每年经济损失超过2000亿元,在出口方面90%农产品企业受到动植物卫生安全技术壁垒影响,樱桃、...关键词:关键词:农产品 检测试剂盒