代敏
- 作品数：11 被引量：13H指数：2
- 供职机构：华中科技大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金教育部“新世纪优秀人才支持计划”湖北省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学化学工程自动化与计算机技术轻工技术与工程更多>>
- 多拷贝毕赤酵母重组菌表达GCL摇瓶优化和高密度发酵被引量：4
- 2012年
- 目的:构建高效表达白地霉脂肪酶的毕赤酵母重组菌株,并对筛选得到的菌株进行摇瓶发酵条件优化和分批补料高密度发酵工艺研究。方法:将诱导型表达载体pPIC9K-gcl电转化至毕赤酵母GS115。通过橄榄油-罗丹明B平板和摇瓶发酵筛选高脂肪酶活力的重组菌株,运用基于TaqMan探针的实时荧光定量PCR法确定其拷贝数,并对菌株进行摇瓶发酵条件优化。在此基础上,研究重组菌在3L发酵罐中的高密度发酵工艺。结果:筛选得到一株具有3个白地霉脂肪酶基因拷贝的菌株GS115/pPIC9K-gcl 78#,初始酶活力为220 U/ml。当摇瓶发酵条件为甲醇诱导96 h,每24 h甲醇添加量1%,接种量2%,培养基初始pH 7.0,500 ml摇瓶装液量50 ml,甲醇诱导温度25℃时酶活力达735 U/ml。3L发酵罐高密度发酵176.5 h,酶活力达到3360 U/ml,总蛋白含量达到4.30 g/L,且发酵过程中细胞活性一直保持在96%以上。结论:基因拷贝数与重组菌株的产酶水平呈正相关,摇瓶优化可显著提高重组菌株的产酶能力,为白地霉脂肪酶的工业化生产奠定了技术基础。
- 智晓燕汪小锋孙永川柯锋代敏闫云君
- 关键词：巴斯德毕赤酵母高密度发酵
- 一种用于吸附制冷系统的双螺旋翅片管式吸附床及应用
- 本发明公开了一种用于吸附制冷系统的双螺旋翅片管式吸附床及应用，包括传热管、进气管、第一端盖、电极引线、外层金属套管、内层密封管、连接螺栓、密封垫片、排气管、第二端盖、气流通道、吸附材料和金属孔板电极，所提出的基于电渗效应...
- 蔡姗姗周兴涂正凯李松徐宏阳邹雨琦李旭代敏刁广琦
- 文献传递
- 疏棉状嗜热丝孢菌脂肪酶在毕赤酵母中的表面展示及酶学性质被引量：6
- 2012年
- 【目的】构建疏棉状嗜热丝孢菌脂肪酶(Thermomyces lanuginosus lipase,TLL)在毕赤酵母GS115中的细胞表面展示体系,筛选展示成功且酶活力及展示率较高的重组子作为全细胞催化剂,并研究其酶学性质。【方法】克隆TLL基因tll,以酿酒酵母细胞壁蛋白Sed1p为锚定蛋白,构建表面展示载体pPICZαA-TLS。重组载体经SacⅠ线性化后转入毕赤酵母GS115中,经三丁酸甘油酯平板检测及摇甁发酵筛选获得高酶活力的毕赤酵母重组子,采用抗FLAG标签一抗和R-PE荧光素标记的二抗处理细胞后,进行荧光显微镜检测和流式细胞仪分析,并考察全细胞催化剂的最适反应温度和pH、金属离子耐受性等酶学性质。【结果】成功构建TLL毕赤酵母细胞表面展示体系,筛选到1株具有三丁酸甘油酯和橄榄油水解活力的克隆子,经1%的甲醇诱导发酵120 h后,水解橄榄油酶活力达257.8 U/g干细胞。经抗体处理后的重组菌发酵细胞在荧光显微镜下呈现强烈的红色荧光,流式细胞仪分析结果也证实脂肪酶被成功展示在酵母细胞表面,展示率达98.36%。展示的TLL作为全细胞催化剂水解对硝基苯酚丁酸酯(pNPB)的最适温度为30℃,最适pH为8.0,且具备良好的热稳定性和有机溶剂耐受性;K+、Ca2+、Mg2+对其有微弱的激活作用,Mn2+、Ni2+则有微弱的抑制作用,Cu2+的抑制作用较强,而EDTA、SDS、Tween 20对酶活力影响不明显。【结论】首次将TLL脂肪酶成功展示在毕赤酵母细胞表面,获得具有较高水解活力和良好酶学特性的全细胞催化剂,为表面展示TLL脂肪酶的规模化应用奠定了技术基础。
- 代敏纪昌涛汪小锋智晓燕邵化徐莉闫云君
- 关键词：毕赤酵母酶学性质
- 泰国初中汉语词汇教学研究——以朱拉隆功大学附属示范中学为例
- 近年来,随着中泰两国贸易往来的增多,中泰友好关系不断上升,汉语国际教育事业在泰国不断发展壮大。作为第十八批赴泰汉语教师志愿者,笔者在2019年6月至2020年3月期间任教于泰国朱拉隆功大学附属示范中学。在教学过程中笔者发...
- 代敏
- 关键词：对外汉语词汇教学
- 具有协同效应的南极假丝酵母脂肪酶B和疏棉状嗜热丝孢菌脂肪酶在毕赤酵母中的共展示研究
- 表面展示技术是将外源蛋白以融合蛋白的形式展示在微生物表面并保持其原有生物活性的技术,已被广泛应用于全细胞催化剂、抗体制备、生物传感器和疫苗等领域。南极假丝酵母脂肪酶B(Candida antarctica lipase ...
- 代敏
- 关键词：毕赤酵母
- 文献传递
- 一种与PEMFC联供的电渗再生吸附式制冷系统
- 本发明公开了一种与PEMFC联供的电渗再生吸附式制冷系统，包括第一吸附床、第二吸附床、第一冷凝器、第二冷凝器、第一蒸发器、第二蒸发器、补水系统、热水箱、冷却塔、冷冻水箱、PEMFC系统和储气罐，与现有技术相比，本发明采用...
- 蔡姗姗徐宏阳涂正凯李松代敏李旭邹雨琦周兴刁广琦
- 文献传递
- 幽门螺杆菌的分子分型及其分子流行病学研究
- 该文采用RAPD、PCR-RELP法对Hp的基因组、Hp两类主要毒力因子尿毒酶的热应激蛋白的三个编码基因ureB、htrA、hsp54进行综合分析,并运用SPSS10.0软件进行聚类分析和数值分类,从而对50株Hp临床分...
- 代敏
- 关键词：幽门螺杆菌分子分型分子流行病学PCR-RFLP分子克隆
- 文献传递
- 一种用于吸附制冷系统的双螺旋翅片管式吸附床及应用
- 本发明公开了一种用于吸附制冷系统的双螺旋翅片管式吸附床及应用，包括传热管、进气管、第一端盖、电极引线、外层金属套管、内层密封管、连接螺栓、密封垫片、排气管、第二端盖、气流通道、吸附材料和金属孔板电极，所提出的基于电渗效应...
- 蔡姗姗周兴涂正凯李松徐宏阳邹雨琦李旭代敏刁广琦
- 文献传递
- 复合吸附剂对吸附制冷性能的影响及优化
- 吸附式制冷技术驱动热源温度低,工质对清洁环保,在工业余热等低温热源利用方面具有一定应用潜力。但目前仍在吸附床传热传质性能、制冷效率等方面存在诸多问题,限制其实际应用。因此本文研究的主要目的是对硅胶-水吸附式制冷系统进行吸...
- 代敏
- 关键词：吸附式制冷系统复合吸附剂性能模拟
- 烟幕干扰下的地面目标识别算法研究
- 自20世纪50年代开始,光电成像末制导武器由于其高效费比,大量应用于战场。为有效保护目标,烟幕干扰技术作为一种重要的光电对抗手段被广泛投入使用。烟幕干扰严重影响了红外图像目标识别算法的性能和红外末制导武器的打击效果。相较...
- 代敏
- 关键词：红外成像制导图像匹配
- 文献传递
