仲涛
- 作品数：49 被引量：76H指数：5
- 供职机构：四川农业大学更多>>
- 发文基金：四川省科技支撑计划国家级星火计划国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 山羊脂联素基因真核表达载体的构建和应用
- 本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种山羊脂联素蛋白真核表达载体的构建和应用。所述的山羊脂联素基因编码区的核苷酸序列如序列表SEQIDNO：1所示。将山羊脂联素基因的完整编码区片段经过双酶切，连接到同样经过双酶切pEG...
- 王林杰张红平薛科李利仲涛王艳
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- 一种羊用新型保育围栏
- 本实用新型涉及牲畜饲养领域，具体涉及一种羊用新型保育围栏，包括围栏腰和围栏门，所述围栏腰为弧形，所述围栏腰具有一缺口，所述围栏门可拆卸的设置在所述围栏腰的缺口处，所述围栏腰上设置有若干的安装孔，每一个所述安装孔内可拆卸的...
- 仲涛胡江涛张红平牛丽莉李利王林杰
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- 猪AMPD1基因启动子区域SNP作为猪胴体性状的遗传标记及应用
- 本发明属于猪的遗传标记制备技术领域，具体涉及一种与猪胴体性状相关的分子标记制备及在标记辅助选择上的应用。所述的分子标记由AMPD1基因启动子序列克隆得到，它的核苷酸序列如序列表SEQ ID NO：1所示。在序列表SEQ ...
- 王林杰张红平李利王艳仲涛候郁果王薏林
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- 基于FSHβ基因鉴定大白猪繁殖性状的分子标记及应用
- 本发明公开了一种基于FSHβ基因鉴定大白猪繁殖性状的分子标记及应用。所述的分子标记位于猪FSHβ基因第3号外显子上，即在3号外显子区域511、617、630、652、678、735、746、921处，记为g.511A&g...
- 牛丽莉谢晶晶史可瑜仲涛朱砺
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- 高糖诱导山羊骨骼肌卫星细胞成脂分化过程中相关基因表达的变化被引量：4
- 2014年
- 本研究采用高糖培养基诱导山羊骨骼肌卫星细胞(Skeletal muscle satellite cells,SMSCs)成脂分化,检测诱导分化过程中脂肪酸合成及成脂分化相关基因表达量,为进一步揭示SMSCs的成脂分化机理提供依据。采用含25mmol·L-1葡萄糖的F12培养基诱导山羊SMSCs成脂分化,油红O染色观察脂肪滴形成,qPCR检测诱导前(0d)和分别在高糖、低糖培养基中培养2、4、6、8、10d时脂肪酸合成及成脂分化相关基因ACC、FAS、C/EBPα、PPARγ、SREBP-1、AdipoQ mRNA的相对表达量。结果表明:油红O染色观察到山羊SMSCs高糖培养6d即形成较多脂肪滴,而低糖培养至10d也无明显脂肪滴形成。ACC、C/EBPα表达量在高糖培养2d后显著升高并维持较高值(P<0.05);SREBP-1、FAS表达量在高糖培养6d后显著升高(P<0.05);PPARγ表达量在高糖培养10d后显著升高(P<0.05);AdipoQ表达量在高糖培养2、8、10d时显著升高(P<0.05)。本试验发现高浓度葡萄糖能直接或间接上调脂肪酸合成及成脂肪分化相关基因的表达,促进山羊SMSCs向类脂肪细胞转化。
- 薛科王林杰陈利王薏琳仲涛李利张红平
- 关键词：山羊骨骼肌卫星细胞成脂分化
- 山羊不同组织及不同发育时期骨骼肌内参基因的表达稳定性分析被引量：14
- 2014年
- 为筛选出山羊不同组织、不同时期骨骼肌及骨骼肌卫星细胞(Skeletal muscle satellite cells,SMSCs)中稳定表达的内参基因,以出生后3日龄的山羊不同组织(心、肝、脾、肺、肾、大脑、大肠、小肠、背最长肌、臂三头肌和半膜肌)和不同时期(3、30、60、90和120 d)的3种骨骼肌(背最长肌、臂三头肌和半膜肌)以及培养至不同阶段(1、3、4和7 d)的山羊SMSCs为研究对象,运用qRT-PCR技术及geNorm分析软件,探索9个内参基因(ACTIN、GAP—DH、TOP2β、YWHAZ、SDHA、PGK1、RP2、RPL4和HPRT1)mRNA的表达稳定性。结果表明,在同一时期的11个组织中,内参基因表达稳定度的排序:HPRT1>RP2>TOP2β>SDHA>GAPDH>ACTIN>YWHAZ>PGK1>RPL4,需要2个内参基因(HPRT1和RP2)共同校正目的基因的表达;在不同发育时期的骨骼肌中,各内参的稳定度:YWHAZ>ACTIN>HPRT1>RPL4>TOP2β>SDHA>PGK1>GAPDH>RP2,需引入3个内参(YWHAZ、ACTIN和HPRT1)才能准确地校正定量结果;在SMSCs中各内参表达的稳定度排序:PGK1>SDHA>ACTIN>RPL4>GAPDH>TOP2β>YWHAZ>RP2>HPRT1,需要3个合适的内参(PGK1、SDHA和ACTIN)作为标准化指标校正定量数据。本试验分别筛选出了能在山羊同一时期不同组织、不同发育时期的骨骼肌及SMSCs中稳定表达的内参基因及需要引入的内参数目,有利于更加准确地校正基因mRNA水平的表达量,为更好地研究基因功能奠定了基础。
- 陈利赵薇占思远李丹李利仲涛王林杰张红平
- 关键词：山羊荧光定量PCR内参基因
- 一种克隆山羊IGFBP2基因编码区全序列的方法
- 本发明属于动物基因工程技术领域，具体涉及一种克隆IGFBP2基因编码区全序列的方法。其编码区核苷酸序列如序列表SEQIDNO：1所示，编码的氨基酸序列如序列表SEQIDNO：2所示。本发明还公开了一种山羊IGFBP2基因...
- 占思远张红平李利仲涛王林杰
- 文献传递
- 实时荧光定量PCR内参基因的选择被引量：28
- 2013年
- 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)作为一种检测mRNA的敏感方法已被广泛应用于基因的表达分析。在利用qRT-PCR技术检测目的基因的表达水平时,为了减少检测样本在RNA产量、质量和反转录效率上可能存在的差异,需要选择合适的稳定内参基因作为校正标准,但是迄今为止尚未找到在所有条件下均可稳定表达的内参基因。近年来出现了筛选稳定性好的内参基因的新方法,如使用GeNorm软件、基因芯片数据、EST数据库。本文就qRT-PCR技术中内参基因的意义、参考基因在物种及组织上的表达特异性、内参基因选择方法进行了综述。
- 董恩妮梁青李利王林杰仲涛王永张红平
- 关键词：实时荧光定量PCR内参基因稳定性
- 山羊PPARα基因克隆、分子特性及组织差异表达分析被引量：4
- 2018年
- 试验旨在克隆山羊过氧化物酶体增殖物激活受体α(peroxisome proliferators-activated receptors-alpha,PPARα)基因的CDS区序列,分析其编码蛋白的结构与功能,并探讨其在山羊不同组织中的表达模式。采用RTPCR方法扩增并克隆PPARα基因CDS编码区;通过在线软件对其一级结构、二级结构和三级结构进行生物信息学分析;利用基因序列和编码蛋白构建系统发育树,进行系统发育进化分析;采用实时荧光定量PCR方法检测PPARα基因在简州大耳羊心脏、肺脏、肝脏、肾脏、脾脏和网膜6个组织中的相对表达情况。结果表明,山羊PPARα基因CDS区全长1 413bp,结构稳定,共编码470个氨基酸。生物信息学分析发现,PPARα蛋白是一种结构较为稳定的带负电的亲水性蛋白,以α-螺旋和无规则卷曲为主,无信号肽和跨膜蛋白,属于膜内蛋白。蛋白序列中总共有49个磷酸化位点,9个糖基化位点。保守结构域中含有明显的DBD区域和LBD区域,蛋白结构高度保守。三级结构预测发现其蛋白结构主要为通过长链卷曲连接的2个明显不同的结构区域,结构均以helix螺旋为主。序列比对结果表明,山羊PPARα氨基酸序列与绵羊和牛的同源性最高。实时荧光定量检测结果表明,PPARα基因在肾脏和肝脏中表达量较高,显著高于其他组织(P<0.05);在网膜组织和心脏中中度表达,显著高于肺脏和脾脏(P<0.05);在肺脏和脾脏中相对低表达;说明山羊PPARα基因可能与体内脂肪氧化、脂质代谢和抗氧化应激等调控功能有关。试验结果为深入研究PPARα基因在山羊中的生理功能和调控机制奠定了理论基础。
- 饶辽源周靖宣王林杰李利张红平仲涛
- 关键词：山羊克隆生物信息学
- 一种新型培养皿摇晃装置
- 本实用新型公开了一种新型培养皿摇晃装置，包括工作台、培养皿固定装置和晃动装置，所述工作台用于安装培养皿固定装置以及晃动装置，工作台包括可活动的工作板和空心台体，工作板上设有多个培养皿固定装置；所述工作台顶部设有方形开口，...
- 张潇何威肖苗张红平李利王林杰仲涛郭家中占思远曹家雪代定卉陈媛
- 文献传递
