何征宇
- 作品数：69 被引量：265H指数：8
- 供职机构：上海交通大学医学院附属仁济医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市卫生局“百人计划”上海申康医院发展中心市级医院适宜技术联合开发推广应用项目更多>>
- 相关领域：医药卫生社会学经济管理环境科学与工程更多>>
- 乳酸-转化生长因子-β1途径促进肺成纤维细胞活化介导机械通气相关性肺纤维化的机制研究被引量：4
- 2021年
- 目的探讨机械通气促进肺成纤维细胞活化及肺纤维化的机制,明确乳酸-转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)途径在该过程中的作用。方法①将C57BL/6小鼠采用随机数字表法分为假手术组(Sham组)和机械通气组(MV组),每组12只,其中Sham组仅行麻醉插管处理并保持自主呼吸,MV组采用20 ml/kg潮气量和70次/min通气频率行单次2 h机械通气,观察7 d后取材。采用H-E染色、Masson染色观察肺组织的损伤程度和纤维化程度,采用Western blot法检测肺组织Ⅰ型胶原蛋白α1链(collagen typeⅠalpha 1 chain,COL1A1)、α平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)和TGF-β1的蛋白表达情况,采用比色法检测小鼠肺泡灌洗液(bronchial alveolar lavage fluid,BALF)和血清的乳酸浓度。②将人胚肺成纤维细胞MRC-5采用随机数字表法分为4组(每组3个孔):PBS对照组(Con组)、1 mmol/L乳酸组(Lac1组)、10 mmol/L乳酸组(Lac_(10)组)和20 mmol/L乳酸组(Lac_(20)组),于乳酸刺激MRC-5细胞24 h后采用ELISA法检测细胞培养上清液中TGF-β1含量,同时采用细胞免疫荧光观察α-SMA的表达情况;于乳酸刺激MRC-5细胞72 h后采用Western blot法检测不同分组细胞COL1A1和α-SMA的表达情况,并通过ELISA法检测细胞培养上清液Ⅰ型前胶原羧基肽(procollagen type I carboxyl peptide,PICP)的含量变化。③另取MRC-5细胞采用随机数字表法分为3组(每组3个孔):PBS对照组(Con组)、20 mmol/L乳酸组(Lac_(20)组)和20 mmol/L乳酸+TGF-β1受体抑制剂(SB431542)组(Lac_(20)+SB组),处理24 h后采用Western blot法检测不同分组细胞COL1A1和α-SMA的表达情况。结果①与Sham组比较,MV组小鼠肺泡间隔增厚、胶原蛋白沉积、肺纤维化程度加重,伴有COL1A1、α-SMA和TGF-β1表达水平升高(P<0.05),血清和BALF乳酸浓度升高(P<0.05)。②与Con组比较,Lac_(10)组和Lac_(20)组细胞培养上清液中TGF-β1、PICP含量升高(P<0.05),细胞中COL1A1和α-SMA表达水�
- 胡钺梅舒雅徐侨翌胡晓婷邢顺鹏皋源何征宇李雯
- 关键词：乳酸转化生长因子-Β1机械通气肺成纤维细胞肺纤维化
- 锁骨下静脉置管误入同侧颈内静脉的危险因素分析被引量：4
- 2014年
- 目的探讨锁骨下静脉置管误入同侧颈内静脉的危险因素。方法收集2011年1月至2012年12月间上海交通大学医学院附属仁济医院外科监护室行锁骨下静脉置管成功的患者178例，均采用Seldinger技术进行置管。记录患者性别、年龄、穿刺部位、穿刺位点、进针方向、穿刺针针尖斜面方向、导引钢丝J型头方向、穿刺时头部位置，先以单因素分析筛选出有统计学意义的危险因素，再应用多因素非条件logistic回归分析患者在锁骨下静脉置管进入颈内同侧颈内静脉的独立危险因素。结果单因素分析表明：锁骨下静脉置管是否进入同侧颈内静脉与患者的性别（P=0．504）、年龄（P=0．200）、进针方向（P=0。370）、穿刺针针尖斜面方向（P=0．670）无关，与穿刺部位（P=0．012）、穿刺位点（P=0．012）、穿刺时导引钢丝J型头方向（P=0．000）、穿刺时患者头部位置（P=0．030）有关。多因素回归分析显示：锁骨下静脉置管时穿刺部位在右侧[危险度比值比（oddsratio，OR）=55．573，95％可信区间（confidenceinterval，CI）：5．145。595．845，X2=10．965，P=0．001]、导引钢丝J型头朝向颈内静脉（OR=24．116，95％CI：6．848～84．918，x^2=24．558，P=0．000）和穿刺时头部偏向穿刺对侧（OR=3．681，95％CI：1．210—11．199，x^2=5．268，P=0．022），为锁骨下静脉置管误人同侧颈内静脉的独立危险因素。共29例（16．29％）患者锁骨下静脉置管时进入同侧颈内静脉。结论锁骨下静脉置管误入同侧颈内静脉是其常见的并发症，影响锁骨下静脉置管误人同侧颈内静脉的主要因素有穿刺部位选择右侧、导引钢丝J型头朝向颈内静脉、穿刺时头部偏向穿刺对侧。
- 邢顺鹏皋源闻大翔何征宇杭燕南
- 关键词：锁骨下静脉置管颈内静脉LOGISTIC回归分析
- 羟乙基淀粉(130/0.4)溶液对原位肝移植术后急性肺损伤的影响
- 目的 观察无肝期前输注羟乙基淀粉(130/0.4)溶液对原位肝移植术后急性肺损伤的影响.方法90例ASAⅡ～Ⅳ级晚期肝病患者随机分为三组,分别于麻醉诱导后无肝期前经中心静脉以10ml/kg/h的速度输注羟乙基淀粉(130...
- 赵延华何征宇陈湧呜王祥瑞
- 关键词：羟乙基淀粉溶液原位肝移植急性肺损伤
- LPS通过PI3K-Akt-mTOR信号通路抑制肺成纤维细胞自噬
- 革兰氏阴性杆菌细胞壁的脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)是内毒素的主要成份,能诱导肺成纤维细胞异常增殖活化并分泌胶原蛋白沉积于肺组织,引起肺纤维化.自噬是存在于真核细胞中一种进化保守的,依赖于溶酶体的...
- 谢婷婷何征宇
- 关键词：肺纤维化脂多糖肺成纤维细胞细胞自噬
- 锁骨下静脉置管术中导引钢丝导向方法和装置
- 一种锁骨下静脉置管术中的导引钢丝导向方法，首先在导引钢丝设置磁性材料，在从针筒的尾端向针筒的顶端推进导引钢丝的过程中，利用一个磁铁导向装置吸引导引钢丝的顶端，磁铁导向装置放置在预先设定的导引钢丝顶端路径外。一种导引钢丝导...
- 皋源邢顺鹏李雯邓羽霄何征宇赵贤元杭燕南
- 文献传递
- 脂多糖对小鼠肺成纤维细胞增殖和P27蛋白表达的影响
- 2018年
- 目的观察原代培养的小鼠肺成纤维细胞在不同质量浓度的脂多糖(LPS)刺激下的增殖情况并检测P27蛋白的表达情况,以明确LPS对肺成纤维细胞增殖和P27蛋白表达的调控作用。方法将培养至4～7代的小鼠肺成纤维细胞分为对照组、100μg/L LPS组(LPS_(100)组)、500μg/L LPS组(LPS_(500)组)和1 000μg/L LPS组(LPS_(1000)组)。对照组加入PBS,各质量浓度LPS组加入相应终质量浓度的LPS。在LPS刺激后0、24、48、72h采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测各组小鼠肺成纤维细胞的增殖情况。在LPS刺激后24h采用实时荧光定量PCR技术检测小鼠肺成纤维细胞P27的mRNA表达水平,并通过Western印迹法和免疫荧光技术比较小鼠肺成纤维细胞经不同质量浓度LPS刺激48h后P27的蛋白质表达情况。结果不同质量浓度的LPS刺激小鼠肺成纤维细胞后能引起细胞增殖,LPS刺激后24h,LPS1000组细胞增殖速率显著高于对照组(P<0.01);刺激后48h,LPS_(100)组、LPS_(500)组和LPS_(1000)组肺成纤维细胞的增殖速率均显著高于对照组(P值均<0.01);刺激后72h,LPS_(500)组和LPS_(1000)组肺成纤维细胞的增殖速率均显著高于对照组(P值均<0.01)。LPS刺激后24h,LPS_(500)组和LPS_(1000)组P27的mRNA表达水平均显著低于对照组(P值分别<0.05、0.01)。LPS刺激后48h,Western印迹法和免疫荧光实验结果显示,LPS_(100)组、LPS_(500)组和LPS_(1000)组的P27的蛋白质表达量和绿色荧光强度均显著低于对照组(P值分别<0.05、0.01、0.01)。结论肺成纤维细胞的增殖可能是LPS诱导的脓毒症相关性肺纤维化发生的机制之一,该过程可能与P27蛋白表达下调有关。
- 顾楠楠邢顺鹏陈思涵周雨曦蒋涛焦英甫皋源俞卫峰何征宇杭燕南闻大翔
- 关键词：脂多糖类肺纤维化肺成纤维细胞
- 脂多糖抑制小鼠肺成纤维细胞自噬的观察性研究被引量：1
- 2019年
- 目的观察体外原代培养的小鼠肺成纤维细胞在脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)作用下,自噬微管相关蛋白轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain 3,MAP1LC3)(以下简称LC3)和Beclin-1的表达情况,以明确LPS对肺成纤维细胞自噬的调控作用.方法将培养至4~7代的小鼠肺成纤维细胞接种于6孔培养板,密度1×10^4个/ml.待细胞贴壁后,更换无血清培养基饥饿过夜,采用随机数字表法将其分为4组(每组3孔):PBS对照组(Con组)、250μg/L LPS组(LPS250组)、500μg/L LPS组(LPS500组)、1 000μg/L LPS组(LPS1 000组),除Con组外,其余组分别加入以上终浓度LPS,各组在加入PBS或LPS后30 h裂解细胞并提取总蛋白,通过Western blot法比较小鼠肺成纤维细胞经不同浓度LPS刺激后LC3和Beclin-1蛋白的表达情况;同时,采用随机数字表法将传代细胞分为2组(每组3孔):IF-Con组(加入PBS作为对照)和IF-LPS组(加入1 000μg/L的LPS),采用免疫荧光技术比较IF-Con组和IF-LPS组中小鼠肺成纤维细胞内自噬小体的表达情况.结果随着LPS刺激浓度的增高,LC3蛋白表达量下调,而LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ在Con组最高,随LPS刺激浓度的升高逐渐降低,LPS1 000组中,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ较Con组降低(P<0.05);Beclin-1蛋白的表达量在Con组、LPS250组和LPS500组间差异无统计学意义(P>0.05),而在LPS1 000组中,Beclin-1蛋白表达较Con组明显下调(P<0.05).同时,免疫荧光实验结果显示IF-LPS组中小鼠肺成纤维细胞内自噬小体的表达量较IF-Con组明显降低.结论在体外培养的小鼠肺成纤维细胞中应用1 000μg/L的LPS可以下调LC3和Beclin-1的蛋白表达,并抑制自噬小体的形成,表明LPS可以抑制肺成纤维细胞的自噬.提示LPS抑制肺成纤维细胞的自噬可能是肺纤维化发生的机制之一.
- 谢婷婷徐侨翌邢顺鹏万晗曦皋源何征宇
- 关键词：脂多糖成纤维细胞肺纤维化自噬
- 视频技术在困难气道处理中的应用被引量：13
- 2009年
- 何征宇王祥瑞
- 关键词：视频技术气道处理人工气道建立困难气道气道开放
- 脂多糖抑制MCT1表达引起乳酸清除障碍促进肺泡上皮细胞上皮‑间质转化
- 2023年
- 目的通过研究脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)与单羧酸转运蛋白‑1(monocarboxylate transporter 1,MCT1)表达的关系及对肺泡上皮细胞上皮‑间质转化(epithelial‑mesenchymal transformation,EMT)的影响,探究LPS诱导的肺纤维化过程中肺泡上皮细胞EMT的潜在机制。方法①24只C57BL/6小鼠采用随机数字表法分为对照组(Con1组)和脂多糖刺激组(LPS1组),每组12只。LPS1组小鼠连续3 d腹腔注射LPS 5 mg·kg^(−1)·d^(−1),Con1组小鼠注射等体积生理盐水,造模7 d后取材。Western blot法和免疫荧光检测肺组织MCT1以及EMT相关标志蛋白[E‑钙黏蛋白(E‑cadherin)、波形蛋白(Vimentin)]的表达情况,ELISA法检测血清中乳酸含量,马松(Masson)染色评估肺组织纤维化程度。②将MLE‑12细胞按照随机数字表法分为4组(每组3个孔):PBS对照组(Con2组)、乳酸组(Lac2组)、脂多糖组(LPS2组)及乳酸+脂多糖组(Lac+LPS2组),分别用PBS、10 mmol/L乳酸、1 mg/L LPS和10 mmol/L乳酸+1 mg/L LPS刺激48 h。使用Western blot法及免疫荧光检测各组细胞MCT1、E‑cadherin、Vimentin水平,同时检测各组细胞上清液pH值。结果①与Con1组比较,LPS1组小鼠肺组织MCT1蛋白水平降低(P<0.05),E‑cadherin水平降低(P<0.05),Vimentin水平升高(P<0.05);肺组织E‑cadherin荧光强度降低,Vimentin荧光强度增强,MCT1荧光强度降低;肺组织出现纤维化表现;同时伴有血清乳酸含量升高(P<0.05)。②与Con2组比较,Lac2组MCT1蛋白水平明显升高(P<0.05),E‑cadherin、Vimentin水平及pH值差异无统计学意义(P>0.05);LPS2组与Lac+LPS2组MCT1蛋白水平明显降低(P<0.05),E‑cadherin水平降低(P<0.05),Vimentin水平升高(P<0.05),pH值降低(P<0.05)。与Lac2组比较,Lac+LPS2组细胞MCT1蛋白水平和E‑cadherin水平明显降低(P<0.05),Vimentin水平明显升高(P<0.05),pH值降低(P<0.05)。与Con2组比较,Lac2组MCT1荧光强度增强,E‑cadherin、Vimentin荧光强度无明显变化;LPS2组与Lac+LPS2组MCT1和E‑cad
- 冯金华胡钺梅舒雅汤日周洋邢顺鹏皋源何征宇徐侨翌
- 关键词：脂多糖乳酸
- 增生性瘢痕组织中整合素基因表达的实验研究
- 范志宏马进何征宇侯晓宾
- 本实验首次采用链霉亲和素-生物素（SABC）免疫组化染色法证实了增生性瘢痕组织成纤维细胞表面整合素分子和TGF-β受体的大量异常表达，进一步肯定了整合素、TGF-β在增生性瘢痕中的形成和发展过程中的重要作用。本研究还首次...
- 关键词：
- 关键词：增生性瘢痕整合素荧光定量PCR
