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抗VEGFR-2 scFv-Fc融合抗体的构建及其在CHO细胞中的稳定表达被引量：4: 2011年; 目前报道的靶向VEGF/VEGFR基因工程抗体多为不含Fc片段的Fabs、cFv等小分子抗体,该文旨在CHO-k细胞中表达抗VEGFR-2 scFv-Fc融合抗体。将抗VEGFR-2 scFv(AK404)基因与含有人IgG1恒定区的真核表达载体pcDNA3.1-Fc连接,重组质粒测序后经脂质体介导转染CHO-k细胞,G418加压筛选获取稳定表达细胞株。RT-PCR、western blot检测目的基因的转录、表达。测序结果表明重组质粒构建成功,RT-PCR及western blot显示目的基因成功整合到宿主基因组并表达。最终获得可稳定表达抗VEGFR-2 scFv-Fc融合抗体的重组CHO-k细胞株,为融合抗体的大量制备和活性研究打下基础。; 杨艳丽张娟何远李海鑫李桉栋王旻; 关键词：VEGFR-2 抗肿瘤血管生成

汉黄芩素衍生物GL-V9在制备银屑病治疗药物中的应用: 本发明公开了汉黄芩素衍生物GL‑V9在制备银屑病治疗药物中的应用，属于生物医药技术领域。本发明通过动物实验和细胞实验探索了GL‑V9对于皮肤炎症银屑病的药效，实验证明GL‑V9作为治疗银屑病的药物能够明显缓解咪喹莫特诱导...; 何远强磊郭青龙王晓萍刘蕴瑶陈乐怡; 文献传递

一种千层纸素外用制剂及其在银屑病治疗上的应用: 本发明公开了一种千层纸素外用制剂及其在银屑病治疗上的应用，所述的千层纸素外用制剂为皮肤给药制剂，选自溶液剂、乳膏剂和凝胶剂。本发明针对千层纸素难以水溶的缺陷，利用合适的溶剂（PEG300和丙二醇）提高了千层纸素的水溶解度...; 何远强磊李沛峰李向征王登

抗EGFR/抗KDR双特异性单链抗体的构建及表达被引量：2: 2012年; 针对EGFR或VEGFR信号通路的相互作用导致的耐药性,为增强抗EGFR或抗VEGFR2抗体单独使用疗效不佳的癌症的治疗效果,本文利用重叠PCR将抗人EGFR胞外区单链抗体基因scFv-E10和抗人VEGFR2(KDR)的单链抗体基因scFv-AK404R融合在一起,得到抗EGFR/抗KDR双特异性单链抗体(bispecific single-chain diabody,scDb)基因,scDb的连接肽序列为15个氨基酸(G4S)3,在肽链的C端引入His标签及myc标签。将scDb基因连接入载体pHEN2,转化大肠杆菌HB2151并诱导表达,经镍柱纯化获得电泳纯scDb蛋白,产量约为570μg.L 1发酵液。ELISA测定显示,scDb与EGFR胞外区的结合与亲本scFv-E10相当,与KDR胞外区的结合略低于亲本scFv-AK404R,表明抗EGFR/抗KDR scDb可与EGFR和KDR两种抗原特异性结合,可用于进一步的抗肿瘤活性研究。; 周雅琼张娟金海珍何远王彤王旻; 关键词：表皮生长因子受体血管内皮生长因子受体2 双特异性单链抗体单链抗体原核表达

抗肿瘤人源化抗体药物的研究进展被引量：2: 2012年; 随着单克隆抗体技术的发展,治疗性抗体药物逐渐占据全球市场,主要应用于肿瘤治疗、抗移植排斥、自身免疫性疾病的治疗等。抗体药物可根据人源化程度不同,分为鼠源抗体、嵌合抗体、人源化抗体和全人源抗体。本文着眼于目前治疗性抗体药物研究热点,聚焦于抗肿瘤人源化抗体药物,结合已上市热点抗肿瘤人源化抗体药物实例,从抗体人源化技术以及人源化抗体生产的角度来阐述目前研究状况。同时,立足于国内外抗肿瘤人源化抗体药物的现状,分析未来发展趋势。; 何远张娟李致科王旻

从细胞免疫应答看银屑病药物研发的最新进展: 2024年; 银屑病是一种自身免疫性皮肤疾病,全球流行率为2%~3%。大量研究证实先天免疫细胞和致病性T细胞的过度活化是导致皮肤炎症和角质细胞增殖的关键环节之一。因此,调节银屑病患者免疫系统的动态平衡可能成为设计新型银屑病药物及治疗方案的重点。近年来,靶向“IL-23-Th17”免疫应答轴的新一代相关生物制剂和小分子药物,临床治疗效果优异。该文阐述了参与银屑病发生发展过程中免疫应答的效应细胞的动态变化,并总结了银屑病治疗药物的最新进展,以期为银屑病的临床治疗及药物研发提供新思路。; 陈乐怡王登何远; 关键词：银屑病免疫应答生物制剂小分子药物

抗VEGFR-2全人源IgG1抗体的构建及其在CHO-k细胞中的表达被引量：1: 2013年; 本文在实验室构建的单链抗体-Fc融合抗体[scFv(AK404R)-Fc]的基础上构建抗VEGFR-2全人源IgG1样全长抗体(Mab-04)。利用重叠PCR,获得Mab-04的轻链和重链的核酸序列后分别克隆到真核表达载体pcDNA3.1,获得重组质粒。脂质体法将重组质粒转染至CHO-k细胞,经Protein A柱纯化细胞培养上清液获得目的蛋白,利用Western blotting检测目的蛋白,ELISA检测Mab-04与抗原亲和力。测序表明重组质粒构建成功,Western blotting检测显示目的蛋白成功表达(1μg·mL-1),ELISA检测阐明该抗体能与抗原结合并呈浓度依赖性(IC50为50 nmol·L-1),表明Mab-04成功表达并正确装配,为进一步大量制备该抗体及其活性研究打下基础。; 李致科何远张娟解伟曹婉璐王泽根王旻; 关键词：VEGFR-2 抗肿瘤血管生成

千层纸素在制备治疗银屑病的药物中的应用: 本发明公开了千层纸素的一种新的医药用途，属于医药技术领域。千层纸素用于制备治疗银屑病的药物，由于其低毒副作用，可作为抗银屑病的药物进行后续开发。; 强磊何远郭青龙高源郭永健钟尤; 文献传递

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何远