侯丽颖
- 作品数：6 被引量：16H指数：2
- 供职机构：哈尔滨医科大学公共卫生学院营养与食品卫生学教研室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学哲学宗教更多>>
- 维生素E琥珀酸酯通过Akt/mTOR信号通路诱导人胃癌细胞SGC-7901发生保护性自噬被引量：3
- 2013年
- 目的:观察维生素E琥珀酸酯(vitamin E succinate,VES)处理SGC-7901细胞后是否发生自噬,并探讨自噬在VES抑制细胞增殖中的作用。方法:用不同浓度(0、5、10、15、20μg/mL)VES处理SGC-7901细胞24 h后,电子显微镜观察自噬体形态;VES处理转染GFP-LC3质粒后的SGC-7901细胞,荧光显微镜观察自噬情况;Western blot检测自噬标志蛋白LC3,以及Akt/mTOR通路关键分子Akt,mTOR活性变化;采用自噬抑制剂氯喹(chloroquine,CQ)和3-甲基腺苷(3-methyladenine,3-MA)处理细胞后,MTT法检测细胞的增殖能力。结果:电子显微镜观察显示经不同浓度VES处理后,细胞中出现了典型的自噬囊泡以及自噬溶酶体等自噬各阶段的形态变化;荧光显微镜观察显示GFP-LC3质粒转染后随VES处理剂量的增加,绿色点状荧光逐渐聚集增强;Western blot结果显示,VES可使LC3-Ⅱ蛋白表达增强;并下调Akt/mTOR通路关键分子Akt,mTOR的活性;MTT结果显示VES+CQ组和VES+3-MA组的细胞增殖抑制率均明显高于VES单独处理组(P均<0.05),即自噬抑制剂CQ与3-MA预处理使细胞增殖率进一步下降,提示VES诱导的肿瘤细胞自噬对肿瘤细胞增殖具有保护作用。结论:VES可以通过抑制Akt/mTOR通路活性诱导人胃癌细胞SGC-7901细胞发生自噬,且此种自噬为保护性自噬。
- 侯丽颖孙燕佩张旭光赵栋吴坤
- 关键词：维生素E琥珀酸酯胃癌细胞SGC-7901自噬
- 维生素E琥珀酸酯处理人胃癌细胞过程中自噬与内质网应激的交互作用被引量：2
- 2015年
- 目的:探讨维生素E琥珀酸酯(VES)处理人胃癌SGC-7901细胞过程中自噬与内质网应激的交互作用。方法:用不同剂量(0、5、10、15、20μg/m L)VES处理人胃癌SGC-7901细胞24 h后,激光共聚焦显微镜观察细胞内自噬标志蛋白微管相关蛋白l轻链3(LC3)荧光强度和分布情况,Western blot分别检测内质网应激标志物葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、葡萄糖调节蛋白94(GRP94)和LC3、Beclin-1的表达情况;在分别加入自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)和氯喹(CQ)以及内质网应激抑制剂4-苯基丁酸(4-PBA)预处理2 h后,以20μg/m L VES处理人胃癌SGC-7901细胞24 h,Western blot分别检测内质网应激标志物GRP78、GRP94及自噬标志蛋白LC3、Beclin-1的变化。结果:与阴性对照组比较,随着VES剂量的增加,激光共聚焦显微镜观察到LC3在细胞内点状分布逐渐聚集和增强,GRP78和GRP94表达先降低后升高(P均<0.05),LC3和Beclin-1表达逐渐升高(P均<0.05);VES+3-MA组及VES+CQ组的GRP78和GRP94蛋白表达均高于单独VES组(P均<0.05);VES+4-PBA组的LC3和Beclin-1蛋白表达均低于单独VES组(P均<0.05)。结论:VES处理人胃癌细胞过程中自噬与内质网应激可以相互调节,具有交互作用。
- 宋华翠侯丽颖綦峥吴坤
- 关键词：维生素E琥珀酸酯内质网应激自噬胃癌细胞
- MTHFR基因C677T和A1298C多态性与儿童孤独症的关系被引量：9
- 2013年
- 目的探讨亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因C677T和A1298C多态性与儿童孤独症的关系,为相关领域的理论研究提供依据。方法采用限制性片段长度多态性聚合酶链反应(PCR-RFLP)和基因测序方法,对200例孤独症儿童与性别年龄匹配的200例对照组儿童MTHFR基因C677T和A1298C多态性进行分析。结果在MTHFR基因C677T位点突变中,病例组突变率为54.5%,对照组突变率为28.0%,差异有统计学意义(χ2=28.97,P<0.05)。病例组T等位基因频率明显高于对照组(χ2=44.90,P<0.05)。对病例组和对照组的基因型突变率进行多重比较,病例组的TT基因型和CT基因型的突变率均高于对照组(χ2值分别为27.00,12.89,P值均<0.012 5)。在MTHFR基因A1298C位点突变中,病例组突变率为28.0%,对照组突变率为17.0%,差异有统计学意义(χ2=6.94,P<0.05)。病例组C等位基因频率高于对照组(χ2=18.32,P<0.05)。对病例组和对照组的基因型突变率进行多重比较,病例组的CC基因型的突变率高于对照组(χ2=13.07,P<0.012 5),而病例组AC基因型的突变率与对照组之间差异无统计学意义(χ2=0.02,P>0.012 5)。在MTHFR基因两位点的联合作用中,677CT-1298CC两位点联合突变对孤独症的影响要比677CC-1298CC,677CT-1298AA,677TT-1298AA单独位点突变影响大。结论 MTHFR基因C677T和A1298C突变可能是儿童孤独症发病的遗传危险因素,且在两位点突变联合作用中,C677T突变对孤独症的影响比A1298C突变明显。
- 赵栋孙彩虹杨晓巍张志宏李楠楠侯丽颖夏薇
- 关键词：基因孤独性障碍儿童
- AMPK在维生素E琥珀酸酯诱导人胃癌细胞自噬中的作用研究被引量：2
- 2016年
- 目的:研究维生素E琥珀酸酯(VES)是否影响人胃癌SGC-7901细胞中腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)活性,并探讨AMPK在VES诱导自噬中的作用。方法:用不同剂量(5、10、15、20μg/m L)VES处理SGC-7901细胞24 h,以及20μg/m L VES分别处理SGC-7901细胞3、6、12、24 h后,Western blot法检测SGC-7901细胞中自噬标志蛋白LC3、Beclin-1及AMPK、ACC及其磷酸化蛋白的表达。用RNAi技术沉默AMPK,20μg/m LVES处理SGC-7901细胞24 h,Western blot法检测LC3、Beclin-1蛋白以及AMPK、m TOR、p70S6K与4EBP-1及其磷酸化蛋白表达,并采用荧光定量PCR法检测LC3 m RNA表达情况。结果:VES处理SGC-7901细胞后,与对照组比较,随着VES剂量的增加、作用时间的增长,AMPK磷酸化水平上升,LC3、Beclin-1蛋白表达增加(P<0.05)。RNAi沉默AMPK后,与单纯VES处理组比较,LC3、Beclin-1蛋白表达降低,LC3 m RNA表达下降(P<0.05);m TOR、p70S6K及4EBP-1磷酸化活性升高(P<0.05)。结论:VES可诱导SGC-7901细胞中AMPK活化,AMPK活化后影响m TOR及其下游分子活性,继而诱导自噬的发生。
- 余洋侯丽颖宋华翠吴坤
- 关键词：维生素E琥珀酸酯腺苷酸活化蛋白激酶自噬胃癌细胞
- 维生素E琥珀酸酯处理人胃癌细胞过程中自噬与活性氧蓄积的交互作用被引量：1
- 2016年
- 目的:探讨维生素E琥珀酸酯(VES)处理人胃癌SGC-7901细胞过程中自噬与活性氧(ROS)蓄积是否存在交互作用。方法:不同剂量(0、5、10、15、20μg/m L)VES处理人胃癌SGC-7901细胞24 h,采用免疫荧光染色观察细胞内自噬标志蛋白微管相关蛋白l轻链3(LC3)的荧光强度和分布情况,Western blot检测自噬标志蛋白LC3和Beclin-1的表达情况,流式细胞术检测细胞内ROS水平;用ROS淬灭剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)预处理2 h后以20μg/m L VES处理人胃癌SGC-7901细胞24 h,免疫荧光染色观察细胞内LC3荧光强度和分布情况,Western blot检测LC3和Beclin-1的表达情况;RNA瞬时干扰阻断BECN-1基因的表达后,以20μg/m L VES处理人胃癌SGC-7901细胞24 h,流式细胞术检测细胞内ROS水平。结果:与对照组相比,随着VES作用剂量的增加,LC3的荧光强度逐渐增强;LC3和Beclin-1蛋白表达均逐渐升高;流式细胞术检测结果显示胞内ROS水平逐渐增强;淬灭ROS之后LC3荧光强度以及LC3和Beclin-1蛋白表达水平均明显低于VES单独处理组(P<0.05);阻断自噬关键基因BECN-1后细胞内ROS水平高于VES单独处理组(P<0.05)。结论:VES可诱导人胃癌细胞发生自噬及ROS蓄积,并且VES处理人胃癌细胞过程中自噬与ROS水平可以相互调节,具有交互作用。
- 徐培翔侯丽颖宋华翠余洋吴坤
- 关键词：维生素E琥珀酸酯胃癌细胞自噬活性氧
- 芹菜素对非洲爪蟾卵母细胞体外成熟的影响及其作用机制
- 2013年
- 目的：探讨不同浓度的芹菜素对非洲爪蟾卵母细胞体外成熟的影响及作用机制。方法：将健康的非洲爪蟾卵母细胞移入含不同浓度（O、20、80、160和500μmol／L）的芹菜素培养液中培养，另设阳性对照（孕酮5μg／mL）组。每隔1h观察生发泡破裂（germinal vesicle breakdown，GVBD）发生情况、并记录发生GVBD的细胞数目；同时用10％的三氯乙酸固定，观察细胞核的变化；采用荧光染色法在激光共聚焦显微镜下观察细胞染色体的变化。收集上述各浓度芹菜素处理8h后的卵母细胞，采用Western blot法检测卵母细胞成熟相关蛋白p—Erk1、Mos和CyclinB2的表达。结果：与阴性对照组相比，当芹菜素浓度为80～500μmol／L且作用时间在4～8h时，卵母细胞GVBD发生率均明显升高（P均〈0．05）。在80．500μmol／L芹菜素处理细胞8h后，p-Erk1、Mos和CyclinB2蛋白表达量明显高于阴性对照组（P〈0．05）。结论：芹菜素在卵母细胞体外培养过程中促进了第1次减数分裂的开启，其机制可能与MPF和MAPK信号通路的活化有关。
- 张伦高舒彭志晴侯丽颖吴坤
- 关键词：芹菜素卵母细胞体外成熟非洲爪蟾
