侯敏 作品数:42 被引量:159 H指数:7 供职机构: 昆明市疾病预防控制中心 更多>> 发文基金: 国家科技重大专项 更多>> 相关领域: 医药卫生 轻工技术与工程 更多>>
2011-2016年昆明市手足口病病原学特征分析 被引量:15 2019年 目的阐明2011-2016年昆明市手足口病病原学特征,为手足口病防控提供参考依据。方法收集2011年1月-2016年12月昆明市手足口病临床诊断病例标本,使用实时定量荧光PCR(real-time PCR)方法检测手足口病病毒核酸。用SPSS 20.0软件分析计数结果。结果2011-2016年检测粪便、肛拭子及咽拭子等标本共计6373份,其中人肠道病毒通用型(human enterovirus universal, EV-U)阳性4679份,阳性率73.42%。昆明市手足口病病原由肠道病毒71型(enterovirus A71, EV-A71)、柯萨奇A组16型(coxsackievirus A16, CV-A16)及其他肠道病毒组成,其优势病原不断变化,2011-2016年优势病原依次为EV-A71型、CV-A16型、其他肠道病毒、CV-A16型、其他肠道病毒、CV-A16型;病原构成差异有统计学意义(χ^2=967.591,P<0.001)。粪便标本阳性率(81.84%)较肛拭子(60.65%)及咽拭子(32.40%)高(χ^2=836.895,P<0.001),重症手足口病标本的EV-A71型检出最多,占重症阳性标本的50.53%(431/853)。发病高峰在 4-7月,占病例标本总数的53.68%(3 421/6 373),由单峰分布演变为双峰变化。主城区的官渡、西山、五华、盘龙病例较多,不同地区手足口病病例标本的阳性率差异有统计学意义(χ^2=1 090.546,P<0.001)。发病年龄集中在6岁以下,其中1~3岁年龄段的病例最多;男、女发病比例为1.46∶1,男女病原构成比差异无统计学意义(χ^2=3.367,P=0.186)。结论昆明市手足口病呈现明显季节性、年龄特征及一定的地区分布规律;病原以EV-A71型和CV-A16型为主,其他肠道病毒的构成比逐渐上升;EV-A71型是引起重症病例的主要病原,应重点防控。 李文龙 刘艳艳 简千棋 马丽波 刘如锦 侯敏 李旭关键词:手足口病 REAL-TIME PCR 肠道病毒 病原学监测 2014-2018年昆明市重症手足口病病原柯萨奇病毒A6型的流行与遗传变异特点 被引量:10 2021年 目的了解2014-2018年昆明市重症手足口病患者感染的柯萨奇病毒A6(Coxsackievirus A6,CV-A6)型流行情况及其全长VP1区基因特征。方法收集2014-2018年昆明市重症手足口病病例资料及标本1064份,采用Real Time RT-PCR方法进行肠道病毒核酸检测,分析其流行特征。利用随机数表随机选取63例重症CV-A6阳性标本,对其进行完整VP1区基因序列测定,使用Mega6.0软件进行序列分析并构建系统进化树,并比较其核苷酸、氨基酸同源性及氨基酸变异情况。结果2014-2018年昆明市重症手足口病例中共检出肠道病毒阳性标本666份,其中CV-A6阳性195份。5年中重症手足口病例报告数呈下降趋势,但每年均有重症CV-A6病例报告,发病高峰期在4~7月,呈单峰模式,6月达最高峰。感染病例中男女性别比为2.55∶1,≤2岁儿童居多(73.33%),且重点集中在官渡和西山两区。63个CV-A6毒株均位于D3基因亚型D3a进化分支,与国内多地区CV-A6处于共循环状态。该分支分为3个进化小分支,D3a.1包含2014-2016年的所有毒株及少量2017年、2018年毒株;D3a.2包含绝大多数2017年及2018年毒株,D3a.3只有1株2014年昆明株。VP1区氨基酸在多个位点上与原型株存在特异突变,氨基酸变异已呈现年度间规律性。结论CV-A6是引起昆明市重症手足口病主要抗原之一,持续开展CV-A6分子流行病学检测,对昆明市手足口病的防控具有重要意义。 刘艳艳 向以斌 李文龙 简千棋 马丽波 刘如锦 杨瑶 朱心 侯敏关键词:重症手足口病 流行病学 BD MAX全自动工作站在肠道病毒检测中的优势 2021年 目的比较常规检测方法与BD MAX全自动工作站在手足口病病原学检测中的差异,探讨应用BD MAX全自动工作站检测肠道病毒的可行性。方法收集2017年1月—2020年9月昆明市临床诊断为手足口病病例的标本,随机选择136份,以实验室常规采用的实时荧光PCR检测方法和BD MAX全自动工作站方法,对结果进行Cohen’s kappa一致性分析;用无酶水对检测试剂盒提供的U/CA16/EV71假病毒阳性对照做10倍梯度稀释,记录各稀释度检测结果;随机取两份阳性标本,分别用两种方法平行重复检测10次,计算Ct值的平均值和变异系数,进行重复性分析。结果两种方法对肠道病毒U/CA16/EV71的检测结果一致性好,Cohen’s kappa值为0.889,95%置信区间(95%CI)为0.803~0.976;两种方法检测CA16的敏感性一致,常规方法检测EV71和U的敏感性略高于BD MAX方法;在CA16标本的检测中,常规检测方法变异系数CV(通用型)=1.07%、CV CA16=0.62%,BD MAX方法 CV(通用型)=1.63%、CV CA16=2.19%;在EV71标本的检测中,常规检测方法变异系数CV(通用型)=1.28%、CV EV71=1.20%,BD MAX方法 CV(通用型)=2.37%、CV EV71=1.73%。结论 BD MAX全自动工作站检测结果较为准确,敏感性、重复性好,人工操作少,便于标准化推广,且耗时短,在小批量标本的病原检测及暴发疫情或应急检测中具备较好优势。 刘艳艳 侯敏 陈春燕 段忠文 李桂满 张艳 李育芬 颜军关键词:手足口病 实时荧光PCR 肠道病毒 单核细胞增生李斯特菌三种检测方法的比较 被引量:3 2013年 目的:通过比较国标法、real—timePcR法和LAMP方法,得到适合基层实验室快速检测单核细胞增生李斯特菌的方法。方法:分别用国标法、real-timePcR法和环介导的等温扩增(100p—mediated isothermal amplification,LAMP)法检测李斯特菌,并进行方法比较。结果:三种方法对单增李斯特菌的检测结果一致.国标法整个检测过程需5~7d;real—timePCR法实验条件要求高,成本高,检测需1.5~2.5d;LAMP法实验条件低,成本低,检测时限与real—timePCR相同。结论:LAMP~检测单增李斯特菌灵敏度高、特异性强、快速高效和低成本,适合基层实验室应急检测和现场监测使用。 张烜榕 颜军 李文龙 侯敏 蒋玉佳 卜舒 李桂满关键词:国标法 LAMP PCR 昆明地区2018-2020年腹泻患者中艰难梭菌感染特征分析 被引量:1 2023年 目的对2018-2020年昆明地区腹泻患者中艰难梭菌感染特征进行分析,为后续监测和防治提供数据支持。方法收集2018-2020年云南省4家哨点医院腹泻患者粪便标本共388份,使用实时荧光定量PCR方法进行艰难梭菌粪便毒素基因检测,对结果阳性的粪便标本进行菌株的分离,用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱鉴定菌株。提取分离菌株的基因组DNA进行多位点序列分型(MLST)。分析毒素阳性和菌株分离阳性与患者的临床特征以及艰难梭菌阳性与其他病原共感染的情况。结果388份粪便标本中,艰难梭菌内参tpi基因阳性标本47份,总阳性率为12.11%。其中,非产毒艰难梭菌4份(8.51%),产毒艰难梭菌43份(91.49%)。47份阳性标本分离得到18株艰难梭菌,阳性标本的分离率为38.30%。其中tcdA、tcdB、tcdC、tcdR和tcdE基因均为阳性的菌株14株。18株艰难梭菌的二元毒素均为阴性。所有分离菌株的MLST结果共形成10种序列型(ST),其中ST37型5株(27.78%);ST129、ST3、ST54和ST2型各2株;ST35、ST532、ST48、ST27和ST39型各1株。粪便毒素基因阳性(tcdB+)结果与患者年龄、就诊前发热差异有统计学意义;菌株分离阳性仅与患者年龄差异有统计学意义。同时,部分腹泻患者存在艰难梭菌与其他腹泻病毒共感染的情况。结论昆明地区腹泻患者中艰难梭菌的感染多为产毒株,MLST结果具有高度的离散特征,应加强开展艰难梭菌的监测和预防。 李桂满 古文鹏 侯敏 贾森泉 王媛媛 白璐璐 尹建雯 周永明 伏晓庆 卢金星 吴媛关键词:艰难梭菌 腹泻 毒素基因 多位点序列分型 共感染 云南边防部队产酸克雷伯菌生化特性与致病性研究 被引量:5 2009年 目的对从云南边防部队腹泻患者中分离的产酸克雷伯菌进行鉴定,并对其进行生化特性鉴定、肠毒素检测及致病性和药敏分析研究。方法在SS琼脂平板上分离获纯培养菌,光学显微镜和电子显微镜观察形态,常规生化鉴定并用VITEK32全自动微生物生化分析仪进行系统鉴定并做药敏分析,乳鼠灌胃测定热稳定性肠毒素(ST),小白鼠腹腔注射测定毒力。结果分离的产酸克雷伯菌产热稳定性肠毒素(ST),致病性较强。结论本次分离的产酸克雷伯菌是具有较强毒力的菌株,与临床症状密切有关,应继续加强菌株感染率和毒力监测。 李刚山 范泉水 朱姝媛 朱琼媛 侯敏 张富强 邱薇 张琳 王意银 周卫国 覃敏 袁贵红关键词:腹泻 产酸克雷伯菌 一种便携组装式试管用支撑架 本实用新型提供一种便携组装式试管用支撑架。所述便携组装式试管用支撑架包括支撑板;支撑槽,所述支撑槽开设在所述支撑板的顶部,所述支撑槽的底部内壁上开设有多个贯穿开口;多个橡胶缓冲套,多个所述橡胶缓冲套分别设置在多个所述贯穿... 刘艳艳 颜军 李桂满 侯敏 简千棋 杨瑶 庞磊 马丽波 段忠文 王慧雯 蒋玉佳2019年昆明市A型流感病毒H3N2亚型基因特征分析 2024年 目的分析昆明市暴发流感疫情A(H3N2)亚型流感病毒血凝素(hemagglutinin,HA)及神经氨酸酶(neuraminidase,NA)基因特征,为流感防控提供科学依据。方法选取2019年1—12月昆明市暴发的7起疫情病例及哨点医院监测病例分离得到的19株A(H3N2)亚型流感毒株进行测序,采用MegAlign分析同源性,采用Jmodeltest、PhyML 3.1构建系统进化树,采用MEGA X分析突变位点。结果2019年昆明市流感暴发疫情集中在冬春季节的学校,来源于疫情和哨点医院的毒株均高度同源,同位于3C.2a1b.1b分支,与位于3C.3a1分支的2019年疫苗株A/Kansas/14/2017偏离。从疫情病例分离得到的13株毒株与从哨点医院监测病例分离得到的5株毒株分别在HA1抗原决定簇A区与B区增加T135K、S137F、K144S与S159Y、K160T突变位点,其中2株从疫情病例分离得到的毒株在抗原决定簇A区额外增加I140M突变位点,可能逃逸抗体识别,其中T135K、S137F位于130环,可能改变病毒与受体细胞的结合特性。在抗原决定簇B区增加158 NYTY糖基化位点,可能阻挡抗体识别病毒。所有分离株在NA抗原决定簇增加T329S突变位点。结论昆明市流感防控应该加强冬春季人员集中场所的监测,及时发现免疫逃逸和毒力增强的变异株,更新疫苗组分。 简千棋 马丽波 朱心 杨瑶 刘艳艳 刘如锦 侯敏 李文龙关键词:神经氨酸酶 系统进化树 副溶血弧菌的分离鉴定与菌株毒力研究 被引量:5 2003年 李刚山 侯敏 范泉水 孙阳 邱薇 尹惠琼 龙沛然关键词:副溶血弧菌 从袋装生鲜食品中检出单增李斯特菌 被引量:5 2010年 侯敏 翟珏明 廖斌 文静波关键词:单增李斯特菌 食品袋