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cnot2基因是生物钟信号通路中的一个负向因子: 2015年; 目的：克隆表达并研究cnot2（CCR4-NOT转录复合体亚基2）基因在哺乳动物生物钟信号通路中的作用，为进一步研究生物钟信号通路提供理论依据。方法提取B6小鼠的总RNA进行体外反转得到cDNA。依据小鼠的基因序列设计合成一对特异性引物，以反转录的小鼠cDNA为模板，扩增得到cnot2的基因片段。将基因克隆到表达载体，转染HEK293T细胞系，获得总蛋白后通过Western blot检测该基因在体外是否成功表达。然后设计实验体系，收集细胞利用报告基因检测试剂盒检测per1-luc的活性，最后通过免疫共沉淀技术证明cnot2与主要生物钟基因之间的相互作用。结果 cnot2基因能够抑制哺乳动物生物钟基因bmal1和clock的转录活性，其可能的机制是cnot2能够竞争性地结合bmal1和clock，使bmal1-clock复合体的转录活性降低。结论 cnot2基因是生物钟信号通路中的一个负向因子。; 张云峰秦海棠张双艳胡孟娜冯永杰; 关键词：特异性 RT-PCR WESTERN BLOT

苏州市患病水生动物体内细菌的分离鉴定及药敏试验被引量：3: 2019年; 为了解苏州市不同地区患病水生动物组织中感染细菌的种类及其耐药性,于2014年6～10月从不同地区采集的患病鱼、虾、蟹和中华鳖组织中共分离到14株细菌,通过16S rRNA基因分析对细菌进行了鉴定,并调查了他们对链霉素、恩诺沙星、强力霉素、庆大霉素硫酸盐和甲砜霉素等5种抗生素的抗性及最低抑菌浓度。结果显示:从不同地区水生动物分离到的同种细菌对同种抗生素的抗性有明显差异,其中,分离到的嗜水气单胞菌及摩根氏菌有多重耐药性;对14株细菌进行质粒抽提和琼脂糖凝胶电泳分析,发现8株细菌中存在分子量不同的质粒,且不同地区来源的同种细菌所含有的质粒的分子量不同,耐药性较强的嗜水气单胞菌和摩根氏菌均含有质粒;嗜水气单胞菌质粒的序列测定结果显示,该质粒与其抗药性无关;转化实验结果显示,从摩根氏菌分离的1.8 kb质粒与氨苄青霉素抗药性有关。; 冯永杰孙振丽宣引明蒋明潘云生张益明龚叶平薛仁宇胡小龙曹广力贡成良; 关键词：药敏试验质粒

基础医学实验室生物安全管理探索被引量：1: 2015年; 基础医学实验室是高校的重要实验阵地,不仅可以为教师提供实验教学,传播知识和培养人才,也是科学研究的重要场所,促进国家科技进步。目前状态下,基础医学实验室存在巨大的安全隐患,这些安全问题不仅危害了实验室里的操作人员,同时对整个环境也造成了巨大的危害。本文从多个方面和层次剖析了基础医学生物实验室的生物安全问题。; 冯永杰; 关键词：生物安全管理生物实验室病原微生物动物实验细胞实验

胎鼠子宫内电穿孔检测胎鼠脑生物学形态指标被引量：1: 2013年; 该课题对胚胎期12．5、13．5、14．5d的C57／BL6孕鼠胎鼠以不同的电压参数进行子宫内电穿孔，分析比较不同电压对不同胚胎期胎鼠的存活率，从而总结出适应胚胎期12．5、13．5、14．5d胎鼠的最优电转电压参数。结果显示，胚胎早期，电转所需要的电压相对小一些，同样胚胎早期的胎鼠的存活率低一些。。在E14．5胎鼠脑室单侧电穿孔电转带有PCDF．EGFP质粒。该质粒表达绿色荧光蛋白（GFP）。进一步分析了电转后不同天数转染细胞的迁移程度，结果显示，在电转后2d，转染阳性的细胞主要分布在脑室和中间带，而在转染后3d，转染阳性细胞在脑室、中间带及皮层均有分布。继而对电转后的皮层厚度进行了分析，结果显示，电转皮层的厚度与未进行电转的皮层没有明显区别。该结果为子宫内电转在皮层发育中的应用提供了技术支持，并表明子宫内电转可以应用在皮层发育研究中。; 冯永杰陈溪萍黄娅王为华; 关键词：胎鼠迁移成活率

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冯永杰