刘文超
- 作品数：5 被引量：21H指数：3
- 供职机构：陕西师范大学更多>>
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- 相关领域：生物学农业科学理学医药卫生更多>>
- 5种产地九节菖蒲脂溶性成分GC-MS比较分析被引量：5
- 2012年
- 分析鉴定和比较5种产地九节菖蒲中的脂溶性成分。采用索氏提取法提取脂溶性成分,甲酯化后采用气相色谱-质谱(GC-MS)联用技术分离并鉴定其组分,并用面积归一化法计算出各组分的相对百分含量。宁夏、山西、河南、四川和陕西九节菖蒲中分别鉴定出18、22、20、20种和20种脂溶性成分。5种产地九节菖蒲中的共有成分为8个,共有主成分为棕榈酸和亚油酸。不同产地九节菖蒲中脂溶性成分组成及相对含量差异较大,可为九节菖蒲的鉴别和临床应用提供参考。
- 刘文超李敏李翠芹
- 关键词：九节菖蒲脂溶性成分气相色谱-质谱法
- 丹参ERF转录因子对丹参萜类成分代谢的影响
- 刘文超周露姚伟王东浩化文平李翠芹王喆之
- 关键词：丹参转录因子
- 文献传递
- 干涉丹参SmORA1对植物抗病和丹参酮类次生代谢的影响被引量：8
- 2016年
- 【目的】乙烯响应因子(ethylene response factor,ERF)是植物特有的一类转录因子,普遍参与植物各类胁迫反应。前期从药用植物丹参(Salvia miltiorrhiza)中筛选得到了一条与长春花(Catharanthus roseus)中Cr ORCA3高度同源的ERF转录因子编码基因(命名为Sm ORA1)。论文旨在通过干涉丹参Sm ORA1的表达,进一步明确Sm ORA1在植物抗病反应与丹参酮合成代谢调控中的作用。【方法】扩增Sm ORA1基因片段,构建Sm ORA1基因干涉载体pk-ORAi并采用农杆菌介导的叶盘转化法转化丹参,经抗生素抗性筛选和PCR鉴定获得阳性转基因丹参植株;采用分光光度法或酶联免疫方法检测立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)侵染后转基因株系中丙氨酸解氨酶(phenylalnine ammonialyase,PAL)、过氧化氢酶(catalase,CAT)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)等抗性相关酶活性和还原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)、脯氨酸(proline,Pro)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量等抗性相关生理指标的变化;采用HPLC法考察干涉Sm ORA1表达对二氢丹参酮、隐丹参酮和丹参酮ⅡA等丹参酮类次生代谢物含量的影响;采用实时定量PCR考察干涉Sm ORA1对丹参株系抗性基因和丹参酮合成相关关键酶基因表达的影响。【结果】经抗生素和PCR筛选获得了11个阳性株系,进一步采用实时定量PCR分析得到3个Sm ORA1表达显著下调的转基因株系(RNAi-11、RNAi-18、RNAi-22),干涉效率达到80%以上。立枯丝核菌对丹参植株有明显的致病力,可以有效诱导丹参发病;其侵染后,Sm ORA1-RNAi转基因株系病情指数显著高于野生型(WT)和空载(VK)对照株系,病情更严重;Sm ORA1-RNAi转基因株系中的MDA含量显著高于WT和VK对照株系,说明干涉Sm ORA1的丹参株系抗衰老能力显著下降;植物抗性相关的PAL、CAT和SOD等酶活性以及GSH和Pro等物质含量显著低于对照株系,说明干涉Sm ORA1的丹参株系抗病性也呈现明显减弱;进一步研究
- 化文平刘文超王喆之李翠芹
- 关键词：丹参抗病性丹参酮
- 丹参抗性基因SmORA1的克隆及诱导表达分析被引量：2
- 2015年
- 该研究采用PCR方法从丹参中克隆出一条乙烯应答因子结合蛋白(ERF)转录因子编码基因,命名为SmORA1,GenBank登录号为KT359598。经分析发现该基因全长648bp,不包含内含子,编码206个氨基酸残基。编码蛋白SmORA1含有典型的AP2结合结构域。表达分析结果表明,SmORA1主要在丹参根中表达,且该基因的表达明显受到茉莉酸甲酯(MeJA)、脱落酸(ABA)、乙烯(ET)、机械创伤和病原菌等逆境信号的诱导,但低温和脱水情况下SmORA1表达下调。研究表明,SmORA1参与丹参生物胁迫反应,可整合JA、ABA、ET和病原菌等胁迫信号途径。
- 化文平刘文超贾林泉王喆之李翠芹
- 关键词：丹参基因克隆胁迫
- 丹参2-酮戊二酸依赖性双加氧酶基因克隆及表达分析被引量：6
- 2012年
- 以商洛紫花丹参为材料,对其转录组序列SRA020132进行Blast分析,采用PCR技术克隆得到丹参2-酮戊二酸依赖性双加氧酶基因Sm2-ODD1,GenBank登录号为JN935923。Sm2-ODD1基因全长1 365bp,包含3个外显子和2个内含子;cDNA全长1 189bp,读码框951bp,编码316个氨基酸残基;预测的编码蛋白具有2-酮戊二酸依赖性双加氧酶中结合2-酮戊二酸和亚铁离子的"H-T-D"、"H-X"和"R-Y-S"保守基序以及"果冻状"空间结构。表达分析显示,Sm2-ODD1在丹参各个器官都表达,但表达水平具有组织特异性,在根中表达量最高,在叶中表达量最低;该基因表达明显受到MeJA、GA3和ABA的诱导,可能参与了丹参萜类代谢下游途径。
- 刘文超王东浩王喆之李翠芹
- 关键词：丹参基因克隆实时荧光定量PCR
