刘碧瑜
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
- 供职机构：广东药学院更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金广东省医学科学技术研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 一种HCV靶向性M1GS核酶的构建及其体外活性被引量：3
- 2011年
- 目的构建对HCV基因组具有特异切割作用的新型靶向性核酶-M1GS。方法针对HCV基因组的保守区（5′UTR）设计并合成一段引导序列,通过PCR扩增直接将该引导序列连接于大肠杆菌核糖核酸酶P的催化亚基（M1 RNA）的3′末端,从而构建一类靶向性M1GS核酶。结果体外切割实验表明,所构建的核酶（M1GS-HCV/C67）对HCV5′UTR具有明显的切割作用,切割的位点在靶序列67~68 nt之间,属于特异性切割。结论构建了一种对HCV5′UTR具有靶向切割活性的M1GS核酶,为胞内反义效应及动物模型内抗病毒效应的评价提供了实验材料,为新型抗HCV药物的研究奠定了基础。
- 张文军刘碧瑜周玉珍林桂先张欣李红枝
- 关键词：丙型肝炎病毒
- 丙型肝炎病毒核心基因靶向性M1 GS核酶的构建及鉴定
- 2011年
- 目的构建一种具有丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)靶向性的M1GS核酶,为进一步研究引导序列(guide sequence,GS)引导核酶P在RNA水平阻断HCV核心基因(core gene,C)的表达作前期基础。方法选择HCV基因组中序列相对保守且在病毒复制过程中起关键作用的核心基因作为靶基因,针对该基因mRNA中的潜在切割位点(第52位),设计相应的引导序列及桥序列(bridge sequence),以PCR扩增M1GS,将其插入pGEM-3Z克隆载体;重组的克隆载体经EcoRⅠ和HindⅢ双酶切、测序及体外转录鉴定。结果 M1GS-HCV/C52克隆载体经双酶切、琼脂糖凝胶电泳证明插入片段与M1RNA片段大小相符;体外转录产生的M1GS-HCV/C52核酶在体外切割实验中将HCV核心基因RNA切割成2个片段,片段大小符合预期。结论成功构建出具有体外靶向切割活性的HCV核心基因靶向性M1GS核酶。
- 刘碧瑜张文军
- 关键词：核酶靶向丙型肝炎病毒核心基因
