- 胶质细胞源性神经营养因子促进中脑源神经干细胞增殖和向多巴胺能神经元分化被引量：3
- 2010年
- 目的:探讨胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)对中脑源神经干细胞(mNSCs)增殖、分化能力和表达垂体同源盒家族因子3(Pitx3)、孤儿核受体相关因子1(Nurr1)和酪氨酸羟化酶(TH)蛋白的影响。方法:取E14.5d大鼠中脑组织体外培养原代mNSCs,增殖培养传三代后进行分化实验;使用免疫荧光方法检测培养分化的mNSCs表达Pitx3、Nurr1和TH蛋白。结果:在GDNF作用下,体外培养的mNSCs克隆球直径增大,数量增多;分化的神经元中Pitx3、Nurr1和TH蛋白表达增加(P<0.05)。结论:在体外培养条件下,GDNF有促进mNSCs增殖和向多巴胺能神经元分化的作用。
- 姜宇曾水林鲁佑瑜李涛朱建宝刘钟姜连玉
- 关键词：酪氨酸羟化酶多巴胺能神经元胶质细胞源性神经生长因子
- 局灶性脑缺血再灌注损伤对大鼠延髓内脏带NOS阳性神经元与FOS蛋白表达的影响被引量：4
- 2001年
- 目的 :观察大鼠局灶性脑缺血 4h再灌注不同时间对延髓内脏带 (MVZ)内一氧化氮合酶 (NOS)阳性神经元分布及FOS蛋白表达的影响 ,探讨NOS阳性神经元与FOS蛋白表达的变化及相互关系 ,阐明在缺血状态下MVZ的功能作用机制。方法 :以大脑中动脉线栓法建立局灶性脑缺血再灌注模型 ,采用NADPH d组织化学 (组化 )反应、FOS蛋白免疫组化反应及双重染色技术显示MVZ在不同时相的 3种阳性神经元变化 ,并以假手术组和正常对照组作对照。结果 :脑缺血组MVZ内NOS阳性神经元染色反应增强和FOS蛋白表达随脑缺血后再灌注时程而变化 ,并见有 15 %～ 2 0 %阳性双染细胞。结论 :在局灶性脑缺血再灌注损伤过程中 ,MVZ内NOS阳性神经元与FOS蛋白表达的变化具有相关性 。
- 晋光荣刘培党张忠红刘钟花菊兰
- 关键词：延髓内脏带FOS蛋白局灶性脑缺血
- 脑缺血后大鼠前脑NOS神经元与FOS蛋白表达的研究被引量：4
- 2002年
- 目的 :观察大鼠全脑缺血再灌注后前脑NOS阳性神经元分布和FOS蛋白表达时程变化 ,探讨其相互间的变化关系及其在脑缺血损伤机制中的可能作用。方法 :采用四血管闭塞模型、运用NADPHd组化反应、FOS免疫组化反应及两者的双重反应技术 ,对全脑缺血 30min再灌注 2h、4h、8h、1 2h、2 4h、4 8h进行研究。结果 :缺血组前脑NOS阳性神经元数目和染色强度增加 ,FOS蛋白表达随再灌注时程而变化 ,并可见有约 1 0～ 1 5 %NOS/FOS双染细胞。结论 :全脑缺血再灌注损伤过程中 ,前脑NOS阳性神经元的分布与FOS蛋白表达密切相关。
- 晋光荣刘钟黄艳军刘俊华花菊兰
- 关键词：前脑脑缺血一氧化氮合酶
- 雪旺细胞和嗅鞘细胞分别联合神经干细胞移植治疗帕金森病的作用比较
- 目的：比较嗅鞘细胞(OECs)与雪旺细胞(SCs)分别与神经干细胞(NSCs)共培养和联合脑内移植对NSCs增殖、分化及对PD大鼠模型的治疗作用。
方法：1、NSCs培养：取E14.5d SD大鼠室管膜下区(S...
- 刘钟
- 关键词：嗅鞘细胞雪旺细胞神经干细胞脑移植帕金森病
- 文献传递
- 嗅鞘细胞联合神经干细胞脑内移植改善Parkinson病大鼠行为的观察被引量：3
- 2007年
- 为了观察嗅鞘细胞(OECs)联合神经干细胞(NSCs)脑内移植对Parkinson病(PD)的治疗作用,首先将6-OHDA注射至左侧黑质致密部和腹侧被盖区制备PD大鼠。将成功制备的PD大鼠随机分为5组,即0.9%生理盐水对照组、单纯移植NSCs或OECs组、OECs+NSCs共移植组和PD模型对照组。将培养并传至第3代的NSCs、OECs和OECs+NSCs分别移植到PD大鼠的纹状体内,于移植后7、14、30、60d检测PD大鼠旋转行为变化后处死,取脑做冰冻切片,行BrdU、酪氨酸羟化酶(TH)、p75免疫荧光和TH免疫组织化学检测。移植后21d以内,各组大鼠的旋转行为无明显变化;30d和60d时,单纯移植NSCs或OECs组和OECs+NSCs共移植组与生理盐水和模型对照组相比,旋转行为有较明显的改善(P<0.05),其中OECs+NSCs共移植组的旋转行为改善更为显著。在移植后30d和60d,单纯移植NSCs或OECs组在移植区可见少数TH阳性神经元,而OECs+NSCs共移植组的TH阳性神经元明显多于单纯移植NSCs或OECs组(P<0.05)。上述结果表明:OECs能促进胚鼠中脑来源的NSCs向TH阳性神经元分化;单纯移植NSCs或OECs和OECs+NSCs共移植,均能不同程度地改善PD大鼠的旋转行为,但联合移植优于单纯移植。
- 曾水林李升刘钟李凤飞朱建宝李涛刘卫国
- 关键词：嗅鞘细胞神经干细胞脑移植PARKINSON病
- 施万细胞诱导共培养骨髓基质细胞向多巴胺能神经元分化
- 2009年
- 观察施万细胞(SCs)对骨髓基质细胞(BMSCs)的诱导分化作用。分离和体外培养SD大鼠SCs和BMSCs,分为SCs+BMSCs共培养(实验组)和BMSCs单独培养(对照组)。用流式细胞仪(FCM),S100、Brdu/nestin、Brdu/TH免疫荧光法分别鉴定BMSCs、SCs和BMSCs的分化情况。第2代SCs呈S100阳性,第3代BMSCs呈CD29和CD90阳性,CD45阴性。二者共培养3d后,可见Brdu/nestin免疫荧光双标细胞,阳性率达28.3±1.3%,与对照组比较,P<0.05。7d后,Brdu/nestin双标细胞减少,出现Brdu/TH免疫荧光双标细胞,阳性率为19.2±1.6%,与对照组比较,P<0.05。而对照组始终只见Brdu单标细胞。上述结果表明SCs可诱导共培养的BMSCs分化为DA能神经元。
- 闵晓云曾水林刘钟姜宇朱建宝高兴
- 关键词：施万细胞骨髓基质细胞分化多巴胺神经元
- 胶质细胞源性神经营养因子对培养的胚鼠脑室下区神经干细胞表达Pitx3及酪氨酸羟化酶的影响被引量：3
- 2007年
- 目的:观察胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)对培养的胚鼠脑室下区(SVZ)神经干细胞(NSCs)表达Pitx3、酪氨酸羟化酶(TH)的影响。方法:取胚鼠SVZ组织,进行细胞培养。分为GDNF+NSCs共培养组和NSCs单独培养对照组。用Pitx3、TH、Pitx3/TH免疫荧光单标和双标及Nestin免疫组化法进行检测。结果:共培养组5 d时形成神经球,10 d时球体积不断增大,12 d后开始贴壁生长,并向四周伸出突起并开始分化。对照组神经球明显少于共培养组。14 d共培养组Pitx3、TH、Pitx3/TH阳性细胞明显高于对照组。结论:GDNF能上调SVZ区NSCs表达Pitx3和TH,诱导NSCs向多巴胺(DA)能神经元分化。
- 李凤飞李升刘钟刘云龙姜宇朱建宝曾水林
- 关键词：胶质细胞源性神经营养因子脑室下区神经干细胞酪氨酸羟化酶
- 施万细胞对共培养的神经干细胞增殖与分化的影响被引量：3
- 2007年
- 目的:探讨施万细胞诱导神经干细胞增殖与分化的影响因素。方法:大鼠胚胎神经干细胞单独培养及与新生SD大鼠施万细胞共培养,观察神经干细胞的形态变化,并分别检测特异性标志蛋白S-100、NF和GFAP的表达。结果:相差显微镜下可见共培养组大部分神经干细胞伸出多个细长突起;与单独培养组相比,免疫荧光染色显示共培养组NF表达阳性细胞数多;GFAP表达阳性细胞数少。结论:施万细胞可促进共培养的神经干细胞增殖,并可诱导神经干细胞向神经元方向分化。
- 刘钟曾水林李凤飞姜宇朱建宝
- 关键词：施万细胞神经干细胞增殖分化
- pitx3和nurr1基因在不同年龄大鼠不同脑区的表达变化被引量：2
- 2008年
- 目的:探讨正常不同年龄SD大鼠不同脑区pitx3、nurr1基因的表达变化。方法:使用RT-PCR、免疫印迹法和免疫荧光方法检测pitx3、nurr1基因在正常不同年龄SD大鼠不同脑区转录与翻译水平的表达。结果:RT-PCR、免疫印迹法检测显示,pitx3、nurr1基因在各年龄组大鼠中脑、大脑皮质、海马、纹状体、嗅球和下丘脑均有表达,其中在海马和中脑表达较高;在各年龄组中新生组表达最高,并随着年龄的增长表达呈下调趋势;免疫荧光检测E16.5 d组和新生组的中脑和海马区观察到有大量Pitx3或Nurr1单标细胞和Pitx3/TH或Nurr1/TH双标细胞。结论:pitx3、nurr1基因的表达不仅与中脑多巴胺能神经元,而且可能与儿茶酚胺类神经元的发育和生存维持有关;老年期pitx3、nurr1基因表达下降可能与脑老化和神经退行性变疾病,如帕金森病和老年性痴呆等有关。
- 姜宇曾水林赵春杰朱建宝胡江波刘钟李凤飞
- 关键词：酪氨酸羟化酶逆转录聚合酶链反应免疫印迹免疫荧光
