厉萍
- 作品数：11 被引量：24H指数：4
- 供职机构：中国水产科学研究院长江水产研究所农业部淡水生物多样性保护重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金公益性行业(农业)科研专项中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 达氏鲟dmc1基因的克隆及在精子生成中的表达分析被引量：3
- 2019年
- DNA减数分裂重组酶1基因(disrupted meiotic cDNA,dmc1)是一个在减数分裂时期特异表达的基因,为减数分裂同源染色体配对所必需。为研究dmc1基因在达氏鲟(Acipenser dabryanus)不同组织的表达特征,从达氏鲟性腺转录组数据库搜索得到该基因并设计引物,克隆获得达氏鲟dmc1的编码区序列,其中开放阅读框(ORF)为1 029 bp,编码342个氨基酸。运用生物信息学方法分析达氏鲟dmc1基因编码的蛋白序列和系统进化关系,推测达氏鲟Dmc1蛋白的分子量为82.696 kDa,理论等电点(PI)为5.04;多重序列比对发现,Dmc1氨氮酸序列在进化中可能比较保守。系统进化分析显示,AdDmc1属于RecA家族Dmc1蛋白分支,且与四足动物类聚为一支。RT-PCR结果表明,dmc1基因在精巢和卵巢中特异表达。结合组织学结果通过实时荧光定量PCR研究dmc1基因在精子生成过程中的表达特征发现,dmc1基因在0~Ⅰ期精巢中不表达;在Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期精巢中,其表达量逐渐升高并在Ⅳ期精巢中达到最高;在Ⅴ期精巢中,其表达量显著性下降(P<0.05),因此推断达氏鲟dmc1基因可能是减数分裂时期特异表达的基因,研究结果可为后续达氏鲟初级和次级精母细胞的鉴定奠定基础。
- 向浩叶欢李创举杨俊琳厉萍杜浩危起伟
- 关键词：达氏鲟减数分裂性腺发育
- 一种达氏鲟精子冷冻保存液及制备方法和应用
- 本发明公开了一种达氏鲟精子冷冻保存液及制备方法和应用，本发明的达氏鲟精子冷冻保存液包括蔗糖，海藻糖，三羟基氨基甲烷，氯化钾，还原型谷胱甘肽，甲醇。本发明所述的达氏鲟精子冷冻保存液，成分简单，冷冻保存成本低。其中，还原型谷...
- 厉萍危起伟席萌丹柳凌郭威乔新美
- 文献传递
- 一种达氏鲟精巢细胞冷冻保存液及精巢细胞冷冻保存方法及应用
- 本发明提供了一种达氏鲟精巢细胞冷冻保存液及精巢细胞冷冻保存方法及应用，所述的冷冻保存液包括牛血清白蛋白、海藻糖，乙二醇、卵磷脂和胎牛血清。同时，本发明还提供了一种达氏鲟精巢细胞冷冻保存方法，利用该方法在不使用液氮降温情况...
- 颉璇厉萍危起伟席萌丹郭威乔新美杜浩刘志刚
- 文献传递
- 一种达氏鲟精子冷冻保存液及制备方法和应用
- 本发明公开了一种达氏鲟精子冷冻保存液及制备方法和应用，本发明的达氏鲟精子冷冻保存液包括蔗糖，海藻糖，三羟基氨基甲烷，氯化钾，还原型谷胱甘肽，甲醇。本发明所述的达氏鲟精子冷冻保存液，成分简单，冷冻保存成本低。其中，还原型谷...
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- 文献传递
- 达氏鲟精巢细胞消化分离和超低温冷冻保存被引量：5
- 2016年
- 通过研究两种酶对精巢细胞的消化效果,探究抗冻剂、降温程序、糖类和卵磷脂对达氏鲟(Acipenser dabryanus)精巢细胞冻存效果的影响,获得消化冻存后高存活率的细胞。实验使用0.25%胰蛋白酶和2 mg/m L胶原酶H+500 U/m L中性酶II的组合酶对达氏鲟精巢细胞进行消化,获得不同消化时间内的活细胞数量。另外,还研究了冷冻稀释液中分别添加10%二甲基亚砜(DMSO)、乙二醇(EG)、甲醇(MET)作为抗冻剂,采用-1℃/min慢速降温以及直接投入液氮中的快速降温方法冻存,冷冻稀释液采用D-海藻糖或同浓度D-蔗糖,以及添加5%、8%、11%卵磷脂对冻存效果的影响。结果显示:两种消化酶在同一时间消化所得的活细胞数和活细胞率无显著差异,并且都在3 h获得最多活细胞。慢速降温的冻存效果极显著地好于快速降温(P=0.01)。不同抗冻剂的保存效果差异显著,复苏后细胞相对存活率EG(51.70%±5.24%)>MET(45.09%±3.15%)>DMSO(40.18%±3.90%)。不同糖对达氏鲟精巢细胞冻存效果无显著影响;不同浓度的卵磷脂冻存效果有极显著差异。含8%卵磷脂的冻存液对细胞的冻存效果最好,细胞存活率可达(93.55±2.56)%,培养10 d后细胞数目为0 d时的3.19倍。
- 颉璇厉萍席萌丹郭威乔新美杜浩刘志刚危起伟
- 关键词：胰蛋白酶冷冻保存抗冻剂
- 中华鲟精子结构特征及其精液超低温冷冻保存技术研究
- 本文在比较鲟类精子与一般硬骨鱼类精子生物学特性的基础上，研究中华鲟精液超低温冷冻保存的相关技术，采用计算机辅助精子活力分析系统(CASA)对中华鲟精子冷冻保存前后以及不同激活液条件下多项精子活力参数的变化进行统计学比较研...
- 厉萍
- 关键词：中华鲟精子结构精液保存超低温冷冻
- 文献传递
- 川陕哲罗鲑精子超微结构及形态学研究被引量：4
- 2016年
- 对川陕哲罗鲑Hucho bleekeri Kimura精子采用扫描电子显微镜及透射电子显微镜进行观察,结果显示:精子由头部、中片和尾部组成;精子全长41.07μm±2.18μm,头部长2.76μm±0.15μm,头部前端和后端的宽度分别为1.88μm±0.18μm和2.08μm±0.20μm;尾部长34.74μm±5.01μm。头部呈卵圆形,无顶体,主要由细胞核组成;中片由1个不规则的圆球状线粒体及袖套结构组成;线粒体直径为0.82μm±0.08μm;尾部呈细长形,并由一个过渡区域分为前端和末端,尾部内部主要由轴丝组成,轴丝为典型的"9+2"结构,外部有不对称性分布的侧鳍结构。结果表明,川陕哲罗鲑精子类型较为原始,属于硬骨鱼类中的TypeⅠ类型。
- 郭威厉萍杨焕超杜浩吴金明危起伟
- 关键词：精子超微结构
- 中华鲟精卵特征及精子入卵早期过程观察被引量：5
- 2007年
- 中华鲟精子的头部呈短棒状，前端具顶体，尾部扁平细长；精子密度在不同个体之间差异较大，实验所获3尾雄鱼的精子密度分别为5．04×10^9个／mL、1．74×10^9个／mL、2．25×10^9个／mL；中华鲟卵的直径大，平均长径0．45cm，短径0．42cm；受精孔6～15个，排列在卵的极斑处；通过扫描电镜观察了中华鲟精卵的受精过程，发现从受精5s开始就有精子进入受精孔，10min后受精孔完全封闭，其间卵膜未发现有任何变化。还对中华鲟受精方式的多精入卵、单精受精的机制做了探讨。
- 厉萍危起伟鲁大椿吴湘香沈丽刘鉴毅陈细华
- 关键词：中华鲟精子卵子
- 一种达氏鲟精原细胞培养液及应用
- 本发明公开了一种达氏鲟精原细胞培养液及应用，本发明提供了一种无胎牛血清、以各种生长因子、非必须氨基酸、丙酮酸钠等添加剂作为替代物，同时辅以少量雄性达氏鲟血清的低血清培养基，可保证精原细胞的大量增殖且精巢细胞增殖率较低，将...
- 颉璇厉萍危起伟叶欢杨晓鸽马杰曾令兵李创举
- 文献传递
- 一种达氏鲟精原细胞培养液及应用
- 本发明公开了一种达氏鲟精原细胞培养液及应用，本发明提供了一种无胎牛血清、以各种生长因子、非必须氨基酸、丙酮酸钠等添加剂作为替代物，同时辅以少量雄性达氏鲟血清的低血清培养基，可保证精原细胞的大量增殖且精巢细胞增殖率较低，将...
- 颉璇厉萍危起伟叶欢杨晓鸽马杰曾令兵李创举
