吕广艳
- 作品数：48 被引量：122H指数：5
- 供职机构：大连医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金辽宁省科技厅自然科学基金辽宁省教育厅高等学校科学研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学机械工程文化科学更多>>
- 自制小动物定量创伤仪对大鼠心肌组织损伤的观察被引量：3
- 2012年
- 目的:观察使用自制小动物定量创伤仪,造成的大鼠全身机械性创伤。方法:首先设计并组装制造实验用小动物定量全身性机械性创伤仪。将40只大鼠分为对照组和创伤组,每组20只(n=20),以40 r/min的转速旋转200圈,分别给予创伤组动物定量创伤,观察心肌组织中心肌细胞的凋亡指数、Caspase-3、iNOS、NO、NADPH氧化酶以及超氧阴离子(.O2-)的表达量,对照组未做任何处理。结果:创伤组心肌细胞的凋亡指数、Caspase-3以及iNOS的表达、NO的产生、NADPH氧化酶的表达及.O2-的生成,均明显高于对照组(P<0.01)。结论:使用自制小动物创伤仪,定量给予大鼠全身性机械性创伤,可造成大鼠心肌细胞发生明显的氧化应激反应和凋亡。
- 刘宣吕广艳吕国枫于德钦陈小龙陈冲李树壮
- 关键词：心肌
- 冷冻保存Epon812包埋剂在电镜样品制备中的应用被引量：1
- 2008年
- [目的]探讨冷冻保存Epon812包埋剂及其再利用的方法。[方法]将电镜样品制备中剩余包埋剂在特定条件下冷冻保存,需要时解冻,进行常规浸透包埋。比较包埋剂冷冻前后超薄切片的切割性能。[结果]用冷冻后复温的包埋剂制备的包埋块,超薄切片时切割性能良好,两种包埋剂制备的样品各项观察指标无明显差异。[结论]冷冻保存Epon812包埋剂及其再利用的方法是可行的。
- 吕广艳魏晓晴曲淑贤高船舟高颖
- 关键词：包埋剂透射电镜超薄切片
- 脑梗死急性期血小板超微结构与功能的研究
- 2001年
- 目的 :探讨脑梗死急性期血小板超微结构改变与功能变化的关系及意义。方法 :对大灶脑梗死组 2 2例 ,小灶脑梗死组 2 5例 ,对照组 2 0例进行研究 ,分别于发病后 3d内及 2周采静脉血 ,采用透射电镜观察血小板超微结构 ,酶联免疫吸附竞争法测定血小板GMP - 140、酶联免疫吸附双抗体夹心法测定血浆GMP - 140的浓度。结果 :发病后 3d内血小板超微结构改变明显 ,伪足增多 ,聚集融合成片 ,α颗粒明显减少 ,大灶组改变尤为明显。大灶组血小板GMP - 140、血浆GMP - 140浓度、血小板粘附率 (PAdT)、血小板聚集率 (PAgT)较对照组非常显著升高(P <0 0 0 1) ,小灶组上述指标也较对照组显著升高 (P <0 0 5) ,但较大灶组低。 2周后 ,血小板超微结构大灶组无明显变化 ,小灶组则明显恢复 ,2组血小板GMP - 140、血浆GPM - 140浓度均明显下降 ,但仍较对照组高 ,PAdT、PAgT均降至正常。结论 :脑梗死急性期血小板功能增强伴明显结构改变 ;血小板超微结构的改变可以作为判断病情轻重的一个可靠指标 ;血浆GMP
- 聂志余郑悦吕广艳何晓林张仲慧赵成艳濮良忠李连宏
- 关键词：脑梗死血小板超微结构GMP-140
- 重组平滑肌肌球蛋白轻链激酶及ATP结合位点突变体的构建及表达
- 2009年
- 目的构建重组全长平滑肌肌球蛋白轻链激酶(myosin light chain kinase,MLCK)ATP结合位点突变体,以研究平滑肌MLCK的结构与功能。方法利用试剂盒对MLCKATP结合位点进行定点突变,构建全长平滑肌MLCKATP结合位点突变体重组表达载体pCold/BsMLCK/△ATP,在大肠杆菌中表达;利用SDS-PAGE鉴定表达的重组全长平滑肌MLCKATP结合位点突变体在细胞中的分布;运用亲和层析及凝胶过滤分离纯化重组全长MLCK并利用SDS-PAGE鉴定表达MLCK的纯度。结果重组全长MLCK/△ATP(突变型)在大肠杆菌中以可溶的形式大量表达;在样品的上清和沉淀中均有重组全长MLCK/△ATP表达;经CaM-Sepharose4B和Superose6HR纯化,SDS-PAGE鉴定得到单一的表达条带。结论重组全长MLCK/△ATP(突变型)可以在大肠杆菌中以可溶形式大量表达;SDS-PAGE结果显示重组全长MLCK/△ATP可以通过亲和层析和凝胶过滤纯化得到单一的条带。
- 崔颖谢策魏晓晴赵莹吕广艳王辉高颖
- 关键词：MLCK突变体
- 指导研究生游离细胞扫描电镜样品制备的体会
- 2009年
- 扫描电镜是用于观察组织细胞表面的超微结构，与透射电镜不同。透射电镜是利用穿透标本的电子进行成像，是观察样品的内部结构。而扫描电镜则由于电子束冲击样品，利用从样品表面发射的二次电子成像。这样所观察的就不是样品的内部结构，而是表面的特征。指导研究生游离细胞扫描电镜样品制备。目的是注重培养学生的操作技能，参与意识，掌握扫描电镜制样的要领。真正做到教学相长。
- 曲淑贤吕广艳魏晓晴高船舟高颖
- 关键词：扫描电镜透射电镜内部结构电子束超微结构
- 放疗同步健择与顺铂化疗对大鼠脊髓损伤的实验研究
- 2009年
- 目的:探讨放射治疗同步顺铂(DDP)和健择(GEM)化疗对大鼠脊髓损伤的影响。方法:观察正常对照组、单纯放疗组、单纯化疗组(健择组、顺铂+健择组)与放疗联合化疗组(健择联合放疗组、顺铂+健择联合放疗组)的光镜和电镜下脊髓的形态学改变。结果:光镜下,单化组灰质出现白质部分脱髓鞘、变性、炎性细胞浸润,灰质结构疏松和血管增多,排列紊乱。单放组白质内神经纤维排列松散紊乱,部分白质出现细胞肿胀、坏死和炎细胞浸润,部分神经元尼氏体消失,神经胶质细胞固缩。化放组白质出现广泛脱髓鞘、炎细胞浸润、灰质血管增多和神经元固缩等改变。电镜下单化组脊髓髓鞘的髓板增厚、扭曲和皱缩;单放组髓鞘的板层结构松解、扭曲;化放组髓鞘轴索皱缩,髓鞘不规则分层且不规则增生,板层结构不明显。结论:不论健择单药还是健择和顺铂联合化疗均可引起大鼠脊髓损伤,放射治疗同步顺铂和健择化疗较单纯放疗加重对大鼠的脊髓损伤。
- 邹丽娟王媛媛李国权吕广艳王若雨邵淑娟
- 关键词：脊髓损伤
- 荧光免疫标记抗体法测定疑难生物检材血型的研究
- 王瑞恒闫立强于卫健曲淑贤郄艾芹刘效巍吕广艳高船舟
- 该项目属于法医学物证技术检验领域，其主要研究内容是利用免疫荧光技术测定疑难生物检材血型的研究。目的是探讨荧光抗体标记法测定生物疑难检材的可行性。主要内容包括建立抗体的标记和纯化方法、探讨抗原抗体结合的最佳条件、建立洗脱非...
- 关键词：
- 关键词：生物检材血型抗体免疫标记
- 平滑肌肌球蛋白轻链激酶N端删除载体的构建
- 2009年
- 目的:构建重组平滑肌肌球蛋白轻链激酶(myosin light chain kinase,MLCK)N端删除载体,为研究平滑肌MLCK的分子机制提供研究模型。方法:以重组质粒pCold/155为模板,根据其待删除序列(N端1-41个氨基酸)设计上下游引物,行PCR扩增。将扩增片段以Nde I/EcoR I双酶切,产物行琼脂糖凝胶电泳回收得到目的基因。将目的基因与载体连接,转化至大肠杆菌。筛选阳性克隆,并对阳性克隆进行测序。结果:用Nde I和EcoR I双酶切重组质粒pCold/155,琼脂糖凝胶电泳显示得到约4.4kb载体和约3.4kb的MLCK片段。阳性克隆经测序证实MLCK的N端41个氨基酸序列已被成功删除。结论:成功构建了重组MLCK N端删除载体pCold/155/D41。
- 吕广艳崔颖于守鹏陈海波曲淑贤高船舟高颖
- 关键词：肌球蛋白轻链激酶肌动蛋白
- 肌球蛋白轻链激酶非激酶活性调节磷酸化肌球蛋白ATP酶活性及肌丝运动被引量：15
- 2008年
- 肌球蛋白轻链激酶(myosin light chain kinase,MLCK)具有激酶和非激酶活性,在平滑肌收缩过程中起着关键酶调控的作用.为进一步阐明MLCK非激酶活性在平滑肌收缩过程中的调节作用,利用已删除部分激酶区域的MLCK重组体(pGEX-F6.5)在大肠杆菌中进行表达,采用亲和层析技术纯化表达的MLCK片段,应用EnzChek磷分析试剂盒检测MLCK片段对磷酸化肌球蛋白、水解重酶解肌球蛋白(heavy meromyosin,HMM)及肌球蛋白亚片段1(subfragment1,S1)ATP酶活性的影响,体外检测MLCK片段对肌动蛋白肌丝运动的调节.研究结果显示,pGEX-F6.5重组表达载体在大肠杆菌中以可溶性GST融合蛋白的形式表达.该融合蛋白经Glutathione-Sepharose4B纯化、SDS-PAGE鉴定得到较纯的单一表达条带.纯化的MLCK片段对磷酸化肌球蛋白、HMM和S1的ATP酶活性均有明显激活作用.MLCK片段激活磷酸化肌球蛋白ATP酶活性为:Vmax=(19.426±1.669)倍;Km=(0.486±0.106)μmol/L,MLCK片段对磷酸化HMM和S1的ATP酶活性也有相似的刺激作用.体外肌丝运动研究表明,随着MLCK片段浓度的增加,磷酸化肌球蛋白与肌动蛋白结合的数量不断增加,肌丝运动的速度也随之增加.上述结果表明,MLCK的C端非激酶活性具有调节磷酸化的肌球蛋白ATP酶活性及肌丝运动的作用.
- 梁明丽崔颖吕广艳高颖
- 关键词：平滑肌收缩肌球蛋白
- 石蜡半薄切片制作透射电镜的方法被引量：7
- 2009年
- [目的]介绍石蜡半薄切片转制透射电镜的制样方法。[方法]对石蜡半薄切片进行脱蜡、水化、锇酸固定、缓冲液漂洗、梯度酒精脱水、环氧树脂包埋、超薄切片机切片、透射电镜下观察。[结果]组织细胞的超微结构保存完好,足以满足病理诊断之用。[结论]用石蜡半薄切片转制电镜比用石蜡组织块转制电镜方法简单,快速易行。
- 曲淑贤吕广艳高船舟魏晓晴崔颖高颖
- 关键词：透射电镜
