吴淳
- 作品数：5 被引量：39H指数：3
- 供职机构：南京林业大学森林资源与环境学院林木遗传与生物技术省部共建教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：引进国际先进农业科技计划江苏省高校高新技术产业发展项目江苏省高技术研究计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 杂交鹅掌楸体胚发生中胚性细胞总RNA提取
- 2010年
- 本实验通过比较改良SDS法、Trizol法和设计的改良CTAB法对杂交鹅掌楸体胚发生过程总RNA的提取结果,杂交鹅掌楸体胚发生过程总RNA提取最佳体系为:最佳试材的用量为0.25～0.5g,氯仿:异戊醇(24:1)抽提3次,终浓度2mol/L的LiCl与2倍体积的无水乙醇依次沉淀RNA。该体系提取的总RNA质量高,无降解,无污染。反转录后合成的cDNA第一链分子量大小分布在100～1500bp之间,可以满足下一步实验要求。并以此第一链成功进行了RT-PCR。
- 吴淳陈金慧李婷婷施季森
- 关键词：杂交鹅掌楸体细胞胚胎发生RNA提取
- 悬浮培养条件下体细胞胚发育的同步化控制被引量：13
- 2007年
- 利用液体悬浮培养体系进行体细胞胚的大规模生产,被认为是21世纪最具发展潜力的生物技术之一。但是,大多数体胚发生系统都存在发生频率低、同步化程度不高等问题,这在很大程度上限制了体胚发生和人工种子技术在生产上的应用。本文论述了体胚发生不同步的原因,重点介绍了悬浮细胞培养过程中同步化控制的方法和检测手段,提出了利用液体悬浮培养体系进行同步化控制的研究方向。
- 李婷婷施季森陈金慧边黎民陈志吴淳
- 关键词：植物细胞体胚发生
- 杂交鹅掌楸转双价抗病基因影响因子研究被引量：4
- 2007年
- 本研究利用在固体培养基上长期保存的杂交鹅掌楸胚性愈伤为外植体,对杂交鹅掌楸进行了遗传转化的研究。对于影响转化效果的众多影响因素,本研究主要讨论了乙酰丁香酮、菌液浓度、侵染时间对杂交鹅掌楸转化结果的影响。试验结果表明,在预培养阶段,乙酰丁香酮的使用有利于转化效率的提高,最佳条件时浓度100mg/L,预培养4d。而在共培养阶段,乙酰丁香酮的使用和延长共培养时间并不能显著提高杂交鹅掌楸的遗传转化效率。同时,在侵染时,不同菌液浓度和不同侵染时间对转化结果的影响也无显著的差异。通过PCR检测经过筛选培养获得的阳性植株,初步验证了外源基因已经整合到杂交鹅掌楸基因组中。
- 陈志陈金慧李婷婷吴淳施季森
- 体胚发生相关cDNA文库构建及在林木中的应用
- 2010年
- 体细胞胚胎发生在林木的繁殖、遗传改良等领域有很大的应用价值。在研究体细胞胚胎发生机理方法中,cDNA文库构建是发现新基因和研究基因功能的基本工具。从cDNA文库中可以筛选到目的基因,并直接用于该目的基因的表达。本文介绍了几种cDNA文库的原理和优缺点及其构建策略,并分析其在林木体胚发生过程中构建的优缺点。
- 吴淳陈金慧李婷婷施季森
- 关键词：体细胞胚胎发生CDNA文库胚性细胞
- 杂交鹅掌楸胚性细胞悬浮系的建立被引量：24
- 2007年
- 通过对影响悬浮培养的一些物理因素如摇床转速、细胞起始密度等的研究，建立了良好的杂交鹅掌楸胚性细胞悬浮系。研究表明，当摇床转速为100r／min，细胞起始密度为1×10^3～3×10^3个／mL时，可建立一个均匀性、分散性较好和细胞增值较快的杂交鹅掌楸胚性细胞悬浮系。悬浮细胞系的继代周期以2-4周为宜。培养效果最好的悬浮物是直径介于150-280μm的细胞团，其干重占总悬浮物干重的65％。
- 陈志陈金慧边黎明李婷婷吴淳施季森
- 关键词：杂交鹅掌楸胚性愈伤
