周艳喜
- 作品数：15 被引量：12H指数：2
- 供职机构：内蒙古农业大学兽医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学理学更多>>
- 羊Ⅱ型肺泡上皮细胞的分离培养及鉴定被引量：1
- 2009年
- 为改进羊肺泡Ⅱ型上皮细胞的分离和培养技术,本研究采用IgG黏附法结合磁化树脂微粒法分离纯化了山羊肺泡Ⅱ型上皮细胞,碱性磷酸酶染色检查表明Ⅱ型细胞占90%以上,台盼蓝染色活细胞为95%以上。羊肺泡Ⅱ型上皮细胞分离纯化方法的建立,为今后体外分离培养绵羊肺腺瘤病毒(JSRV)的探索性工作奠定了基础,也为研究肺纤维化及肺癌发病机理等重大课题提供了重要的技术支持。
- 罗军荣余群英刘霄卉高华武志红周艳喜周建华马学恩
- 牛胎儿皮肤成纤维细胞体外培养及其特性研究被引量：2
- 2008年
- 该试验研究了牛胎儿皮肤成纤维细胞的分离、培养、纯化方法及其生长特征。牛胎儿皮肤细胞贴壁传代2～4次,可成功获得均一稳定的成纤维细胞群体。取传至4代的牛胎儿皮肤成纤维细胞进行细胞计数,并绘制其生长曲线。
- 周艳喜曲世磊李鹏李燕刘春霞
- 关键词：成纤维细胞体外培养
- 绵羊外源性JSRV-LTR克隆与序列分析
- JSRV无病毒癌基因，病毒的Env蛋白能转化细胞致肺肿瘤，而内源性JSRV则在母羊生殖道内大量表达。内外源性JSRV的受体均为Hyal-2，该受体在羊、人类及鼠的细胞中无所不在，且过表达鼠Hyal2对JSRV在鼠N1H3...
- 罗军荣周艳喜武志红高华周建华马学恩
- 关键词：细胞转录因子遗传进化
- 文献传递
- 内源性绵羊肺腺瘤病毒env基因的克隆及序列分析
- 2011年
- 参照GenBank上已发表的内源性绵羊肺腺瘤病毒env基因与5′长末端重复序列保守区序列设计引物,应用PCR技术成功扩增出内源性绵羊肺腺瘤env基因与5′长末端重复序列,将纯化的扩增片段连接pMD18-T克隆载体进行测序获得目的基因序列。应用MEGA4.1、DNASTAR进行序列分析,分析结果表明,内源性env基因具有完整的开放阅读框,内源性env基因序列与内源性绵羊肺腺瘤(AF153615.1)基因同源性高达99.7%,与外源性绵羊肺腺瘤(M80216.1)基因的同源性仅为90.6%;由内源性env基因推导的氨基酸在NCBI进行BLAST比较:与AF153615.1的氨基酸同源性高达100%。内源性env基因编码表达的蛋白具有亲水性。这些结果为研究5′长末端序列对内源性env基因调控等问题提供了重要参考。
- 苏佳周艳喜马学恩幺宏强赵晓慧
- 关键词：内源性绵羊肺腺瘤病毒
- 绵羊肺腺瘤病毒囊膜蛋白在大鼠体内的表达被引量：1
- 2012年
- 为探讨绵羊肺腺瘤病毒囊膜蛋白(OPAV-Env)引起肺泡Ⅱ型上皮恶变的机理,将真核表达质粒pcDNA3.1-env用体内转染试剂经尾静脉转染到幼龄大鼠体内,用RT-PCR及免疫组化法检测绵羊肺腺瘤病毒囊膜蛋白在大鼠体内的表达,并采用SSCP法及基因克隆法结合序列分析检测H-ras基因是否发生突变。结果显示,绵羊肺腺瘤病毒囊膜蛋白在大鼠肺脏组织存在表达,但转染21d后和正常大鼠比较,未发现大鼠H-ras基因发生突变。
- 李靖瓦西力周艳喜么宏强于立新敖威华马学恩
- 关键词：绵羊肺腺瘤病毒RAS基因免疫组化单链构象多态性
- 1株山羊内源性肺腺瘤反转录病毒的序列测定与分析
- 2012年
- 参照内源性绵羊肺腺瘤病毒株enJSRV-20(EF680302.1)全基因组序列设计合成3对引物,以山羊基因组DNA为模板,应用PCR技术扩增山羊内源性病毒基因片段,分别连接PMD-18T载体并测序,完成了1株山羊内源性肺腺瘤反转录病毒全基因序列的测定。结果分析显示测定序列全长7 480bp,获得的序列与内源性绵羊肺腺瘤病毒株enJSRV-18(EF680301.1)的核苷酸相似性为93.4%,与外源性绵羊肺腺瘤病毒株JS-7(AF357971.1)的核苷酸相似性为88.1%。根据pro基因序列构建系统进化树,结果显示扩增序列与内源性绵羊反转录病毒株en-JSRV-5(EF680305.1)的亲缘关系最近。本研究有助于内源性肺腺瘤反转录病毒感染性克隆的构建和内源性肺腺瘤反转录病毒功能的研究。
- 周艳喜李靖敖威华刘霄卉于立新幺宏强马学恩
- 关键词：全基因序列PCR扩增
- 绵羊肺腺瘤病相关基因突变的检测及绵羊、山羊内源性反转录病毒的扩增
- 研究背景：绵羊肺腺瘤病/(ovine pulmonary adenomatosis, OPA/)是一种由绵羊肺腺瘤病病毒/(jaagsiekte sheep retrovirus, JSRV/)引起的肺脏肿瘤性疾病。病原...
- 周艳喜
- 关键词：基因突变甲基化绵羊肺腺瘤病
- 文献传递
- 绵羊肺腺瘤病血清学检测方法的建立
- 为建立血清学方法检测诊断病羊体内的JSRV，本研究以病料中的JSRV阻断重组JSRV-CA与特异性单抗的反应，从病原的角度建立了JSRV的血清学检测与诊断方法。按谷胱甘肽亲和层析试剂盒操作说明获得纯化的JSRV-CA重组...
- 罗军荣周艳喜高华武志红周建华马学恩
- 关键词：绵羊肺腺瘤病血清学检测蛋白浓度
- 文献传递
- 绵羊肺腺瘤PCR诊断方法的建立及应用被引量：2
- 2011年
- 利用特异性PCR方法实现对绵羊肺腺瘤病毒(OPAV)快速精确诊断和病毒类型的分析。参照GenBank中公布的外源性绵羊肺腺瘤病毒基因序列,针对病毒env基因YXXM基序设计了特异性PCR引物,建立了特异性PCR检测方法。成功扩增出病毒囊膜基因(env)多变区序列片段(ST)通过序列比对确定病毒类型。此方法操作简便,可用于绵羊肺腺瘤的快速诊断,可望在绵羊肺腺瘤发病机制等研究中起到重要作用。
- 周艳喜苏佳李靖刘霄卉马学恩
- 关键词：绵羊肺腺瘤病毒聚合酶链反应
- OPA套式PCR诊断方法的建立
- OPA感染羊无针对JSRV的循环性抗体，然而，患羊肺组织、淋巴网状内皮系统及外周血单核细胞均有前病毒DNA及JSRV的转录产物。目前，本研究组建立的血清学及特异性PCR方法能在肺肿瘤组织的检测中发挥作用，然而，对于活体羊...
- 罗军荣周艳喜高华周建华马学恩
- 文献传递
