唐小军
- 作品数：19 被引量：32H指数：4
- 供职机构：南京医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金南京市医学科技发展项目江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 大鼠激活转录因子3单克隆抗体的制备和鉴定
- 2011年
- 目的制备特异性识别大鼠激活转录因子3(ATF3)的单克隆抗体(mAb)。方法根据软件预测的结果合成偶联有匙孔绒血蓝蛋白(key holeli mpet hemocyanin,KLH)的大鼠ATF3第168-181位氨基酸多肽。随后免疫BALB/c小鼠,运用杂交瘤技术制备抗大鼠ATF3的mAb。采用快速定性试纸法鉴定该单克隆抗体的亚型和亚类;通过ELISA、Western blot和免疫组织化学法鉴定单克隆抗体的特性。结果获得一株可稳定分泌抗大鼠ATF3 mAb的杂交瘤细胞,其分泌的ATF3单抗的亚型是IgG1,轻链为κ链。Western blot结果显示,该单抗能够特异性识别大鼠细胞内表达的ATF3蛋白。免疫组织化学检测结果表明,在Thy-1肾炎(Thy-1N)大鼠肾细胞胞质及细胞核内均有ATF3表达,但细胞核内的表达量较为显著。结论成功制备了一株抗大鼠ATF3的mAb,为进一步研究ATF3的生物学功能提供了可用的实验材料。
- 夏梅任琎蒋青桃李妍唐小军邱文赵聃王迎伟
- 关键词：单克隆抗体杂交瘤细胞WESTERNBLOTTHY-1肾炎
- 抗EB病毒LMP2A单克隆抗体的制备及免疫学特性分析
- 2014年
- 目的:利用杂交瘤技术制备抗EB病毒潜伏膜蛋白2A(LMP2A)单克隆抗体并分析其免疫学特性。方法:以LMP第2和第5胞外区表位串联制备的融合蛋白免疫BALB/c小鼠,取免疫后小鼠脾细胞与SP2/0细胞融合,制备抗LMP2A的单克隆抗体。通过ELISA、Western blot、免疫荧光、免疫组化、流式细胞术等方法鉴定单抗的免疫学特性。结果:获得1株稳定并持续分泌抗LMP2A单克隆抗体的稳定杂交瘤细胞株,所分泌的单克隆抗体5C12-C4-A6能够特异性识别鼻咽癌细胞膜表面的LMP2A蛋白。结论:本文制备了能够特异性识别鼻咽癌细胞膜表面LMP2A蛋白的单克隆抗体,为进一步进行鼻咽癌临床早期诊断和分子靶向治疗奠定了基础。
- 徐鑫唐小军熊林王欢李文杰高畅熊四平仇镇宁Tan Min HanVo Jess Honganh冯振卿陈仁杰
- 关键词：EB病毒LMP2A单克隆抗体免疫学特性
- 一种具有中和作用的人鼠嵌合抗Siglec-15全分子IgG及其制备方法和应用
- 本发明公开了一种具有中和作用的人鼠嵌合抗Siglec‑15全分子IgG及其制备方法及其应用，属于生物制药领域；本发明使用Siglec‑15特异性多肽免疫小鼠，采用杂交瘤技术制备鼠源抗Siglec‑15单克隆抗体，并采用基...
- 唐奇毛圆唐小军冯振卿朱进肖雪筠
- 文献传递
- 骨髓间充质干细胞对HepG2肝癌细胞增殖的影响被引量：3
- 2012年
- 目的:观察大鼠骨髓间充质干细胞对HepG2肝癌细胞增殖的影响,并初步探讨其机制。方法:全骨髓贴壁法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,流式细胞术鉴定其分子表面标志,体外扩增培养并收集培养上清。MTT法、平板克隆实验及软琼脂克隆实验检测大鼠间充质干细胞对人肝癌细胞株HepG2增殖的影响,流式细胞术检测肝癌细胞周期的改变,Western blot法检测细胞周期相关蛋白Cyclin D1表达情况。结果:骨髓间充质干细胞CD105和CD90表达阳性,CD34和CD45表达阴性。在骨髓间充质干细胞培养上清作用下,MTT法显示实验组肝癌细胞光密度值增加(P<0.05),平板克隆法显示实验组肝癌细胞克隆形成率比对照组明显升高(P<0.05),软琼脂克隆法显示实验组肝癌细胞空间克隆形成率比对照组明显升高(P<0.05),流式细胞术显示实验组细胞周期G1期比例降低,S期、G2期比例增加。Western blot显示实验组细胞Cyclin D1表达量增加(P<0.05)。结论:骨髓间充质干细胞可促进HepG2肝癌细胞的增殖及空间克隆形成能力,其促进肝癌细胞体外增殖可能与Cyclin D1表达上调有关。
- 唐甜李红薛冰唐小军陈汐敏仇镇宁朱进Tom C Tsang冯振卿
- 关键词：间充质干细胞肝癌细胞增殖CYCLIND1
- 重组豹蛙酶的制备及其生物学特性分析被引量：5
- 2013年
- 目的:通过构建豹蛙酶原核表达载体pColdⅡ-Rap,表达、纯化豹蛙酶并研究其生物学活性。方法:合成豹蛙酶全基因序列,克隆于原核表达载体pColdⅡ中,鉴定正确后转化至大肠杆菌BL21,用SDS-PAGE和Western blot验证豹蛙酶的表达;大量表达重组豹蛙酶融合蛋白(Rap-His),通过MTT法分析Rap-His对乳腺癌细胞增殖的影响。结果:成功构建了pColdⅡ-Rap原核表达载体,经优化表达、纯化的条件,获得纯度较高的Rap-His;MTT法检测结果表明,该融合蛋白在320、160μg/ml时对乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖的抑制率在加药后4 d达到93.49%。结论:本研究制备的重组Rap-His融合蛋白能够抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖。这为进一步与肿瘤特异抗体偶联,构建肿瘤特异性靶向药物的研究奠定了基础。
- 汪楠唐小军熊四平郑峰张慧林高畅李文杰董华朱进
- 关键词：融合蛋白细胞增殖抑制
- 稳定表达Trop-2基因的NIH3T3细胞系的构建和特性分析被引量：1
- 2013年
- 目的:建立稳定表达人滋养层细胞表面抗原(Trop-2)NIH3T3细胞,分析过表达Trop-2对NIH3T3细胞的生长、增殖和侵袭特性的影响。方法:将Trop-2基因克隆到真核表达载体pcDNA3.1,转染NIH3T3细胞,通过G418筛选及RT-PCR鉴定获得稳定表达Trop-2的NIH3T3细胞(NIH3T3-Trop-2)。用MTS法检测NIH3T3-Trop-2细胞的增殖能力,软琼脂集落形成实验检测NIH3T3-Trop-2细胞的克隆形成能力,明胶酶谱法检测NIH3T3-Trop-2细胞的基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9的分泌及细胞划痕实验检测NIH3T3-Trop-2细胞的迁移能力。结果:稳定表达Trop-2的NIH3T3细胞在生长增殖、克隆形成及侵袭能力均较NIH3T3细胞强,细胞培养上清中的MMP-2和MMP-9增多。结论:Trop-2对细胞的增殖与迁移能力具有明显的促进作用。
- 刘玉唐小军曹清丁贵鹏张慧林王欢郑峰徐凛锋林红
- 关键词：NIH3T3真核表达
- 人源抗EB病毒潜伏膜蛋白1特异性基因工程抗体Fab的筛选与特性被引量：1
- 2012年
- 目的:应用噬菌体展示技术制备抗EB病毒编码的潜伏膜蛋白1(latert membrare protern 1,LMP1)特异性、高亲和力的全人抗体Fab片段。方法:利用稳定转染表达LMP1的SUNE-1细胞及原核表达的LMP1胞外区蛋白作为抗原对大容量人源Fab抗体库进行差减筛选及固相筛选,经过5轮细胞筛选和3轮固相筛选,随机挑选30个克隆经酶联免疫吸附法鉴定,阳性克隆进行可溶性表达,用LMP1阳性表达的人鼻咽癌细胞株HNE2/LMP1鉴定抗LMP1抗体Fab的结合活性。结果:Western blot、免疫荧光结果显示,从大容量人源Fab抗体库中筛选出1株抗LMP1抗体Fab,细胞ELISA、荧光激活细胞分类术、免疫荧光分析、免疫组化检测结果显示Fab与人鼻咽癌细胞表面LMP1分子有较好的结合活性。结论:从人源Fab抗体库中筛选的Fab抗体能够与鼻咽癌细胞表面LMP1分子特异性结合,为研制用于EBV相关肿瘤如鼻咽癌生物治疗的靶向药物,提供了候选分子。
- 毛圆张大为曹清唐小军林红陈仁杰徐凛峰冯振卿
- 关键词：噬菌体抗体库EB病毒潜伏膜蛋白1靶向治疗
- CD137共刺激分子增强靶向LMP1嵌合抗原受体T细胞对肿瘤细胞的杀伤作用
- EB病毒目前已经证实与多种肿瘤发生密切相关,包括伯基特淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤、鼻咽癌、胃癌以及淋巴细胞增生症。虽然EB病毒特异的CTL细胞在治疗EB病毒相关的淋巴细胞增生症中取得很好的疗效,但是由于EB病毒相关肿瘤下调EB...
- 唐小军周焱唐奇陈仁杰朱进冯振卿
- 关键词：潜伏膜蛋白1
- 文献传递
- 间充质干细胞缓解胶原诱导关节炎小鼠骨质疏松的机制研究
- 刘畅张华勇唐小军冯瑞海孙凌云
- 人源抗Trop-2 Fab对宫颈癌细胞生物学特性的影响被引量：4
- 2015年
- 目的 :观察人源抗Trop-2 Fab对宫颈癌细胞生物学特性的影响。方法 :流式细胞术和免疫荧光检测宫颈癌Hela细胞表面Trop-2蛋白的表达;划痕实验和Transwell检测人源抗Trop-2 Fab对宫颈癌细胞迁移能力的影响;流式细胞术检测人源抗Trop-2 Fab对宫颈癌细胞凋亡的诱导作用;CCK-8(cell counting kit-8)检测人源抗Trop-2 Fab对宫颈癌细胞增殖的影响。结果:Hela细胞表面有Trop-2蛋白表达,人源抗Trop-2 Fab能够抑制Hela细胞的增殖,有效降低Hela细胞的迁移和侵袭能力,同时能够诱导Hela细胞凋亡。结论:人源抗Trop-2 Fab能明显降低宫颈癌细胞的恶性生物学行为,Trop-2可作为宫颈癌治疗的潜在靶点。
- 褚楚刘金荣张慧林唐小军林红刘鹏苏亦平冯振卿童华朱进
- 关键词：宫颈癌生物学特性
