孔桂兴 作品数:12 被引量:34 H指数:3 供职机构: 东莞市厚街医院 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
液相芯片技术快速检测2型糖尿病患者相关降糖药物基因多态性的方法学建立 被引量:1 2021年 目的建立一种可同时、快速检测2型糖尿病患者降糖药相关药物基因多态性的液相芯片检测系统。方法根据7个目的基因的rs号,在Genbank中查找其靶位点附近碱基序列(目的基因包括磺脲类受体1,转录因子7类似物2,胰岛素受体底物1,过氧化物酶体增殖物激活受体γ,有机阳离子转运蛋白与多药和有毒化合物排出家族,有机阴离子转运蛋白家族成员1B1等),以PrimerPlex软件设计等位基因特异性引物,Primer6.0软件设计含检测位点的PCR引物,通过多重PCR扩增,等位基因特异性引物延伸(ASPE),MagPlex~Tag微球杂交,液相芯片系统Luminex 200检测荧光信号,确定基因型,优化反应体系并以5份代表性标本进行方法学评价。收集2019年1月~12月东莞市厚街医院新诊2型糖尿病患者血液样本115例,采用建立的系统检测上述7个靶位点,并随机选取25例与测序结果比较。结果7个目标基因经PCR扩增,产物电泳成像后清楚可见7条目标条带,无非特异性条带;经优化ASPE杂交条件,选择退火温度55℃,Biotion~dCTP浓度与dCTP浓度的比值为3∶1,37℃孵育45 min时检测效果最佳;临床样本检测结果显示:纯合子荧光强度中位值(median fluorescence intensity,MFI)比率均>0.9或<0.1,杂合子MFI比率在0.4~0.6之间。纯合子MFI比率批内批间CV在0.9%~3.3%和2.1%~4.6%,而杂合子则在2.9%~7.3%和5.2%~11.2%;DNA最低检测限为0.75ng;25例样本的检测结果与测序结果完全一致,准确度100%。结论该研究成功建立了一种新的液相芯片检测系统,高效便捷,能同时检测7个目的基因型,满足临床的需求。 邓任堂 许红丽 孔桂兴 赖丽莎 揭育帮 陈梅莲 付文金关键词:液相芯片 2型糖尿病 单核苷酸多态性 PDCA管理模式在病理制片质量控制中的应用价值分析 2021年 目的探讨PDCA管理模式在病理制片质量控制中的应用价值。方法随机选择2019年7—12月该院病理技术室的病理制片200张作为对照组(未实施PDCA管理),随机选择2020年1—6月该院病理技术室的病理制片200张作为研究组(实施PDCA管理),比较两组的病理制片质量。结果研究组的病理制片质量优良率为98.5%,对照组的病理制片质量优良率为87.0%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论PDCA管理模式切合病理科的实际情况,实施PDCA管理模式有利于优化病理制片的各个环节操作流程,有效提高病理制片质量,从而提高临床病理诊断质量,符合当前“精准医疗”时代对病理科“金标准”定位的要求,有利于保证医疗安全,适合在病理科制片管理中推广应用。 孔桂兴 王杜娟 黄彬华 何丹 韩淑珍关键词:病理制片 病理质量 乳腺癌ki67、cerbB-2、p53、nm23表达与淋巴结转移的关系 被引量:6 2015年 目的研究乳腺癌组织单克隆鼠抗人ki67、多克隆兔抗人cerbB-2、单克隆鼠抗人p53、单克隆鼠抗人nm23表达与淋巴结转移的关系。方法利用免疫组织化学EnVision染色检测60例乳腺癌标本中ki67、cerbB-2、p53、nm23的表达水平,分析ki67、cerbB-2、p53、nm23表达与淋巴结转移的关系。结果乳腺癌淋巴结转移组共34例(56.67%),其中ki67阳性表达24例(70.58%),cerbB-2阳性表达14例(41.48%),p53阳性表达20例(58.85%),nm23阳性表达22例(64.71%);无淋巴结转移组共26例(43.33%),其中ki67阳性表达10例(38.46%),cerbB-2阳性表达4例(15.38%),p53阳性表达8例(30.77%),nm23阳性表达24例(92.30%),淋巴结转移组ki67、cerbB-2、p53阳性表达较无淋巴结转移组明显增高(均P<0.05);nm23阳性表达较无淋巴结转移组明显降低(P<0.05)。结论乳腺癌组织中ki67、cerbB-2、p53、nm23的表达可作为乳腺癌淋巴结转移潜能的判断指标之一。 何丹 杜娟 曾丽华 陈丽 孔桂兴 黄彬华 韩淑珍关键词:乳腺癌 KI67 CERBB-2 P53 淋巴结转移 宫颈上皮内瘤变p16及Ki-67表达及其诊断价值 被引量:2 2015年 目的探讨宫颈上皮内瘤变(CIN)p16及Ki-67的表达及其诊断价值。方法选取178例疑似CIN患者宫颈活检标本为研究对象,根据活检结果分成CINⅠ级组(A组)、CINⅡ级组(B组)、CINⅢ级组(C组)和良性病变对照组(D组)四组。分析所有患者p16及Ki-67的免疫组化检测结果。结果 B组、C组p16及Ki-67的免疫组化表达阳性检出率及强阳性检出率均明显高于A组(P〈0.05),B组和C组组间比较差异无统计学意义(P〉0.05);D组阳性检出率低于其他三组,且无强阳性表达检出,差异具有统计学意义(P〈0.50)。结论对疑似宫颈上皮内瘤病变患者予以p16及Ki-67的免疫组化检测,可较为准确地鉴别良性病变与CINⅠ级、CINⅠ级和CINⅡ~Ⅲ级,对提高临床诊断准确性及有效性具有积极意义,值得临床推广。 何丹 陈载鑫 王杜娟 曾丽华 孔桂兴关键词:宫颈上皮内瘤变 P16 KI-67 妊娠糖尿病患者血清IRS-1表达及其与胰岛素抵抗相关性分析 被引量:2 2021年 目的检测妊娠糖尿病(GDM)患者血清中胰岛素受体底物-1(IRS-1)的表达水平,同时分析其与胰岛素抵抗(IR)的相关性。方法选择该院2019年5月-2020年5月收治的分娩期孕妇86例,根据OGTT试验结果分为GDM组44例和正常糖耐量组(NGT组)42例,使用ELISA的方法检测两组患者血清IRS-1的表达水平,同时检测患者空腹血糖(FPG)、餐后1 h血糖(1 hPG)、餐后2 h血糖(2 hPG)、空腹胰岛素(FINS)、空腹C肽、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、糖化血红蛋白(HbA1c)指标。结果GDM组患者FPG、1 hPG、2 hPG、FINS、空腹C肽、HOMA-IR、HbA1c水平均高于NGT组,而IRS-1水平低于NGT组,差异有统计学意义(P<0.05)。同时经过Pearson相关性分析显示,GDM组患者IRS-1表达水平与患者HOMA-IR、FPG、1 hPG、2 hPG、FINS、HbA1c水平呈明显负相关(P<0.05)。结论GDM孕妇存在明显的IR,其与患者血清IRS-1的表达呈负相关,因此低IRS-1在GDM的发生发展中起到一定的作用,这一结果为将来GDM的治疗提供了依据。 孔桂兴 邓任堂 王杜娟 黄彬华 揭育帮关键词:妊娠糖尿病 血清 胰岛素受体底物-1 胰岛素抵抗 不同抗原修复方法在免疫组化染色中的应用 被引量:4 2015年 目的:分析不同抗原修复方法在免疫组化染色中的应用对比。方法:取CD4、CD8、IL17、Ki67四种定位于细胞膜、细胞浆与细胞核的不同抗原,分别作免疫组化染色标记,并在食管癌连续切片上采用微波抗原修复与高压抗原修复两组方案,分析两组抗原修复方法对免疫组化染色的影响。结果:高压抗原修复方法,CD4抗体阳性率为100.0%,明显高于微波修复的45.5%,两种方法比较,差异有统计学意义(P<0.05),CD8、IL17及Ki67抗体阳性率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:在组织不脱片的条件下,采取高压抗原修复方案,操作简单,结果稳定,可操作性强,重复性好,定位清晰,背景着色浅,非特异性着色弱。但在两种修复方法阳性率对比无差异的条件下,建议尽可能选择相对柔和的微波修复方法。 何丹 王杜娟 曾丽华 孔桂兴 黄彬华关键词:抗原修复 免疫组化染色 液相芯片技术快速检测CYP2C9、CYP2C19、CYP4F2、VKORC1及ABCB1基因多态性 被引量:3 2019年 目的基于液相芯片技术,建立一种可同时、快速检测细胞色素P4502C9(CytoChrome P4502C9,CYP2C 9)、CYP2C19、CYP4F2、维生素K环氧化物还原酶(vitamin K epoxide reductase,VKORCI)及ATP结合盒亚家族B成员l(ATP-binding cassette subfamily B memberl,ABCB1)等与华法林和氯吡格雷相关药物基因多态性的方法。方法方法学的建立。从Genbank中查找与华法林和氯吡格雷药物相关的8个靶位点附近基因序列,设计特异性引物和探针;通过多重PCR扩增,等位基因特异性引物延伸(allele specific primer extension,ASPE),MagPlex-Tag微球杂交,经液相芯片系统Luminex 200检测荧光信号,确定基因型;优化反应体系并进行方法学评价。收集2017年6月至2018年12月东莞市厚街医院抗血栓治疗患者血液样本,共260例,采用建立的方法检测其8个靶位点,并与测序结果比较。结果本方法检测260例样本结果显示:纯合子荧光强度中位值(median fluorescence intensity,MFI)比率均>0.9或<0.1,杂合子MFI比率均在0.3〜0.6之间;各基因型批内和批间变异系数分别低于6.4%和10.9%;所需DNA最低检测限为0.75ng;260例样本的检测结果与测序结果完全一致。结论本研究采用液相芯片技术,成功建立了快速检测华法林和氯吡格雷相关药物基因型的方法。 许红丽 邓任堂 陈梅莲 陈载鑫 黄志宏 司徒博 孔桂兴 赖丽莎 郑磊 付文金关键词:液相芯片 不同比重干化学检测尿蛋白结果分析 被引量:1 2012年 目的分析不同比重下尿蛋白干化学定性结果与全自动生化分析仪定量结果,探讨尿比重对干化学检测尿蛋白的影响。方法 844份尿标本先经干化学检测尿蛋白,再用全自动生化分析仪定量检测尿微量白蛋白、尿肌酐,计算微量白蛋白/肌酐比值(UACR),统计分析不同比重下尿蛋白定性与定量结果。结果当干化学尿蛋白结果为阴性时,随着尿比重的增加,假阴性率下降,当1.030≤比重≤1.005时,假阴性率从34.1%下降到2.7%;当干化学尿蛋白结果为阳性时(±~+++),比重越高,假阳性率越高,随着比重下降,假阳性下降,比重≤1.005时没有假阳性。结论尿比重能明显影响干化学检测尿蛋白的准确性,对于比重过低或过高的标本,可以检测UACR或24h尿蛋白定量进行鉴别。 邓任堂 付文金 彭兰芬 孔桂兴 陈梅莲 陈楚填 刘亮 黄志宏 陈载鑫 汤惠华关键词:干化学 尿蛋白 2982份女性泌尿生殖道标本支原体培养阳性结果分析 被引量:11 2011年 目的了解东莞地区女性患者泌尿生殖道支原体感染的分布状况及耐药情况,指导临床合理使用抗生素。方法采用珠海益民生物工程制品厂生产的支原体试剂盒进行支原体培养鉴定及药敏试验,并进行统计学分析。结果从泌尿生殖道标本中分离出支原体2982份,其中单纯解脲脲原体(Uu)感染2280例,占76.5%,单纯人型支原体(Mh)感染92例,占3.1%,Uu和Mh混合感染610例,占20.5%。交沙霉素、强力霉素、美满霉素和四环素对支原体具有较好的抗菌活性,罗红霉素、克拉霉素和阿奇霉素只对单纯Uu感染有较好的抗菌活性,壮观霉素只对单纯Mh感染有较好的抗菌活性,氟喹诺酮类药物耐药性高。结论支原体耐药性高,临床治疗应以药敏报告选择用药,交沙霉素、强力霉素、美满霉素和四环素可作为东莞地区治疗女性支原体感染的首选用药。 邓任堂 孔桂兴 陈梅莲 余小丹关键词:支原体属 药物耐受性 1311例女性宫颈脱落细胞人乳头状瘤病毒检测结果分析 被引量:1 2017年 目的了解本地区妇女宫颈脱落细胞人乳头瘤病毒(HPV)的感染情况和基因型分布特点,为临床防治措施的制定提供参考依据。方法回顾性分析2015年3月至2016年6月于本院行宫颈脱落细胞HPV检测阳性患者资料,统计HPV的感染率、基因型分布特点、年龄变化趋势等。结果本次统计从1311名患者中检测出26种HPV基因型1773例,其中高危型占67.84%,低危型占32.16%,前五位高危型HPV基因型分别是HPV-52,16,58,53和39,分别占12.97%,10.38%,6.15%,5.92%和5.02%,前五位低危型HPV基因型分别是HPV-6,43,81,61和11,分别占7.90%,4.85%,3.95%,3.89%和3.38%。结论本地区HPV感染以单一高危型为主,最常见的基因亚型为HPV52、16、6、58和53,且发病有年轻化趋势,值得关注。 邓任堂 孔桂兴 陈梅莲 莫绮雯 方秀株关键词:人乳头瘤病毒 宫颈脱落细胞 基因型