孙颖
- 作品数：17 被引量：15H指数：2
- 供职机构：天津农学院更多>>
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- 相关领域：农业科学环境科学与工程更多>>
- 一种制备App菌影的方法及App菌影装载巴氏杆菌抗原制备亚单位疫苗的方法
- 本发明公开了一种制备App菌影的方法及App菌影装载巴氏杆菌抗原制备亚单位疫苗的方法，采用可控双裂解技术制备重组猪胸膜肺炎放线杆菌APP菌影，将巴氏杆菌保护基因导入APP菌影载体，制成猪胸膜肺炎和巴氏杆菌二联基因疫苗。用...
- 金天明孙颖刘田生高静
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- 温控双基因裂解法制备App菌影的研究
- 胸膜肺炎放线杆菌(App)是猪传染性胸膜肺炎的病原，接触性传播，使用疫苗进行预防是最佳手段。常用灭活苗无法抵御菌体定，无法阻止其他血清型菌株感染。菌影疫苗制备简单，生产成本低，可有效诱发体液免疫与细胞免疫。菌影由G-在噬...
- 孙颖高静金天明
- 关键词：猪疾病胸膜肺炎放线杆菌
- 利用TRAIL和HN基因构建重组腺病毒的方法及重组腺病毒和应用
- 本发明公开了一种利用TRAIL和HN基因构建重组腺病毒的方法及重组腺病毒和应用，使双基因在抑制肿瘤细胞生长方面发挥协同作用。采用从鸡脾细胞和新城疫病毒(NDV)LaSota株中分别扩增出TRAIL和HN基因序列，通过定点...
- 金天明孙颖高静徐良董东晓秦云倩
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- App菌影温控双基因裂解系统的构建
- 猪传染性胸膜肺炎是严重危害现代化养猪业的三大呼吸道疾病之一.免疫猪仍可呈带菌状态或慢性感染.研究发现菌影疫苗可有效抵御App定殖，所得抗体可与来自不同血清型菌株的抗原起反应，是一种非常具开发潜力的疫苗形式.本试验通过将裂...
- 孙颖金天明
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- 无焦油产生的生物质炭-热联产装置
- 本实用新型涉及一种无焦油产生的生物质炭‑热联产装置，包括破碎机、第一锁风器、炭化器、旋风分离器、燃烧室、第二锁风器、生物炭冷却器、第三锁风器、喷淋液循环泵、碱液吸收塔、活性炭吸附层、回流风机、烟气外排设备、烟气冷却器；第...
- 靳登超康佳宁罗琪杨升于金秋孙颖
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- App菌影装载多杀性巴氏杆菌OmpH外膜蛋白DNA疫苗的研究
- 猪传染性胸膜肺炎与猪肺疫为猪场常见细菌性呼吸道传染病,常呈混合或继发感染,给养猪业带来巨大危害。生产实践中,接种疫苗是防治该病的最好方法。常用灭活苗对于异种血清型菌株感染不具保护作用,无法阻止菌体定殖,为生产实践带来一定...
- 孙颖
- 关键词：APP多杀性巴氏杆菌DNA疫苗
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- 利用E.coli-App穿梭载体构建温控双基因裂解载体pMC-WK被引量：3
- 2011年
- 采用PCR方法从噬菌体PhiX174基因组中扩增出裂解蛋白E基因,从金黄色葡萄球菌基因组中扩增出核酸酶A基因(SN),通过15个柔性氨基酸linker将双基因串联,插入PBV220表达载体,构建温控双基因裂解系统(DLS)。PCR扩增DLS,将其与E.coli-App穿梭载体pMC-Express相连,构建重组穿梭载体pMC-WK。裂解试验表明,E-15aalinker-SN裂解较E裂解迅速而彻底,菌体裂解率达到99.999 4%;经PCR扩增出的DLS具有裂解活性。本试验成功构建了温控双基因裂解载体pMC-WK,为App菌影疫苗的研究奠定了基础。
- 孙颖金天明冯立文袁洁
- 关键词：穿梭载体
- App菌影装载猪巴氏杆菌OmpH抗原二联疫苗的研究
- 菌影疫苗是一种新型疫苗，具有制备简单，保存方便，免疫效果好的特点。App(胸膜肺炎放线杆菌Actinobacillus pleuropneumoniae)和猪巴氏杆菌(Pasteurella multocida)是猪场常...
- 孙颖金天明
- 关键词：二联疫苗
- TRAIL和HN基因融合表达重组腺病毒的构建及其对DT40细胞的抑瘤作用
- 2012年
- 分析携TRAIL和HN基因的重组腺病毒在DT40细胞中的表达规律及杀伤肿瘤细胞的生物学效应。通过RT-PCR分别从鸡外周血淋巴细胞和新城疫病毒(NDV)LaSota株中扩增出TRAIL和HN基因,通过定点突变和重叠延伸拼接法实现TRAIL和HN基因的2A连接,将获得的目的基因克隆到pShuttle-CMV穿梭载体中,与pAdeasy-1载体在BJ5183细菌内同源重组,构建了包含目的基因的重组腺病毒质粒pAd-TRAIL和pAd-TRAIL-2A-HN,将质粒线性化后转染AD293细胞,包装后的重组腺病毒,经RT-PCR检测、荧光显微镜观察和病毒滴度测定后,将获得的重组腺病毒体外转染禽淋巴白血病DT40细胞,通过RT-PCR和Western blotting检测重组腺病毒的感染性和外源基因的表达情况,采用流式细胞仪检测重组腺病毒对DT40细胞生长的影响以及Ad-TRAIL和Ad-TRAIL-2A-HN对DT40细胞的凋亡作用。PacⅠ酶切证实同源重组成功;RT-PCR、荧光显微镜检测证实重组腺病毒质粒成功导入AD293细胞中且具有良好的感染性,滴度为1.9×1010PFU/mL;Western blot检测结果显示,TRAIL-linker-HN基因能够在DT40细胞中稳定表达并对DT40细胞产生细胞毒作用,且诱导细胞的凋亡率为29.52%,表明TRAIL-linker-HN具有双基因抑瘤的协同效应。
- 高静孙颖金天明
- 关键词：重组腺病毒抑瘤作用
- 装载温控双基因裂解质粒的App菌影检测方法研究
- 2013年
- 为了提高对前期试验中制备的胸膜肺炎放线杆菌(App)菌影的检测效率,试验通过形态学鉴定、电镜扫描、PCR鉴定和间接ELISA法对App及其菌影进行检测。结果表明:PCR检测方法特异性显著,可检测AppⅠ、pMC-WK AppⅠ及其裂解情况,具有准确、灵敏、容易操作等优点。说明将菌影的形态学检查、电镜扫描、PCR和血清学检测相结合,可准确检验试验中不同阶段的App及其菌影。
- 魏延宏徐良李媛孙颖刘颖孙铭君宋桂敏金天明
- 关键词：间接ELISA
