宋云峰
- 作品数：59 被引量：102H指数：6
- 供职机构：华中农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 猪细小病毒病诊断方法、新型疫苗及综合防制技术研究
- 陈焕春金梅林赵俊龙肖少波吕建强吴斌方六荣何启盖宋云峰王建成徐高原潘春刚王珍琴刘正飞陈章表
- 1、从规模化猪场爆发头胎母猪所产死胎中分离到猪细小病毒作为地方标准毒株命名为WH-1株。同时开展了大量的流行病学研究，证实当时在我国规模化猪场爆发的头胎母猪流产风爆是由猪细小病毒引起的。 2、诊断方法与试剂盒研究： ...
- 关键词：
- 关键词：猪细小病毒新型疫苗综合防制
- 猪传染性胸膜肺炎放线杆菌apxⅡ^-/Amp^r突变株的构建被引量：6
- 2004年
- 根据已发表的猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(APP)血清5型核苷酸序列设计并合成了一对引物,从自行分离的APP菌株PCR扩增apxⅡCA基因,将该片段与pBluescriptSK(+)载体连接,得到质粒pSK CA。另外,从质粒pIC neo中得到的Ampr基因经XbaⅠ酶切消化后,克隆到pSK CA中的XbaⅠ位点,获得了重组转移质粒pSK CAmpr。pSK CAmprDNA通过电转化导入亲本菌,电转化后的产物涂布于TM平板,可获得突变株。提取突变株和亲本菌基因组DNA,用PCR检测含有apxⅡC基因的胸膜肺炎放线杆菌染色体区域。从突变株基因组DNA扩增得到的一条PCRDNA片段比从亲本菌基因组DNA扩增得到的一条DNA片段大1 3kb,增大的片段与所插入的Ampr基因大小相符合。用合成的Ampr基因引物从突变株基因组DNA中也能扩增到一条1 3kb的特异性DNA片段。同时South ernblot鉴定有特异性带。这表明我们所构建的突变株是成功的。测定了突变株的遗传稳定性及突变株对动物的安全性,为进一步研究用其它报告基因置换Ampr基因后,研制单基因工程疫苗及以APP毒力缺失突变菌株为载体,表达外源基因的APP基因工程菌的研究奠定了坚实的基础。
- 贝为成何启盖陈焕春徐晓娟洪文洲肖少波宋云峰刘建杰
- 关键词：传染性胸膜肺炎放线杆菌基因构建
- miR-15b通过靶向RNF125调节JEV诱导的炎症反应
- 乙型脑炎病毒靶向中枢神经系统,引发神经炎症.miRNAs是一类具有重要调控功能的小RNA分子,目前有关miRNAs对JEV诱导产生的神经炎症的调控知之甚少.本研究中,miR-15b在JEV感染的星形胶质细胞U251中表达...
- 朱碧波叶静宋云峰陈焕春曹胜波
- 关键词：乙型脑炎病毒微小核糖核酸炎症反应
- 文献传递
- PCV2复制起始区DNA互作蛋白的筛选及PARP1蛋白对病毒复制的调控
- 2022年
- 旨在筛选PK-15细胞中与猪圆环病毒2型(porcinecircovirustype2,PCV2)复制起始区(originofreplication,Ori)互作的细胞蛋白谱,并初步探究PARP1蛋白对PCV2复制的调控。利用DNA-proteinpulldown结合LC-MS/MS方法筛选PCV2复制起始区DNA互作蛋白;对互作蛋白进行GO分析以及KEGG通路富集分析,并绘制蛋白互作网络图。在对互作蛋白进行分析的基础上,选择聚(ADP-核糖)聚合酶1(PARP1)蛋白,开展了深入研究。构建了PARP1蛋白以及PCV2复制蛋白Rep真核表达质粒,并利用DNA-proteinpulldown及DNAIP试验验证PARP1蛋白与PCV2Ori的互作;通过Co-IP试验,研究了PARP1蛋白与PCV2Rep蛋白的互作;在细胞中过表达或沉默PARP1蛋白,通过qPCR方法检测对PCV2复制的影响。本研究共鉴定到130种可能与Ori互作的宿主蛋白,其中,与DNA功能相关的蛋白共有45种,主要涉及宿主DNA损伤修复及DNA复制功能;验证了PARP1蛋白与PCV2基因组Ori以及Rep蛋白互作。用siRNA沉默PARP1蛋白表达后,PCV2基因组复制效率显著下降,瞬时过表达PARP1蛋白,PCV2基因组复制效率显著提高。综上所述,本研究筛选到130种可能与PCV2Ori互作的细胞蛋白,发现PARP1蛋白可结合PCV2基因组Ori及Rep蛋白并促进PCV2的复制,为PCV2药物靶点选择及PCV2复制起始过程研究奠定了基础。
- 贾含笑袁红根李振关帅印张金花宋云峰
- 关键词：PCV2复制起始区PARP1DNA损伤修复
- 一株具有阻断活性的抗尼帕病毒G蛋白的单克隆抗体及其应用
- 本发明属于生物免疫分析技术领域，具体涉及一株具有阻断活性的抗尼帕病毒G蛋白的单克隆抗体及其应用。本发明经过密码子优化方法克隆得到尼帕病毒G蛋白基因，该蛋白基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：1中第898‑1806位碱基...
- 曹胜波李育霖黄少梅叶静宋云峰刘学芹魏燕鸣
- 文献传递
- PCV2 ORF2自杀性DNA疫苗的构建
- 以PCV2豫A株为模板,PCR方法扩增其主要免疫源性基因ORF2,并将其分别克隆到自杀性DNA疫苗载pSCA1和pSHAME2a,构建了ORF2的自杀性DNA疫苗pSORF2和pMORF2。同时月PCR方法扩增BVP22...
- 宋云峰肖少波金梅林陈焕春
- 关键词：PCV2ORF2自杀性DNA疫苗
- 文献传递
- 一种小分子化合物在制备抗寨卡病毒药物中的应用
- 本发明属于动物病毒防制技术领域，具体涉及一种小分子化合物在制备抗寨卡病毒药物中的应用。本发明包括一种抗寨卡病毒的药物靶标的筛选，该药物靶标是一种小分子化合物，该小分子化合物可在制备抗寨卡病毒的药物中应用。其中的应用包括在...
- 宋云峰苗娟邹佳辉曹胜波
- 猪圆环病毒I型ORF2蛋白序列与其核定位功能的相关性被引量：4
- 2005年
- 软件分析PCV1-ORF2的核苷酸序列发现其N端的氨基酸序列中包含一段核定位序列,将具有核定位序列特征的区域删除,构建缺失核定位序列的PCV1-ORF2基因与绿色荧光蛋白的真核融合表达载体,同时构建PCV1-ORF2全基因与绿色荧光蛋白的真核融合表达载体,分别转染Hela细胞,可观察到后者绿色荧光聚集在细胞核区域;而前者转染Hela细胞结果显示核定位现象消失,从而可以推断这一区域是CPV1-ORF2蛋白核定位的功能区。
- 陈美玲陈焕春宋云峰黄红亮
- 关键词：HELA细胞
- N-糖基化对乙型脑炎病毒prME和NS1基因免疫效果影响的研究
- 2012年
- prME和NS1为乙型脑炎病毒两个主要的免疫保护蛋白,且均为N-糖蛋白。为研究N-糖基化对乙型脑炎病毒免疫保护的作用,本研究用PCR介导的定点突变方法,分别消除乙型脑炎病毒prME和NS1基因的不同N-糖基化位点,并构建了prME和NS1突变基因的真核表达质粒。将质粒免疫四周龄雌性小白鼠,经两次免疫后,采集血清检测体液免疫反应,最后对小鼠用强毒进行攻击,观察并记录免疫保护力。研究结果显示,与野生型prME基因免疫组相比,消除单个糖基化位点后prME基因诱导的ELISA抗体、中和抗体和免疫保护力均略有升高,而同时消除两个糖基化位点的则会降低。NS1基因消除单个糖基化位点后保护率高达到100%,但消除两个糖基化位点后则免疫保护率略有降低(75%)。通过本研究证明,N-糖基化在维系乙型脑炎病毒prME和NS1蛋白的免疫保护中具有重要的作用,单个糖基化的缺失可增强蛋白的免疫原性,而两个糖基都缺失后,则造成了免疫效率的降低。
- 张子重汪雪宰俊杰孙乐强宋云峰陈焕春
- 关键词：乙型脑炎病毒NS1基因N-糖基化免疫
- 一种猪伪狂犬病毒的高通量药物筛选的方法
- 本发明公开了一种猪伪狂犬病毒的高通量药物筛选的方法，其步骤：（1）在白色底透96孔细胞板中接种IBRS-2细胞，在37°C5%CO2温箱中培养；（2）弃去生长液，加入维持液，加入待筛选化合物，依次进行倍比稀释，混合均匀，...
- 宋云峰周锐王翠陈焕春
- 文献传递
