宋健文 作品数:19 被引量:46 H指数:5 供职机构: 西安市儿童医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 陕西省自然科学基金 中国博士后科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
不同剂量中波紫外线对原代角质形成细胞增殖和自噬的影响 被引量:1 2018年 目的初步探讨原代角质形成细胞接受不同剂量中波紫外线(UVB)照射后细胞增殖和自噬的变化情况。方法分离人皮肤角质形成细胞,用0,10,20,40 m J/cm^2剂量UVB照射细胞,照射后12 h,MTT法检测细胞增殖活力,MDC染色检测细胞自噬表达阳性率,Western blot法检测不同剂量UVB照射以及照射后0,2,4,8 h自噬相关蛋白LC3的表达水平。分别使用自噬抑制剂氯喹和促进剂雷帕霉素预处理原代角质形成细胞,通过UVB照射后检测细胞的存活率。结果 UVB照射后,原代角质形成细胞的增殖活力显著降低,10,20,40 m J/cm^2照射组的A490值分别为1.067±0.028,0.968±0.056,0.889±0.018,显著低于对照组(0 m J/cm2)的1.135±0.040(F=51.079,P<0.001)。UVB照射使原代角质形成细胞的自噬表达阳性率显著增加,10,20和40 m J/cm2照射组的细胞自噬表达阳性率分别为(16.81±0.23)%,(30.66±0.59)%和(24.93±0.29)%,显著高于对照组[(9.60±0.55)%,F=2 148.2,P<0.001]。随UVB照射剂量增加,原代角质形成细胞自噬相关蛋白LC3-Ⅱ表达水平逐渐升高,且20 m J/cm^2UVB照射角质形成细胞后,自噬相关蛋白LC3-Ⅱ表达水平在照射后2 h最高,照射后4-8 h逐渐降低。雷帕霉素预处理有提高UVB照射后角质形成细胞存活率的趋势,而氯喹预处理可显著降低UVB照射后角质形成细胞的存活率,差异具有统计学意义(P<0.001)。结论 10,20,40 m J/cm2的UVB照射对原代角质形成细胞增殖具有抑制作用,对细胞自噬的发生具有促进作用,氯喹抑制自噬可显著降低UVB照射后角质形成细胞的存活率。 宋健文 黄惠梅 张英 王博关键词:角质形成细胞 中波紫外线 细胞增殖 细胞自噬 姜黄素对IL-17诱导的人角质形成细胞NO合成以及iNOS表达的影响 被引量:5 2011年 目的:探讨姜黄素对IL-17诱导的人表皮角质形成细胞株(HaCaT细胞)NO合成以及诱导型一氧化氮合酶(iN-OS)的mRNA和蛋白表达的影响。方法:用IL-17刺激体外培养的HaCaT细胞,并分别加入3种浓度的姜黄素共培养24 h。并收集细胞上清液、提取细胞总RNA、总蛋白,分别进行NO含量的测定、荧光定量PCR和W estern b lot实验,明确姜黄素对NO含量以及iNOS表达的影响。结果:IL-17能够有诱导HaCaT细胞NO以及iNOS的表达(P<0.01)。姜黄素有效下调NO合成量以及iNOS的mRNA(P<0.01)及蛋白表达(P<0.01)水平。结论:姜黄素对IL-17诱导的HaCaT细胞NO分泌及iNOS的表达具有明显的抑制作用,从而为其对角质形成细胞相关的皮肤炎症性疾病的治疗提供了理论依据。 杨正生 彭振辉 李晓莉 宋健文 任建文关键词:姜黄素 一氧化氮 诱导型一氧化氮合酶 IL-17 角质形成细胞 姜黄素对IL-17诱导的人表皮角质形成细胞株NF-κB活化的影响 被引量:2 2011年 目的探讨姜黄素对IL-17诱导的人表皮角质形成细胞株(HaCaT细胞株)核转录因子NF-κB活化的影响,为其对某些炎症性皮肤病的治疗提供一定的理论依据。方法用IL-17刺激HaCaT细胞不同时间(0h,0.5h,1h,2h),或用姜黄素不同浓度(2.5μmol/L,5μmol/L,10μmol/L)预处理1h后,加入IL-17刺激2h,应用ELISA法结合捕获探针检测各组的NF-κBp65的DNA结合活性。提取IL-17刺激后不同时间点各组以及10μmol/L浓度姜黄素预处理组核蛋白,Westernblot方法检测各组NF-κBp65蛋白的表达。结果 IL-17能够有效地增加HaCaT细胞NF-κBp65的DNA结合活性及核蛋白表达。加入姜黄素共培养后,各浓度处理组的NF-κBp65DNA结合活性均下降(P<0.01),10μmol/L姜黄素处理引起NF-κBp65的蛋白表达水平明显下降(P<0.01)。结论姜黄素能够有效抑制IL-17诱导的HaCaT细胞NF-κBp65的DNA结合活性以及核蛋白的表达,从而抑制NF-κB的活化。 杨正生 彭振辉 李晓莉 宋健文 任建文关键词:姜黄素 角质形成细胞 miRNA-17对UVA诱导的皮肤成纤维细胞光老化的调节作用 被引量:1 2016年 目的检测miR-17在长波紫外线(UVA)诱导的光老化中的调节作用。方法分离人皮肤成纤维细胞(HDFs),用0 J/cm^2(对照组),2.5,5.0,7.5 J/cm^2剂量的UVA辐射诱导光老化模型,用实时定量PCR和Western blot分别检测miR-17和基质金属蛋白酶3(MMP3)的表达水平。对HDFs细胞分别转染miR-17的功能模拟物、miR-17阴性对照物、miR-17的功能抑制物和miR对照的功能抑制物,转染24 h后UVA辐射诱导光老化模型,检测MMP3蛋白表达水平。结果经不同剂量UVA辐射后,HDFs中MMP3表达与对照组相比显著升高(P<0.01),且miR-17表达与对照组相比显著降低(P<0.01),其中2.5 J/cm^2组的MMP3蛋白表达水平和miR-17表达显著低于5.0 J/cm^2组和7.5 J/cm^2组(P<0.05)。miR-17转染HDFs后再用UVA辐射,miR-17转染组的MMP3的蛋白水平显著低于miR对照组(P<0.05),而miR-17抑制物转染组MMP3的蛋白水平与miR对照组相比无显著的改变。结论人皮肤成纤维细胞光老化模型中UVA可导致miR-17表达的下降,从而负性调节MMP3的表达。 宋健文 张景华 宋建驷关键词:光老化 人皮肤成纤维细胞 长波紫外线 基质金属蛋白酶-3 西安地区5~12岁儿童遗尿症患病率的调查研究 被引量:6 2019年 目的对西安地区5~12岁儿童遗尿症进行流行病学调查,了解遗尿症患病率状况。方法 2015年9至12月,采用多阶段分层随机整群抽样方法对西安地区的4 780名5~12岁儿童家长进行问卷形式的现况调查,了解儿童遗尿症的患病及就诊情况。结果在调查的4 069人中,男2 091人,女1 978人;其中患遗尿症者共171人,总患病率为4.20%,其中就诊率仅为27.49%。男、女童遗尿症患病率分别为5.16%(108/2 091)和3.19%(63/1 978),差异有统计学意义(χ~2=9.898,P<0.01)。遗尿症患病率随年龄的增长而降低,由5岁时的8.01%下降至12岁时的2.85%,差异有统计学意义(趋势χ~2=51.662,P<0.01)。结论西安地区5~12岁儿童遗尿症患病率较高,男性高于女性,患病率随年龄增长而降低,但儿童遗尿症就诊率较低,需引起广泛重视,加强宣教,倡导尽早诊断并早期治疗。 黄惠梅 吴谦 宋健文 周南 索磊 李志娟 张敏 骞佩 王莹 包瑛关键词:儿童 遗尿症 患病率 先天性厚甲症2型一家系的基因突变研究 被引量:3 2016年 目的研究先天性厚甲症的基因突变,从而探讨基因型与表现型之间的关系。方法提取1个先天性厚甲症家系中先证者及其家人的外周血基因组DNA,用聚合酶链反应扩增,产物测序检测。取先证者母亲的皮损做组织病理检查,观察皮损组织的角蛋白17的表达。结果家系中两患者的角蛋白17的1号外显子第275位碱基发生A→G的杂合突变,其突变导致其编码角蛋白17的第92位氨基酸的密码子发生改变,使其编码的氨基酸由天冬酰胺变为丝氨酸(N92S)。先证者母亲皮损组织病理检查为多发性脂囊瘤,免疫组化显示角蛋白17阳性表达。结论验证了角蛋白17的1号外显子α螺旋1A区突变在先天性厚甲症发病机制中的重要作用。角蛋白17 1A区突变对脂囊瘤的早发可能存在一定影响,基因型与表型存在一定关联。 刘平 卢宁 苏慧 李林丽 宋健文 杨荣丽 刘钰泽关键词:角蛋白 角蛋白17 先天性厚甲症 表现型 红外线影响人皮肤成纤维细胞中c-Jun、Ⅰ型和Ⅲ型胶原的表达 被引量:6 2016年 目的研究红外线对体外培养成纤维细胞(HSF)中c-Jun和Ⅰ、Ⅲ型胶原表达的影响,为红外线引起光老化损伤的分子机制提供理论依据。方法提取原代皮肤成纤维细胞培养,成纤维细胞被分为对照组(无红外线照射)和实验组(红外线照射);用MTT检测各组细胞活性;用实时定量PCR和免疫细胞化学(ICC)方法检测各组c-Jun和Ⅰ、Ⅲ型胶原m RNA和蛋白的表达。结果MTT检测显示与对照组比较,实验组各组中红外线照射对HSF的增殖有不同程度的抑制作用;红外线照射下调Ⅰ型胶原m RNA和蛋白的表达,随着照射剂量的增加,Ⅰ型胶原的m RNA和蛋白表达下降越明显(P<0.01);红外线照射成纤维细胞12 h后Ⅲ型胶原m RNA和蛋白的表达都呈照射剂量依赖性下调(P<0.05,P<0.01),24 h后Ⅲ型胶原m RNA和蛋白的表达都呈照射剂量依赖性上调(P<0.05,P<0.01);红外线照射上调了c-Jun m RNA和蛋白的表达水平,随着照射剂量的增加,呈照射剂量依赖性(P<0.05,P<0.01)。结论红外线照射人皮肤成纤维细胞后上调c-Jun表达,抑制Ⅰ型胶原表达,干扰Ⅲ型胶原表达,这可能是其引发和促进皮肤光老化的发生机制之一。 刘平 杨荣丽 苏慧 李林丽 宋健文 卢宁 刘钰泽关键词:C-JUN 人皮肤成纤维细胞 西安市初中生日光紫外线暴露和防护的知识和行为评价 被引量:2 2013年 目的评价西安市初中生日光紫外线辐射的认知水平和防护行为,阐明影响紫外线辐射健康教育的因素。方法西安市4所初中共715名在校学生,完成19个问题构成的问卷调查,问卷涉及调查对象对紫外线辐射的不良作用的认识程度和采取的防护行为。运用频率描述和卡方检验处理数据。结果 71.5%(511例)和65.2%(466例)的被调查者知道紫外线辐射可以引起皮肤损伤和皮肤癌,51.3%(367例)采取防护措施,7.4%(53例)紫外线辐射安全知识是学校教育获得。结论西安市初中生的紫外线辐射知识水平需要提高,防护行为需要加强,要重视紫外线知识的学校教育。 宋健文 刘平 李林丽 苏慧 彭振辉关键词:紫外线 中学生 关于西安市体育教师紫外线职业损伤的KAP调查及伦理对策研究 2015年 目的调查分析西安市体育教师对紫外线职业损伤KAP的基本情况,为制定有关体育教师日光紫外线职业损伤的防护提供理论依据。方法 2013年3-7月选择整群分层随机抽样的方法选择研究对象1200人,采用问卷调查方法对西安市体育教师就紫外线职业损伤KAP等方面进行调查。结果调查对象中有过晒伤史的占21.5%,做过专业皮肤检查的占5.1%;认为长期室外紫外线对皮肤危害性的占34.1%,采取一定防护措施的占58.9%,对紫外线能正确认识的占3.2%;采取防护措施的目的方面,43.9%的调查对象采取措施的目的是防止晒黑而不是防止晒伤。结论体育教师作为一个特殊的室外工作群体,整体上紫外线职业损伤防护知识水平较低,防护目的有所偏差,从生物心理社会医学模式的角度看,应本着健康伦理的原则,加强紫外线职业损伤防护知识的宣传,并积极采取相应干预措施。 宋建驷 宋健文 任平社 宋建玲 徐桂玲 孙云 庄希琛关键词:紫外线损伤 KAP调查 体育教师 伦理对策 姜黄素对IL-17诱导的人表皮角质形成细胞株CCL20表达的影响 被引量:7 2011年 目的探讨姜黄素对IL-17诱导的人表皮角质形成细胞株(HaCaT细胞株)CCL20表达的影响。方法用IL-17刺激HaCaT细胞,并加入不同浓度的姜黄素(2.5μmol/L,5μmol/L,10μmol/L)共培养24h。提取总RNA并收集细胞上清液,分别进行荧光定量PCR和ELISA实验,从mRNA及蛋白表达水平两方面观察姜黄素对CCL20表达的影响。结果 IL-17能够有效地诱导HaCaT细胞CCL20的表达。加入姜黄素共培养后,CCL20在mRNA及蛋白表达水平均明显下降(P均<0.05)。结论姜黄素对IL-17诱导的HaCaT细胞CCL20的表达具有明显的抑制作用,可为其对银屑病的治疗提供理论依据。 杨正生 彭振辉 李晓莉 宋健文 任建文 尧志建关键词:姜黄素 CCL20 白介素-17 角质形成细胞