宋长芹
- 作品数：19 被引量：34H指数：2
- 供职机构：山东大学齐鲁医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金山东省自然科学基金山东省卫生厅青年科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- HIV-1感染者及其密切接触者HIV-1抗性基因的研究被引量：2
- 2004年
- 目的:研究CCR2-64I、SDF1-3'A2种HIV-1抗性基因在山东省HIV-1感染者及其密切接触者中的分布,以及它们对艾滋病病程进展和人群易感性的影响。方法:利用体外扩增PCR和限制性片段长度多态性分析RFLP检测目标人群中的HIV-1抗性基因,用统计学方法分析基因分布频率与病程进展和易感性的关系。结果:CCR2-64I、SDF1-3'A的突变频率分别为23.64%、23.94%,含SDF1-3'A1的患者平均潜伏期为(8.33±1.16)年,含CCR2-64I患者平均潜伏期为(8.94±1.17)年,野生纯合子患者为(7.42±1.33)年。结论:本研究首次阐明了CCR2-64I、SDF1-3'A在山东省HIV-1感染者及其密切接触者中分布的特点,并发现2种抗性基因的存在均可延缓感染者的病程。
- 张静于修平李盛长宋长芹傅继华尤向东
- 关键词：人免疫缺陷病毒I型CCR2抗性基因
- HPV16L1-E7重组腺病毒在SCID-Hu IC小鼠和HPV16阳性肿瘤联合嵌合小鼠中防治作用的研究被引量：2
- 2003年
- 目的 建立SCID HuIC小鼠动物模型和HPV16阳性肿瘤联合嵌合模型 ,研究HPV16L1 E7重组腺病毒在SCID HuIC小鼠和肿瘤联合嵌合模型中的防治作用。方法 ①实验组SCID小鼠移植人胎儿多组织 ,对照组注射RPMI 16 4 0培养液 ,8周末检测人IgG抗体 ,人CD4 5、CD3、CD19;②T1和C1组先注射HPV16L1 E7重组腺病毒 ,2周末强化 ,4周末接种CaSki细胞 ;T2和C2组先接种CaSki细胞 ,4周末注射HPV16L1 E7重组腺病毒 ,6周末强化。 8周末检测病毒特异性IgG抗体、人IFN γ及T淋巴细胞增殖 ,测定肿瘤的物理指标以及免疫组化实验。结果 ①实验组人IgG抗体阳性率 90 .0 % (18/ 2 0 ) ,CD4 5为 (49.79± 39.18) % ;CD3为 (42 .2 7± 36 .37) % ;CD19为 (9.2 8±7.4 6 ) % ,对照组人IgG抗体、人CD4 5、CD3及CD19均为阴性 ;②T1和T2组病毒特异性IgG抗体均为阳性、人IFN γ的含量和T淋巴细胞增殖实验 ,病毒特异性蛋白刺激组均高于非刺激组 (P <0 .0 5 ) ,C1和C2组病毒特异性IgG抗体为阴性、人IFN γ的含量及T淋巴细胞增殖均为阴性 ;肿瘤形成率 :T1和T2组分别为 0和 70 .0 % (7/ 10 ) ,而C1和C2组均为 10 0 % ;肿瘤大小 :T2组在 4周末时为 (4.35 5±0 .387)mm3 ,8周末为 (10 2 8± 90 .96 )mm3 ,C2组在 4周末时为 (32 .75± 6 .717)
- 宋长芹于瑾栾怡卞继峰马道新赵蔚明贾继辉周亚滨齐眉王大燕于修平
- 关键词：重组腺病毒
- HPV16、HPV18感染及P53基因突变与肺癌的相关性研究
- 宋长芹
- 关键词：人乳头瘤病毒肺癌
- 宫颈癌组织中HPV16E6的基因克隆及其在大肠杆菌中的表达被引量：1
- 2000年
- 目的 :进行人乳头瘤病毒 16型相关肿瘤的E6血清学研究。方法 :采用聚合酶链反应 (PCR)从宫颈癌组织DNA中扩增出HPV16E6基因片段 ,克隆至测序质粒 pGEM T中 ,并用限制性内切酶将HPV16E6基因切下 ,克隆至表达质粒pGEMEX 1中 ,经IPTG诱导表达为融合蛋白 ,分子量约 4 5KD。结果 :融合蛋白占菌体总蛋白的 2 5% ,免疫印迹检测表明HPV16E6融合蛋白能被抗HPV16E6抗体识别。结论
- 栾怡卞继峰宋长芹贾继辉周亚滨权衡于修平
- 关键词：子宫颈肿瘤乳头瘤病毒分子克隆大肠杆菌
- 干扰素诱导蛋白IFI16与HPV16E6、E7蛋白相互作用的研究被引量：2
- 2004年
- 目的:研究人乳头瘤病毒(humanpapillomavirus熏HPV)16型E6、E7蛋白与干扰素诱导蛋白IFI16的相互作用,初步揭示IFI16拮抗HPV16E6、E7致瘤活性的分子机制。方法:(1)体外GST阻滞分析:克隆、表达及纯化GST鄄HPV16E6和GST鄄HPV16E7融合蛋白,将含有IFI16蛋白的EB病毒阴性伯基特淋巴瘤穴BJAB雪细胞提取物与上述纯化蛋白孵育,通过WesternBlotting分析蛋白质的体外相互作用;(2)免疫共沉淀分析:构建表达His鄄HPV16E6蛋白的真核表达载体,将表达有IFI16和His鄄HPV16E6蛋白的293T细胞裂解物与抗His抗体孵育,用IFI16抗体检测共沉淀蛋白复合物中IFI16蛋白的存在;将表达有IFI16和HPV16E7蛋白的CaSki和SiHa细胞裂解物与HPV16E7抗体孵育,检测共沉淀蛋白复合物中E7与IFI16是否结合。结果:成功构建了原核表达质粒pGEX鄄4T/HPV16E6及pGEX鄄4T/HPV16E7,并表达、纯化获得GST鄄HPV16E6及GST鄄HPV16E7融合蛋白。体外GST阻滞分析结果表明,用IFI16单抗做WesternBlotting分析可检测到复合物中IFI16蛋白,表明GST鄄HPV16E6和GST鄄HPV16E7均可与IFI16蛋白结合。免疫共沉淀分析进一步证实,共沉淀蛋白复合物中也可检测到IFI16蛋白,证明在细胞中HPV16E6和E7蛋白也能与IFI16蛋白结合。结论:无论在体外还是在细胞中,抑瘤因子IFI16蛋白均能特?
- 于瑾赵蔚明齐眉宋长芹赵丽刘传聚Peter Lengyel于修平
- 关键词：干扰素诱导剂E6蛋白E7蛋白
- SCID-HuIC小鼠模型的建立及在rAd5HPV16L1-E7疫苗中的应用被引量：1
- 2004年
- 目的 研究脐血移植建立SCID HuIC小鼠嵌合动物模型以及在HPV16L1 E7重组腺病毒中的应用。方法 (1)采用尾静脉注射法给实验组注射脐血单个核细胞悬液 ,对照组注射RPMI16 4 0培养液 ;8周末检测血中人IgG抗体水平及人CD4 5、CD3、CD19;(2 )将SCID HuIC小鼠和SCID小鼠 ,分别经腹腔注射和滴鼻途径给予rAd5HPV16L1 E7重组病毒 ,于第 4周末取血检测rAd5HPV16L1 E7重组病毒特异性IgG抗体、脾细胞培养液中IFN γ的含量及T 淋巴细胞增殖。结果 (1)实验组中人IgG抗体阳性数为 10 15 ,含量为 (0 16 7± 0 0 89) ;人CD4 5为 (9 39± 4 2 1) ,CD3为 (3 2 5± 3 99) ;CD19为 (1 6 9± 0 75 ) ,对照组未测出人IgG抗体以及CD4 5、CD3、CD19;(2 )腹腔注射组和滴鼻组病毒特异性IgG抗体均为 10 0 %阳性 ;实验组培养液中IFN γ的含量和T 淋巴细胞增殖实验病毒特异性蛋白刺激组均高于非刺激组 (P <0 0 5 ) ;对照组SCID小鼠rAd5HPV16L1 E7重组病毒特异性IgG抗体、T 淋巴细胞增殖和培养液中人IFN γ均为阴性。结论 (1)采用人脐血移植SCID小鼠建立SCID HuIC小鼠嵌合动物模型是可行的 ;(2 )人新鲜脐血移植重建的SCID HuIC小鼠具有对rAd5HPV16L1 E7重组病毒的免疫应答能力 ,而未移植者 (对照组 )则对rAd5HPV16L1 E7重?
- 宋长芹李勇栾怡卞继峰赵丽赵蔚明贾继辉周亚滨齐眉于修平
- 关键词：HPV16SCID小鼠人IGGCD3T-淋巴细胞免疫应答能力
- TA克隆的应用研究被引量：17
- 2001年
- 目的 :探讨用于PCR扩增产物快速高效的克隆技术。方法 :为制备T载体 ,用SmaI消化质粒 pUC18成纯末端 ,纯化后与TaqDNA聚合酶及dTTP ,75℃反应 2h ,构建成加上T尾的线性 pUC18载体。将由质粒 pBR32 2 HPV16中PCR扩增获得早期蛋白E6的基因扩增产物 ,根据TA克隆策略克隆至pUC18 T载体中 ,经PCR、限制性酶切分析鉴定重组子 ,并对TA克隆连接条件做了探讨。 结果 :获得重组质粒 pUC18 E6。 结论 :TA克隆采用低温延时连接 ,阳性克隆率高 ,是高效。
- 栾怡于修平宋长芹卞继峰赵蔚明周亚滨贾继辉
- 关键词：TA克隆聚合酶链反应乳头状瘤病毒基因E6
- 乳头瘤病毒疫苗研究模型SCID-Hu IC小鼠的建立与应用
- 该研究主要采用人脐血移植和胎儿多组织移植策略在SCID小鼠体内建立人-鼠嵌合模型以及用HPV16阳性的宫颈癌细胞系移植建立肿瘤联合嵌合模型,并进一步研究了rAd5HPVl6L1-E7重组腺病毒疫苗对SCID-Hu IC小...
- 宋长芹
- 关键词：疫苗人乳头瘤病毒小鼠
- 文献传递
- HPV16L1-E7蛋白疫苗诱导小鼠产生抗体及细胞免疫应答的研究被引量：2
- 2002年
- 目的 :探讨嵌合性病毒样颗粒HPV1 6L1 E7蛋白疫苗接种于动物体内诱发体液和细胞免疫反应的能力。方法 :以本室构建的HPV1 6L1 E7嵌合蛋白疫苗腹腔注射免疫BALB/c小鼠 ,在初次免疫后 ,分别于第 3、4、5周采血ELISA检测特异性抗体的产生。并耳皮下注射HPV1 6L1蛋白 ,检测特异性DHT反应。在末次免疫 2周后 ,取小鼠脾细胞 ,用HPV 1 6L1 E7蛋白刺激 ,检测T细胞增殖反应及血清IFN γ水平。结果 :HPV1 6L1 E7蛋白疫苗免疫小鼠可有效产生HPV1 6L1抗体及特异性DTH反应 ,加强免疫后 ,抗体水平升高 ,两者水平均高于对照组 (P <0 .0 1 )。HPV1 6L1 E7嵌合蛋白疫苗免疫后取小鼠脾细胞 ,在特异性HPV1 6L1 E7蛋白抗原刺激下 ,特异性T淋巴细胞明显增殖。被免疫小鼠血清中出现高水平IFN γ。结论 :嵌合病毒样颗粒HPV1 6L1 E7蛋白可诱导小鼠产生高滴度抗体、HPV1 6L1特异性TDH参与的超敏反应及细胞免疫应答的细胞因子 。
- 栾怡于修平宋长芹卞继峰阎世坤赵蔚明贾继辉周亚滨齐眉
- 关键词：人乳头状瘤病毒疫苗实验动物
- HPV_(16)L1-E7重组腺病毒载体疫苗免疫BALB/c小鼠的研究被引量：2
- 2002年
- 目的:探讨人乳头瘤病毒16型L1-E7重组腺病毒载体疫苗的免疫效应。方法:①将rAd5HPV16L1-E7载体疫苗在293细胞中扩增后,以肌肉注射、腹腔注射、滴鼻和灌胃途径免疫小鼠,采用ELISA法测其血清IgG抗体水平;②制备脾细胞悬液,加入到96孔无菌培养板中,并分别加入rAd5HPV16L1-E7特异性蛋白和RPMI1640+10%胎牛血清,加入3H-TdR1μCi/孔,做T-细胞增殖实验;③取经过培养56h的培养液进行IFN-γ的测定。结果:不同途径免疫的BALB/c小鼠血清IgG抗体水平均高于对照组(P<0.05),但以肌注组产生抗体量最多,IFN-γ和T-细胞增殖亦高于对照组(P<0.05)。结论:rAd5HPV16L1-E7重组活病毒疫苗既能刺激T-细胞产生细胞介导的免疫应答,又能刺激B-细胞产生抗体介导的免疫应答,说明其具有很好的免疫原性。
- 宋长芹于修平栾怡卞继峰赵蔚明贾继辉李勇周亚滨于瑾齐眉宋静王津秋阎淑芳
- 关键词：重组腺病毒载体疫苗BALB/C小鼠抗独特型抗体
