庞春英
- 作品数：103 被引量：174H指数：7
- 供职机构：中国农业科学院更多>>
- 发文基金：国际科技合作与交流专项项目引进国际先进农业科技计划广西壮族自治区自然科学基金更多>>
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- 奶水牛HSD17B4基因的克隆及序列分析被引量：1
- 2018年
- 17β-雌二醇脱氢酶Ⅳ（17β-Hydroxysteroid dehydrogenaseⅣ,HSD17B4）是一种在类固醇代谢过程中发挥重要作用的酶蛋白。为了阐明HSD17B4基因对水牛繁殖性能的影响,试验以奶牛HSD17B4基因序列（登录号：NM_001007809.2）为探针设计引物,利用PT-PCR克隆水牛HSD17B4基因,并对基因的核苷酸序列和蛋白质序列特征进行生物信息学分析。结果显示,水牛HSD17B4基因mRNA序列全长2 680 bp,其中5＇端长145 bp,3＇端长324 bp,CDS序列长2 211 bp,编码736个氨基酸。同源序列分析显示,水牛HSD17B4基因编码序列与其他物种具有较高的同源性,证明成功克隆水牛HSD17B4,为进一步阐明该基因在水牛上的作用机制奠定基础。
- 马小娅庞春英邓廷贤梁莎莎陆杏蓉段安琴梁贤威
- 关键词：水牛
- 水牛STAT1基因多态与产奶性状关联分析被引量：2
- 2016年
- 本研究旨在检测水牛STAT1基因的单核苷酸多态性(SNP),探究中国水牛多态性位点的群体遗传特征,寻找与产奶性状相关的分子标记。采用PCR和测序法筛选水牛STAT1基因序列的SNPs,以357头水牛为研究对象,采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法(MALDI-TOF-MS)对群体进行了基因型检测,运用SAS(9.3)软件一般线性模型(GLM)对STAT1基因型与产奶性状的关联程度进行统计分析。结果表明,在水牛STAT1基因中检测出3个突变位点,分别位于5′UTR(g.68G>A)、外显子10(g.986G>T)和3′UTR(g.2881C>A)。关联分析结果显示,水牛STAT1基因g.986G>T位点与305天产奶量和乳脂率显著关联(P<0.05)。Bonferroni t检验多重比较结果显示,基因型TT和GG个体的305天产奶量显著高于GT基因型(P<0.05),基因型TT个体的乳脂率显著高于GG和GT基因型(P<0.05),且305天的产奶量随着胎次的增加呈现上升趋势,直到第3或4胎次时达到最大值,表明胎次是影响水牛产奶量的重要环境因素之一。本研究表明,水牛STAT1基因的g.986G>T位点可能是影响其产奶性状的候选分子遗传标记,为今后建立中国水牛标记辅助选择育种研究奠定基础。
- 邓廷贤庞春英朱鹏段安琴陆杏蓉杨炳壮梁贤威
- 关键词：水牛产奶性状飞行时间质谱
- 杂交水牛不同生长阶段主要血液生理生化指标的测定
- 中国水牛数量为2275.95万头(FAO,2003年资料),仅次于印度和巴基斯坦,位居世界第三。在科技人员几十年的努力下,原先单一役用的水牛经杂交改良已向乳、肉、役多用途方向发展。从此,中国水牛的生产性能和养殖经济效益得...
- 杨炳壮梁贤威文秋燕邹彩霞覃广胜廖朝辉庞春英梁坤陈明棠潘玉红熊小荣
- 文献传递
- 水牛分子生物学技术研究新进展被引量：14
- 2014年
- 水牛是中国南方重要的经济畜种,被国际粮农组织誉为最具开发潜力和开发价值的家畜。新兴的分子生物学技术为之带来了新的机遇和挑战。近年来,水牛分子生物学技术的研究取得了重要突破,在水牛遗传育种中显示出巨大的优势和发展潜力。作者主要从分子遗传标记、动物转基因技术、基因芯片及高通量测序技术等方面介绍了分子生物学技术在水牛遗传育种中的作用,并对其应用前景进行讨论,为水牛分子生物学技术的进一步研究奠定基础,对促进水牛产业的快速发展具有重要意义。
- 邓廷贤庞春英王建杨炳壮张秀芳梁贤威
- 关键词：水牛分子标记转基因基因芯片高通量测序
- 成纤维细胞的不同处理对水牛亚种间核移植效果的影响被引量：2
- 2009年
- 本文探讨了成纤维细胞的不同处理对水牛亚种间核移植的影响。试验设置3个组:对照组、接触性抑制组及血清饥饿组。结果:对照组在融合率、分裂率上均显著低于血清饥饿组及接触性抑制组(63.0%vs 73.0%、77.0%,43.8%vs 49.9%、50.0%)(P<0.05)。但血清饥饿组和接触性抑制组之间的融合率、分裂率差别不显著(73.0%vs 77.0%,49.9%vs 50.0%)(P>0.05)。这3个处理组之间的囊胚率差异不显著(7.0%,7.6%,9.5%)(P>0.05)。以上表明:对成纤维细胞进行处理可以提高水牛亚种间核移植的效率。
- 李日聪杨春艳郑海英庞春英黄右军梁贤威
- 关键词：水牛成纤维细胞
- 水牛浮舰蛋白2基因克隆及序列分析被引量：2
- 2016年
- 试验旨在克隆水牛浮舰蛋白2(Flotillin 2,FLOT2)基因并对其进行生物信息学分析,为揭示该基因在水牛发育繁殖中的作用奠定基础。本研究通过PCR扩增获得了FLOT2基因全长并进行克隆测序,结合生物信息学分析方法,预测及分析其蛋白质结构。结果表明,水牛FLOT2基因编码区长1 287bp,编码428个氨基酸,3′UTR区长277bp。多重序列比较分析显示,水牛FLOT2基因核苷酸序列与牛、山羊、绵羊、小鼠、马、猫和人相应序列的相似性分别为98%、98%、97%、90%、93%、92%和92%,系统进化树分析结果表明,FLOT2基因在不同物种以及进化的过程中具有高度保守性。对FLOT2蛋白质的分析表明,该蛋白呈弱酸性,无信号肽,细胞亚定位于细胞质中,存在SPFH_flotillin和SPFH_hflk等结构域。microRNA预测结果表明,bta-miR-2438、bta-miR-2379和bta-miR-1777a可能是其3′UTR潜在靶标。研究结果为今后阐明FLOT2基因在水牛繁殖性能中的功能,尤其是在配子及胚胎发生过程中的作用及分子机制奠定了基础。
- 段安琴庞春英朱鹏邓廷贤陆杏蓉梁贤威
- 关键词：水牛克隆
- FADS2基因在奶牛乳腺细胞中的过表达和干扰研究被引量：3
- 2019年
- 为了研究脂肪酸脱氢酶2(fatty acid desaturases 2,FADS2)基因在奶牛乳腺细胞脂肪酸代谢中的作用,本研究在奶牛乳腺上皮细胞中对FADS2基因进行过表达和干扰,研究FADS2基因表达对脂肪酸合成相关基因的调控及对奶牛乳腺上皮细胞中甘油三酯含量的影响。针对FADS2基因的CDS序列设计siRNA和过表达载体pcDNA3.1-FADS2-EGFP,转染奶牛乳腺细胞检测FADS2基因过表达和干扰对脂肪酸代谢相关基因表达的影响及细胞中甘油三酯含量的变化。结果显示,试验成功获得过表达载体pcDNA3.1-FADS2-EGFP和干扰片段,转染细胞后具有良好的过表达和干扰效果。FADS2基因过表达后,1-酰基甘油磷酸酰基转移酶(AGPAT1)、固醇调节元件结合蛋白裂解激活蛋白(SCAP)、3-磷酸甘油转移酶(GPAM)、脂肪酸延长链5(ELOVL5)、乙酰辅酶A酰基转移酶1(ACAA1)、脂肪酸脱氢酶1(FADS1)、二酰基甘油转酰基酶1(DGAT1)和过氧化物酶体增殖激活受体α(PPARα)基因显著下调(P<0.05),脂滴蛋白2(PLIN2)基因极显著上调(P<0.01)。FADS2基因干扰过后可引起AGPAT1、GPAM、ELOVL5、ACAA1、PLIN2和FADS1基因显著上调(P<0.05),脂肪酸合成胰岛素诱导基因1(INSIG1)极显著上调(P<0.01),DGAT1和PPARα基因显著下调(P<0.05)。甘油三酯检测结果显示,FADS2基因过表达和干扰均可降低奶牛乳腺上皮细胞中甘油三酯的含量。综上所述,在奶牛乳腺上皮细胞中,FADS2基因能调控脂质合成相关基因的表达,对乳腺脂质合成具有调控作用。
- 马小娅庞春英邓廷贤段安琴陆杏蓉梁莎莎梁贤威
- 关键词：过表达
- 水牛溶血磷脂酸受体3基因的克隆及生物信息学分析被引量：1
- 2018年
- 本试验旨在进行水牛溶血磷脂酸受体3(lysophosphatidic acid receptor 3,LPAR3)基因的克隆及生物信息学分析。以水牛卵巢组织DNA为模板,参考GenBank中公布的水牛LPAR3基因(登录号:XM_006047539.1)序列设计引物,利用PCR扩增水牛LPAR3基因序列,并对其进行生物信息学分析。结果显示,水牛LPAR3基因全序列为1 552bp,包含1个1 062bp的CDS序列,编码353个氨基酸。同源性对比结果表明,水牛LPAR3基因编码的氨基酸序列与美洲野牛、黄牛、绵羊、野猪、马、果蝠、白眉猴同源性分别为99.4%、98.9%、98.0%、88.6%、90.0%、90.3%和91.2%,表明LPAR3基因在不同物种间具有较高的保守性。LPAR3蛋白分子式为C1853H2878N476O486S31,分子质量为40.59ku,理论等电点(pI)为9.52,不稳定系数为47.05,平均亲水性为0.324,属于碱性不稳定疏水蛋白质;该蛋白质存在7个跨膜结构且无信号肽,属于非分泌蛋白;二级结构分析表明LPAR3以α-螺旋、无规则卷曲和延伸链为主,其中α-螺旋占48.16%,无规则卷曲占41.36%,延伸链占10.48%,属于全α类蛋白质,与三级结构预测结果一致;亚细胞定位分析发现,LPAR3蛋白分布在等离子体膜(56.5%)、内质网(26.1%)、空泡(8.7%)、高尔基体(4.3%)和细胞核(4.3%)中,推测可能在运输和结合及嘌呤和嘧啶等方面发挥转运蛋白和信号转导等作用。本试验结果可为今后深入探讨LPAR3基因功能奠定基础。
- 庞春英梁莎莎马小娅邓廷贤陆杏蓉段安琴黄韵琪梁贤威
- 关键词：水牛溶血磷脂酸受体3基因克隆生物信息学
- 水牛分离精子与不同来源卵母细胞体外受精的效果研究被引量：2
- 2008年
- 本研究的目的是探讨水牛分离精子与不同来源(活体采卵或屠宰场卵巢采卵)卵母细胞体外受精的效果.活体采卵是选用20头空怀河流型母水牛(其中摩拉母牛12头,尼里-拉菲母水牛8头)每间隔3 d采卵1次,连续采卵5～6周.活体采集卵母细胞;屠宰场卵巢采卵是收集屠宰场水牛卵巢,用10 mL注射器连接18 G针头吸取水牛卵巢上可视的卵泡来收集卵母细胞.将收集的AB级水牛卵母细胞在相同的条件下进行体外成熟、然后用分离或未分离精子进行体外受精以及体外培养至囊胚.结果发现:活体采卵组和屠宰场收集的水牛卵母细胞组用分离精子受精分裂率和囊胚率没有差异(P＞0.05);分离精子和未分离精子的体外受精分裂率和囊胚率也没有差异(P＞0.05).由此说明,水牛分离精子可以用于体外生产性控胚胎.
- 庞春英陆阳清陈明棠覃广胜张秀芳黄芬香杨春艳李日聪梁贤威卢克焕
- 关键词：水牛分离精子体外受精
- 不同冷冻方法对水牛体外生产胚胎冷冻效果的研究
- 2011年
- 本研究采用不同来源的体外生产胚胎(屠宰场卵巢IVF胚胎,OPU-IVF胚胎,SCNT胚胎),系统研究了不同冷冻方法对水牛体外生产胚胎冷冻效果的影响,以完善水牛体外生产胚胎冷冻方法,进一步提高胚胎冷冻效果。试验选用6～7日龄囊胚分别用不同的冷冻液和不同冷冻方法进行胚胎冷冻。玻璃化冷冻液分别为40%EG、25%EG+25%DMSO和20%EG+20%DMSO+0.5 mol/L蔗糖;程序化冷冻液分别为10%甘油和0.05 mol/L海藻糖+1.8 mol/L EG+0.4%BSA。结果表明:(1)在玻璃化冷冻中,无论何种胚胎不同冷冻液的冷冻效果有明显的差异,但均以20%EG+20%DMSO+0.5 mol/L蔗糖作为冷冻液的冷冻效果最好,并且高于程序化冷冻的存活率;而对于程序化冷冻,用10%甘油作为冷冻液,屠宰场卵巢IVF胚胎的冷冻后存活率略高于用0.05 mol/L海藻糖+1.8 mol/L EG+0.4%BSA的冷冻后存活率,但差异不显著(P>0.05)。(2)VF胚胎利用程序化冷冻胚胎解冻后,在0～24 h内有76.5%胚胎复活,高于玻璃化冷冻的复苏率(48.9%)(P<0.05);而与此相反,在24～48 h内,玻璃化冷冻胚胎的复苏率(42.6%)则高于程序化冷冻(23.5%)(P<0.05)。综上所述,各种来源的水牛体外生产胚胎均可进行冷冻保存,应用玻璃化冷冻的效果好于程序化冷冻,且以20%EG+20%DMSO+0.5 mol/L蔗糖作为冷冻液进行玻璃化冷冻效果最好,但程序化冷冻后的胚胎复苏速度明显快于玻璃化冷冻的速度。
- 庞春英杨春艳杨炳壮李日聪黄健黄芬香郑海英覃广胜张秀芳梁贤威
- 关键词：水牛体外生产玻璃化冷冻
