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张仁礼: 作品数：35 被引量：170H指数：8; 供职机构：广东省人民医院更多>>; 发文基金：广东省医学科学技术研究基金国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>; 相关领域：医药卫生生物学自动化与计算机技术更多>>

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胰岛素样生长因子1基因治疗提高老龄大鼠eNOS mRNA和蛋白的表达被引量：3: 2012年; 目的探讨阴茎海绵体内注射胰岛素样生长因子1（ IGF-1）基因能否提高老年性大鼠阴茎勃起功能及其对表皮型一氧化氮合酶（eNOS）表达的影响.方法实验分为3组,老年组：24月龄SD雄性大鼠20只,按随机数字表法随机又分为2组：PBS对照组和100μg IGF-1质粒注射组,每组10只；青年对照组：4月龄SD雄性大鼠10只.注射后4周行电刺激检测大鼠阴茎海绵体内压（ICP）和平均动脉压（MAP）,分析比较IGF-1基因治疗的效果；RT-PCR和Western印迹检测阴茎海绵体组织中eNOS基因mRNA和蛋白的表达.结果 IGF-1基因治疗后4周,电刺激发现老年PBS对照组ICP/MAP和总ICP明显均低于青年对照组（均P＜0.05）；IGF-1质粒注射组ICP/MAP和总ICP均明显高于PBS对照组（均P＜0.05）,和青年对照组相仿.IGF-1质粒注射组eNOS mRNA和蛋白表达均明显高于PBS对照组（0.62±0.16比0.25±0.08,0.71±0.19比0.27 ±0.09,均P＜0.05）.结论 IGF-1基因治疗能够改善老龄大鼠的勃起功能,同时提高eNOS的含量.; 蒲小勇闻安民郑祥光刘久敏周香雪徐战平王怀鹏张仁礼肖恒军司徒杰; 关键词：胰岛素样生长因子I 基因疗法老龄

短发夹RNA靶向沉默大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞IGFBP-3基因的研究: 目的筛选靶向抑制大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞(CCSMC)中胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGFBP-3)基因表达最有效的短发夹RNA(shRNA),为基因沉默IGFBP-3治疗大鼠勃起功能障碍提供依据。方法构建4对靶向IG...; 蒲小勇闻安民张仁礼李东; 文献传递

抗苗勒管激素评价子宫肌瘤剔除术后卵巢功能的改变被引量：8: 2014年; 目的：通过检测新的卵巢功能指标抗苗勒管激素（AMH）,评估子宫肌瘤剔除术对于年轻患者卵巢功能的影响。方法：前瞻性队列观察研究,选取36~45岁因子宫肌瘤行子宫肌瘤剔除术患者35例,于术前,术后2 d,术后3个月检测血清AMH、促卵泡生成素（FSH）、促黄体生成激素（LH）水平,选取同年龄组未行手术的35例子宫肌瘤患者为对照组,比较两组间及各时间点各激素水平的变化差异。结果：（1）子宫肌瘤剔除组患者术前、术后2 d、术后3个月AMH水平分别为（1.54±0.95）ng/mL,（1.18±0.77）ng/mL,（1.50±0.58）ng/mL,术后2 d AMH水平较术前显著降低（P〈0.05）,术后3个月AMH水平逐步回升,与术前相比差异无显著性（P〉0.05）。（2）子宫肌瘤切除组与对照组各时间点AMH水平比较,差异有差异性（P〈0.05）,而FSH、LH水平变化差异无显著性（P〉0.05）。结论：AMH评估卵巢功能的改变优于FSH。子宫肌瘤剔除术短期影响卵巢功能,但3个月后恢复,手术与术中出血可能会暂时性影响AMH水平下降。; 王海英梁洁玲张仁礼毕燕玲罗怀钦蒋洲梅闻安民; 关键词：抗苗勒管激素子宫肌瘤剔除术卵巢功能

极体活检在植入前遗传学诊断中的应用被引量：1: 2013年; 植入前遗传学诊断（preimplantation genetic diagnosis,PGD）最早于1965年由Edwards提出,于1968年与Gardner二人付诸于实践。后人在此基础上不断开拓发展,于1989年PGD首次应用于一对夫妇,他们的孩子可能遗传有父母性染色体连锁疾病。目前在全世界范围内,已有18个国家、50多个PGD中心在从事相应的研究,共进行了5 000多个PGD周期,获得将近1 000例临床妊娠,; 张丽丽张仁礼; 关键词：植入前遗传学诊断 DIAGNOSIS 活检极体 PGD 性染色体

人羊膜诱导胚胎干细胞向表皮样干细胞的定向分化被引量：34: 2001年; 【目的】探索体外定向诱导胚胎干细胞 (ES细胞 )分化为表皮样干细胞的条件 ,为研究其分化机理及寻找新的皮肤组织工程种子细胞奠定基础。【方法】将小鼠胚胎干细胞单独 (对照组 )或与人羊膜共培养 4～ 5d ,观察其形态分化 ,分别用β1整合素免疫组化和流式细胞仪检测胚胎干细胞向表皮样干细胞的分化。【结果】与人羊膜共培养 4～ 5d后 ,ES细胞分化为表皮细胞样的单层细胞 ,细胞排列紧密 ,呈多边形 ,免疫组织化学染色后 ,多数细胞呈现 β1整合素阳性 ,对照组大量细胞死亡 ,未见 β1整合素阳性细胞 ;流式细胞仪检测结果显示 :实验组和对照组β1整合素阳性细胞分别为 81 4%和 8 4% ,两者比较差异显著 ,Z检验P <0 0 1。; 张仁礼李海标黄冰陈系古李树浓; 关键词：胚胎干细胞羊膜 CD29 定向分化

胚胎干细胞分化为表皮样细胞的基因表达谱差异被引量：3: 2012年; 【目的】用全基因表达谱芯片技术筛选小鼠胚胎干细胞(ESC)定向分化为表皮样细胞(ELC)的差异表达的基因并对其进行分析,以进一步阐明ESC分化为ELC的分子机制。【方法】利用人羊膜建立体外诱导体系,将小鼠ESC诱导定向分化为ELC,做3次生物学重复,分别取未分化的ESC和诱导分化的ELC提取总RNA进行扩增、Cy3标记,与NimbleGen135k小鼠全基因表达谱芯片(含44170个基因)杂交,荧光扫描,筛选出差异表达基因,并进行GO分析和pathway分析,用实时定量PCR对结果进行验证。【结果】芯片筛选结果显示,分化后的ELC与ESC间的差异表达的基因多达4856个(Cut off:2)。基因本体(GO)分析显示与生物学过程相关的差异表达基因最多的是细胞过程,1931个;与亚细胞组分(CC)相关的差基因中最多的是细胞和细胞组分相关基因,2391个;与分子功能相关的差异基因中最多是的结合功能(binding)基因,1869个。Pathway分析显示,与DNA复制通路相关的差异基因有23个;与蛋白酶体通路相关的24个;剪接体通路相关有47个;细胞周期相关的有44个。【结论】ESC体外诱导定向分化为ELC过程中,基因表达谱发生了巨大的变化,提示细胞分化是一个众多基因参与的复杂的生物学过程,这些基因在分化过程所起的作用和作用机制尚需大量的实验研究阐明。; 张仁礼刘彩霞孟锦绣闻安民张丽丽韩冬; 关键词：胚胎干细胞

胚胎干细胞分化为表皮样细胞基因启动子区差异甲基化的研究被引量：2: 2013年; 目的:用全基因组甲基化芯片探讨可能参与小鼠胚胎干细胞(ESCs)分化为表皮样细胞(ELCs)的基因DNA甲基化调控机制。方法:利用人羊膜建立体外诱导体系,将小鼠ESCs诱导定向分化为ELCs,分别取未分化的ESCs和诱导分化后的ELCs进行芯片分析,利用甲基化免疫共沉淀技术将每组染色质DNA的甲基化片段共沉淀下来,和本底对照(input)分别标记Cy3和Cy5荧光,一同上样于Roche NimbleGen高密度(2.1M,芯片覆盖22 425个启动子)甲基化芯片,启动子区采用UCSC数据库进行注释,启动子覆盖转录起始位点上游8 200 bp、下游3 000 bp,通过对这些启动子区甲基化谱的分析,筛选出甲基化调控可能与ESCs向ELCs定向分化相关的基因。结果:小鼠ESCs和ELCs两组细胞在基因组水平上有17 500个启动子存在甲基化,其中有3 435个启动子发生甲基化差异变化,高CpG岛的启动子有894个发生差异甲基化,中度CpG岛的启动子有974个发生差异甲基化,低CpG岛的启动子有1 567个发生差异甲基化。结论:在ESCs向ELCs定向分化的过程中,众多的基因启动子区发生了甲基化程度的变化,说明细胞分化是一个复杂的表观遗传学事件。这些基因启动子的差异甲基化在ESCs向ELCs定向分化过程中所起的作用及其机制尚有待进一步的功能学研究阐明。; 张仁礼刘彩霞孟锦绣张丽丽韩冬蔡佳杰闻安民; 关键词：DNA甲基化胚胎干细胞启动子

靶向SMPD1基因的RNA干扰对人成纤维细胞凋亡的保护作用被引量：3: 2007年; 【目的】以人包皮成纤维细胞(HFF)为模型,通过系统比较针对不同靶点的小干扰RNA(siRNA)对酸性鞘磷脂酶1(SMPD1)基因的沉默效果,筛选获得最有效的小干扰RNA序列,同时观察沉默SMPD1对细胞凋亡的保护作用。【方法】设计合成三对靶向SMPD1基因的小干扰RNA作为实验组,同时设立阴性对照组和脂质体组(lipofectamine 2000),瞬时转染原代培养的HFF细胞,采用荧光定量RT-PCR法及Western blot测定SMPD1表达抑制情况,并用化疗药物丝裂霉素诱导细胞凋亡,MTT法检测siRNA转染对细胞的保护作用。【结果】小干扰RNA1,2,3对SMPD1基因mRNA的抑制效率分别为96.3%,39%,63.2%,以siRNA1最高,最佳浓度为50nmol/L,最佳作用时间为48h。SMPD1蛋白在48h出现沉默效果,96h开始恢复。50nmol/L的siRNA1可以有效抑制化疗药物丝裂霉素引起的细胞凋亡,细胞存活率为73.8%,与对照组存活率65.4%比较差异具有统计学意义。【结论】三对siRNA均具有一定的靶基因沉默效果,其中siRNA1效果最佳,沉默效率达到96.3%;靶向SMPD1基因的siRNA能有效抑制人成纤维细胞的凋亡。; 高军周灿权张仁礼马芸; 关键词：SIRNA 成纤维细胞凋亡

男性精液中阴道加德纳菌感染对精液质量参数影响的初步探讨被引量：2: 2016年; 目的探讨男性精液中阴道加德纳菌（Gardnerella vaginalis,Gv）感染对男性精液质量的影响,探索男性不育症的病因.方法收集217例男性精液标本,应用巢式聚合酶链反应（nPCR）技术进行Gv检测,同时行精液常规分析检测、抗精子抗体（混合抗球蛋白反应,MAR法）检测.结果 217例标本中,17例检测到Gv阳性（7.8％）,Gv阳性组和阴性组在精液量、精液粘度方面无明显差别（P＞0.05）,而两组在精子密度、精子活率、PR、精子畸形率、精液pH值、精液白细胞症检出率、MAR等精液质量参数方面存在明显差别,差异有统计学意义（P＜0.01）.结论男性精液中Gv感染可能是影响精液质量,可能是导致男性不育的原因之一.; 黄跃深蒲小勇闻安民张仁礼梁洁玲韩冬李耀雄刘洁; 关键词：精液细菌感染

胚胎干细胞向表皮样干细胞分化体外条件的研究被引量：15: 2001年; 目的　探索体外诱导胚胎干细胞分化为表皮样干细胞的最佳条件 ,为研究其分化的调控机理及寻找新的皮肤组织工程种子细胞奠定基础。方法　将小鼠胚胎干细胞与人羊膜共培养 ,以不同的羊膜铺布方式 ,分 4个实验组 :(1)羊膜上皮面向上铺布全孔底 ,(2 )羊膜基底面向上铺放全孔底 ,(3)羊膜上皮面向上铺布半孔底 ,(4)羊膜基底面向上铺布半孔底 ,以未加羊膜为对照组 ,倒置显微镜下观察细胞的生长和形态分化 ,用抗 β1整合素单克隆抗体免疫组化检测胚胎干细胞向表皮样干细胞的分化。结果　培养 4～ 5d后 ,实验组 (3)中的ES细胞分化为表皮样干细胞 ,细胞呈多边形 ,体积增大 ,排列紧密 ,形成大面积细胞单层 ,而其他各实验组 ,ES细胞虽可分化为表皮样细胞 ,但呈集落生长 ,不形成细胞单层 ;对照组大量细胞死亡 ,形态各异。各实验组的细胞绝大多数呈现 β1整合素阳性 ,而对照组未见 β1整合素阳性细胞。结论　与羊膜共培养可诱导胚胎干细胞分化为表皮样干细胞。; 张仁礼李海标; 关键词：胚胎干细胞表皮干细胞

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