张宇
- 作品数:58 被引量:108H指数:3
- 供职机构:华南农业大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家高技术研究发展计划教育部科学技术研究重点项目更多>>
- 相关领域:理学自动化与计算机技术机械工程文化科学更多>>
- 酵母杂交系统在CRISPR/Cas9基因编辑系统脱靶率研究中的应用被引量:2
- 2021年
- 目的:为提高CRISPR/Cas9(clustered regularly interspaced short palindromic repeats/CRISPRassociated protein 9)靶向性奠定基础,同时证明酵母杂交系统在研究CRISPR/Cas9脱靶效应中的应用价值。方法:以实验室前期构建成功的activase基因编辑水稻株为研究对象,先采用T7核酸内切酶Ⅰ法初步预测30株基因编辑水稻株的脱靶率。随后以酵母杂交系统进一步预测脱靶率以及研究sgRNA结构对脱靶率的影响。首先,将activase靶向基因的标准sgRNA(standard sgRNA)和短sgRNA(truncated sgRNA)分别克隆至CRISPR/Cas9系统表达载体pDW3769中,构建对应的重组载体pHZ2和pHZ4,转化至YPH499酵母单倍体形成重组酵母YpHZ2和YpHZ4;其次,根据脱靶位点预测选择7组脱靶序列A、B、C、D、E、F、G以及靶向序列,分别克隆至包含报告基因m Cherry的高拷贝载体p DW3133和低拷贝载体p DW3134,构建相应的高拷贝重组载体pHZ5、pHZ7、pHZ9、pHZ11、pHZ13、pHZ15、pHZ17和pHZ19,以及对应的低拷贝重组载体pHZ6、pHZ8、pHZ10、pHZ12、pHZ14、pHZ16、pHZ18和pHZ20,转化至YPH500酵母单倍体,构建重组酵母YpHZ5-20。随后,重组酵母YpHZ2和YpHZ4与重组酵母YpHZ5-20分别杂交,挑取双倍体酵母菌落,在不同的时间段下检测荧光数值,根据荧光值定量预测脱靶率。结果:酵母培养144~192 h时荧光最为显著,脱靶序列sgRNA与靶向基因sgRNA同源性越高,越易造成脱靶,但短sgRNA较标准sgRNA脱靶率低。根据水稻植株的脱靶检测显示脱靶率约20%,基于酵母杂交的检测结果显示脱靶率为20%~28%。结论:酵母细胞进入稳定期时荧光值最为显著,且与载体的拷贝数量成正比。sgRNA序列以及长短结构可影响CRISPR/Cas9的基因靶向性。两种方法的脱靶率预测结果相当,表明酵母杂交系统在评价CRISPR/Cas9系统的脱靶率以及研究脱靶影响因素中具有良好的应用价值。
- 毕博张宇赵慧
- 关键词:酵母双杂交
- 具有振动旋转采摘头的梳式采摘机
- 本发明公开了一种具有振动旋转采摘头的梳式采摘机,包括振动旋转采摘头、以及车体、立柱和连接臂,立柱固定在车体上,所述振动旋转采摘头通过连接臂固定在立柱上;振动旋转采摘头包括外套筒、内固定连杆、内旋转连杆、收纳箱;内固定连杆...
- 张宇何晋鹏黄海亮胡晓阳金鑫朱慧乔丽君王珂
- 文献传递
- 基于相衬解调的实时光声成像系统被引量:1
- 2016年
- 超声信号能引起SU-8材料的厚度变化,将一薄层厚度均匀的SU-8膜镀在盖玻片上,再镀一层均匀金属银制成光滑反射面,制作了一个光声传感器,并借助此传感器计了一套实时、动态的光声成像系统。该光声成像系统中,吸收性样品的光声信号引起光声探测器上SU-8材料厚度变化,当一束激光经过探测器反射面时,该厚度变化将会调制反射光的相位,系统借助光学相衬滤波法解调该相移,得到SU-8的厚度变化量,获取与样品光声信号的分布对应的光强分布,从而获得样品的动态实时光声像。对光声信号的产生(光致超声效应)、光声信号的调制、光声信号的解调(传感器的制作)进行了论述,并对SU-8光声探测器对光声信号的感应特性做了初步实验研究,结果验证了SU-8能够探测光声信号。
- 张宇薛月菊贾金亮金晓勇刘洪山谢家兴
- 关键词:成像系统光声成像
- 一种有机/无机联合抗菌组合物及其制备方法与应用
- 本发明属于医用材料技术领域,尤其涉及一种有机/无机联合抗菌组合物及其制备方法与应用。该有机/无机联合抗菌组合物包含纳米铜、替加环素和聚多巴胺。其中,无机抗菌剂纳米铜与有机抗菌剂替加环素复配后经聚多巴胺包裹制成产品,经实验...
- 蒋刚彪吴夏晓张宇周初松刘永林胡甜李曾林陈文照
- 文献传递
- 数据的分布式存储方法及装置
- 本申请公开了一种数据的分布式存储方法及装置。其中,该方法包括:主服务器获取客户端发送的更新数据,并将包括更新数据的第一消息发送至各个从服务器,通过各个从服务器中的目标从服务器对更新数据进行存储,其中,目标从服务器为存储更...
- 张宇郑灵黄岩黄泽众邢光玮
- 一种鸟类新鲜粪便的快速采集方法
- 本发明公开了一种鸟类新鲜粪便的快速采集方法,其包括如下步骤:S1、抓取鸟类;S2、用手将鸟类翅膀和尾羽捏在一起,并上抬,以露出肛门部分;S3、采用消毒试剂擦拭鸟类肛门处,以进行消毒;以及S4、消毒结束后,取无菌棉拭子伸入...
- 米见对张宇孙澜陈靖源廖新俤
- 文献传递
- 基于SIMP插值模型的棋盘格现象滤波控制算法研究被引量:6
- 2012年
- 结合对拓扑优化中的数值不稳定现象的分析,以SIMP变密度法函数模型为基础,提出一种以结构最小柔度为目标函数、位移为约束的滤波思想并进行了灵敏度分析,推导了具体的数学模型和计算方法。应用APDL参数化编程语言进行了数值模拟分析,算例结果证明了所提出方法对于控制棋盘格和网格依赖现象的有效性。
- 张宇罗陆锋
- 关键词:变密度法
- 一种畜禽养殖用复配垫料及其制备方法和畜禽异位发酵床
- 本发明公开了一种畜禽养殖用复配垫料及其制备方法和畜禽异位发酵床,每立方米所述复配垫料包括:锯末0.1‑0.5m<Sup>3</Sup>、稻壳0.1‑0.5m<Sup>3</Sup>、甘蔗渣0.2‑1.0m<Sup>3</...
- 米见对张宇廖新俤蓝天朱靖雄
- 文献传递
- Mn掺ZnO基稀磁半导体的制备与结构研究
- 稀磁半导体是国际上研究的热点之一,锰掺氧化锌基稀磁半导体更是稀磁半导体中最引人瞩目的研究方向之一。尽管目前这一领域取得了不少进展,但仍有许多问题亟待解决。本文采用磁控溅射法制备了氧化锌及锰掺杂氧化锌薄膜,通过控制工作气压...
- 张宇
- 关键词:稀磁半导体磁控溅射
- 一种免定标檀香树植株缺苗定位方法
- 本发明公开了一种免定标檀香树植株缺苗定位方法,包括:首先,通过预训练的检测模型检测出待缺苗定位的遥感图像中檀香树目标,然后,根据已检测出的檀香树目标的像素坐标确定列基准位置,划分列区域;再通过线性回归拟合,得到每个列区域...
- 张宇牛家俊薛月菊徐浩然张家祥