张玥
- 作品数：27 被引量：41H指数：5
- 供职机构：天津医科大学第二医院更多>>
- 发文基金：天津市科技发展战略研究计划项目天津市科技计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程更多>>
- 靶向沉默核干因子对前列腺癌PC-3细胞全基因组表达谱变化的影响被引量：2
- 2009年
- 目的探讨核干因子（NS）基因在前列腺癌恶性增殖中的作用机制。方法采用表达谱基因芯片技术，分析前列腺癌PC-3细胞NS基因表达下调后全基因组表达谱的变化，筛选与NS相互作用的差异表达基因及信号通路。采用实时荧光定量聚合酶链反应对重要的差异表达基因进行验证。结果共筛选出219个差异表达的基因，这些基因涉及到细胞周期、细胞增殖、信号转导、细胞凋亡和细胞分化等多个方面。NS基因表达下调后主要引起周期素依赖激酶4抑制因子（INK4）家族基因（p15、p16和p18）的上调，以及cyclinD1和HDAC1基因的下调，其主要作用点位于CDK4／6-cyclin D和pRb—E2F1复合体上。结论在前列腺癌PC-3细胞中，NS基因可能主要通过抑制p15、p16和p18等INK4家族的肿瘤抑制基因的表达，从而促进肿瘤的发生和发展；NS基因是细胞周期G1／S期检查点的重要调控因子。
- 刘冉录徐勇张志宏王萌孙建涛张玥李胜芝
- 关键词：核干因子前列腺肿瘤
- 转人α1,2岩藻糖苷转移酶基因猪动脉内皮细胞的活化抑制实验
- 2008年
- 目的探讨人α1,2岩藻糖苷转移酶(HT)基因转移抑制猪动脉内皮细胞(PAEC)Ⅱ型活化的作用和机制。方法用不同条件刺激转人HT基因和正常的PAEC,在不同时段分别采用细胞酶联免疫吸附测定方法检测细胞间黏附分子(ICAM)-1在细胞表面的表达。采用免疫细胞化学方法检测细胞接受刺激12h后2种PAEC核因子(NF)-κB阳性细胞百分数。结果3种刺激均可以活化PAEC,使其表面ICAM-1的表达逐步升高,并在12h左右达到峰值。实验组和对照组细胞在接受刺激4h后ICAM-1的表达差异有统计学意义(P值均<0.05),实验组细胞ICAM-1的表达量均低于对照组,细胞的活化受到抑制。在不同条件下刺激12h后2种细胞的NF-κB阳性细胞百分数差异有统计学意义(P值均<0.05),表达人HT的PAECNF-κB阳性细胞百分数比正常猪动脉内皮细胞低。结论表达人HT的PAECⅡ型活化受到抑制,人HT基因转移可能一定程度抑制异种移植急性血管排斥反应(AVR),并且可能通过NF-κB发挥作用,PAECⅡ型活化的条件是多样的。
- 马志方王广有刘秉乾李胜芝张玥马腾骧
- 关键词：基因转移技术内皮细胞
- 靶向沉默核干因子对前列腺癌PC-3细胞增殖能力的影响被引量：5
- 2009年
- 目的:检测前列腺癌PC-3、LNCaP及DU145细胞中核干因子(Nucleostemin,NS)基因的表达,研究NS基因沉默后对PC-3细胞增殖能力的影响。方法:采用免疫细胞化学法及逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)分别检测NS蛋白及mRNA在3种前列腺癌细胞中的表达。用NS特异性小发夹RNA表达质粒转染PC-3细胞,分别用RT-PCR及Western印迹方法检测转染后细胞(简称NS-shRNA-PC-3)中NSmRNA及蛋白的变化。比较NS基因沉默前后PC-3细胞体外、裸鼠体内增殖能力及凋亡情况的变化。结果:3种细胞中均显示NS基因高表达。转染后NS-shRNA-PC-3细胞中NS表达显著降低,细胞增殖速度减慢,G0/G1期细胞百分率显著升高,早期凋亡细胞增多。体内致瘤实验显示,NS基因沉默后,PC-3细胞在裸鼠体内增殖能力显著降低。结论:NS在前列腺癌细胞系中呈高表达,RNA干扰沉默NS基因后PC-3细胞增殖能力显著降低,凋亡细胞增多。
- 刘冉录徐勇张志宏王萌孙建涛张玥李胜芝
- 关键词：核干因子前列腺癌PC-3RNA干扰
- 男性不育患者精浆弹性蛋白酶水平与精液质量关系探讨
- 杨永姣刘莉张玥王尚任刘晓强
- 人类α-1,2-岩藻糖苷转移酶在猪血管内皮细胞的表达及作用
- 2005年
- 目的:探讨人类α-1,2-岩藻糖苷转移酶(HT)基因在猪血管内皮细胞(PIECs)的表达及意义。方法:将人HT基因重组质粒通过脂质体转染进猪血管内皮细胞,经G418筛选(500mg/L),用流式细胞仪检测HT的表达,表达阳性细胞与人血清共同孵育检测细胞的生存率。结果:流式细胞仪检测结果显示,未经转染HT基因的PIECS的H抗原表达率是13.80%,平均荧光强度很低是32.39,α-Gal表达率是99.98%,平均荧光强度是1347.09;转HT基因的PIECS其H抗原表达率是40.17%B平均荧光强度是143.66,α-Gal表达率是41.15%B平均荧光强度是158.72。转HT基因的细胞在人血清的作用下生存率明显高于未转染的细胞。结论:转染HT基因的PIECs明显提高了H抗原的表达,同时降低了α-Gal的表达,为转基因动物实验探讨克服异种移植超急性排斥反应(HAR)提供理论依据。
- 李胜芝马志方刘秉乾张玥王广有马腾骧
- 关键词：转基因异种抗原
- 制备转基因哺乳动物的PAMAM－D介导的精子载体法
- 一种培育转基因哺乳动物的PAMAM－D介导的精子载体法，包括以下步骤：外源基因酶切呈末端粘性的线性构型，针对不同精子确定其用量范围；在合成代数大于G5及其与外源DNA电荷比2～50∶1的范围内对PAMAM－D进行筛选，以...
- 王广有杨惠祥乔宝民刘春雨李胜芝张玥马腾骧
- 文献传递
- 人DAF和CD59基因转移及其表达的研究
- 王广有张志宏张泽李胜芝姚旭东马腾骧张玥魏文杰张龄慧
- 该课题采用现代分子生物学、基因工程、细胞工程及免疫检测等现代技术，建成了hDAF、hCD59及其双基因联合转基因鼠。结果表明，将CRPs基因表达限定在血管内皮细胞是可行策略，以目的基因组中第一个内含子或部分片段作为增强子...
- 关键词：
- 关键词：DAFCD59
- 异种移植模型转人a1,2岩藻糖基转移酶基因小鼠显微注射DNA片段的制备被引量：2
- 2004年
- 目的制备转人琢1,2岩藻糖基转移酶(HT)基因小鼠显微注射DNA片段。方法引物两端设计酶切识别位点,聚合酶链反应(PCR)扩增HTcDNA全长序列,两端含有EcoRⅠ和BamHⅠ酶切识序列;回收HTcDNA片段并与PMD18-T载体连接,EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切纯化质粒鉴定;EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切pMD18-HTcDNA重组质粒和pCMV-MCS质粒,回收HTcDNA片段和pCMV-MCS质粒片段,进而连接,转化感受态细菌,纯化质粒对其进行酶切、PCR和测序鉴定;PvuⅠ和NotⅠ依次单酶切重组质粒pCMV-MCS-HTcDNA,回收大小约2.85kb片段,溶于适量显微注射用缓冲液。结果成功构建了重组质粒pCMV-MCS-HTcDNA,酶切回收了2.85kb的显微注射DNA片段。结论通过基因工程技术可以获得转人HT基因小鼠显微注射DNA片段,包含基因表达元件,可以用于显微注射法建立转人HT基因小鼠。
- 马志方刘秉乾张玥王广有马腾骧
- 关键词：小鼠CMV异种移植显微注射DNA片段T载体
- 转人α-1,2岩藻糖苷转移酶基因在异种移植中的研究被引量：6
- 2005年
- 目的研究转人α1,2岩藻糖苷转移酶基因(HT)在克服超急性排斥反应(HAR)中的作用。方法通过脂质体转染将人HT基因转入猪血管内皮细胞(PIECs)中,利用显微注射建立转HT基因小鼠模型,经流式细胞仪检测转HT基因阳性的PIECs表面抗原及小鼠外周血单核细胞表面抗原的变化。结果转HT基因的PIECs表面的α1,3半乳糖(αGal)比阴性对照下降了50%～60%,H抗原由无表达到44%～78%表达阳性;转HT基因小鼠白细胞表面的αGal比阴性对照下降了63%左右,H抗原阳性表达率为95%以上。结论HT基因在细胞和小鼠体内均有较好的表达,可减少异种抗原与异种抗体的反应,在克服超急性排斥反应中能发挥一定的作用。
- 李胜芝刘秉乾马志方张玥王广有马腾骧
- 关键词：异种移植急性排斥反应脂质体
- PTEN基因过表达在人EJ细胞系生物学行为及膀胱癌组织基因突变和蛋白表达研究
- 乔宝民孙光汤洋畅继武马腾骧隋志方高雅韩育植张淑敏张新李胜芝张玥
- 该研究用外源性野生型PTEN（WT-PTEN）、突变型PTEN（DN-PTEN）质粒对膀胱癌细胞系EJ进行转染，使PTEN基因过表达，达到基因治疗的目的。研究了PTEN基因在膀胱癌细胞的独特作用，揭示了PTEN能够调控肿...
- 关键词：
- 关键词：膀胱癌基因突变蛋白表达
