张红艳
- 作品数：4 被引量：10H指数：2
- 供职机构：郑州大学第一附属医院更多>>
- 发文基金：河南省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- pcDNA3.1-KISS-1真核表达载体的构建及其对EC1细胞转移的抑制作用被引量：1
- 2009年
- 目的克隆人食管组织KISS-1基因及构建真核表达载体pcDNA3.1-KISS-1,并观察其在食管癌EC1细胞中的表达及对EC1细胞侵袭及运动能力的影响。方法从人正常食管组织中提取总RNA,设计特异性引物,通过逆转录-聚合酶联链反应(RT-PCR)扩增KISS-1基因cDNA序列,并将其克隆到真核表达载体pcDNA3.1中,构建真核表达质粒pcDNA3.1-KISS-1,酶切鉴定及测序分析后用Lipofectamine脂质体将其转染到食管癌细胞,Westernblot法检测其蛋白在EC1细胞中的表达情况;应用细胞运动实验及重建基底膜侵袭实验分析KISS-1表达对EC1细胞运动和侵袭能力的影响。结果成功克隆了人KISS-1基因全长编码序列,构建了重组真核表达载体pcDNA3.1-KISS-1,脂质体转染后KISS-1基因在EC1细胞中成功表达;转基因组细胞的运动能力(174.6±14.24)和体外穿越重建基底膜的能力(90.44±12.83)明显低于转空质粒组(222.6±30.08,110.22±15.87)和对照组EC1细胞(234.40±14.72,124.78±18.14)(P均<0.05)。结论重组pcDNA3.1-KISS-1真核表达质粒构建成功,并且KISS-1对食管癌细胞的侵袭和运动能力具有抑制作用。
- 李娜李娜李珊珊张红艳轩小燕郑献召王丰
- 关键词：KISS-1基因真核表达载体食管癌细胞株
- KISS-1与基质金属蛋白酶9在食管鳞癌中的作用及相关性
- 2009年
- KISS-1是1996年克隆的一个新的肿瘤转移抑制基因，有文献报道其可能是通过降低基质金属蛋白酶-9（MMP-9）的表达，抑制细胞的浸润和转移。关于KISS-1与食管鳞癌浸润转移的关系，国内外鲜见相关报道。
- 李娜李珊珊张红艳轩小燕郑献召王丰闫爱华
- 关键词：基质金属蛋白酶9KISS-1食管鳞癌肿瘤转移抑制基因癌浸润转移抑制细胞
- 转染KISS-1对裸鼠食管鳞癌移植瘤生长的影响被引量：4
- 2010年
- 目的探讨KISS-1基因对裸鼠食管鳞癌移植瘤生长的影响。方法通过脂质体介导将pcD-NA3.1-KISS-1转染人食管鳞癌细胞EC-1,用Western blot法检测转染前、后KISS-1蛋白的表达。将单纯EC-1细胞、稳定转染空质粒的EC-1细胞、稳定转染pcDNA3.1-KISS-1的EC-1分别接种于BALB/c-nude裸鼠,构建裸鼠食管鳞癌移植瘤模型,观察肿瘤生长情况,测量肿瘤体积和瘤质量并绘制肿瘤生长曲线;免疫组织化学和半定量RT-PCR技术检测肿瘤组织中KISS-1蛋白和mRNA的表达。结果KISS-1基因转入食管鳞癌EC-1细胞,KISS-1蛋白的表达(1.143±0.218)较空质粒转染组(0.745±0.130)和对照组(0.855±0.184)明显增加(P<0.05),转染KISS-1基因组裸鼠较空质粒转染组和对照组肿瘤生长速度慢,体积(949.42±102.26)mm3与空质粒转染组(1339.82±72.23)mm3和对照组(1384.04±97.07)mm3相比明显减小(P<0.05),瘤体重量(0.498±0.654)g与空质粒转染组(0.638±0.066)g和对照组(0.676±0.108)g相比明显减轻(P<0.05)。结论通过基因转染的方法能表达有活性的KISS-1,并能抑制裸鼠食管癌移植瘤的生长。
- 李娜李娜李珊珊张红艳轩小燕郑献召王丰
- 关键词：KISS-1转染食管鳞癌裸鼠
- 食管鳞状细胞癌组织中KISS-1和MMP-9蛋白和mRNA的表达被引量：5
- 2009年
- 目的:探讨肿瘤转移抑制基因KISS-1及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)与食管鳞状细胞癌侵袭、转移的关系。方法:采用免疫组织化学SP法和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测50例食管鳞状细胞癌及50例正常食管组织中KISS-1及MMP-9蛋白和mRNA的表达情况,分析其与食管鳞状细胞癌患者各临床病理特征的关系及二者的相关性。结果:食管鳞状细胞癌组织中KISS-1蛋白的阳性表达率(61.0%)低于正常食管组织(82.0%)(χ2=5.877,P<0.05),并且其低表达与淋巴结转移密切相关(χ2=4.340,P<0.05)。食管鳞状细胞癌组织中MMP-9蛋白的阳性表达率(72.0%)高于正常食管组织(52.0%)(χ2=4.244,P<0.05),并且其高表达与肿瘤的浸润、淋巴结转移及分化程度均相关(P均<0.05)。食管鳞状细胞癌组织中KISS-1mRNA的阳性表达率(56.0%)及表达水平(0.992±0.090)均低于正常食管组织(88.0%,1.075±0.181)(P<0.05),并且其低表达也与淋巴结转移密切相关(P<0.05)。食管鳞状细胞癌组织中MMP-9mRNA的阳性表达率(72.0%)及表达水平(1.030±0.153)均高于正常食管组织(44.0%,0.943±0.085)(P<0.05),并且其高表达与肿瘤的深层浸润和淋巴结转移密切相关(P<0.05)。KISS-1与MMP-9蛋白和mRNA的表达均呈负相关(P<0.05)。结论:KISS-1的低表达和MMP-9的过表达可能与食管鳞状细胞癌的浸润、转移有关。二者有望成为判定食管鳞状细胞癌侵袭和转移能力的指标。
- 李娜李娜李珊珊张红艳轩小燕郑献召王丰
- 关键词：食管肿瘤鳞状细胞癌KISS-1基质金属蛋白酶-9
