张继华
- 作品数：50 被引量：126H指数：6
- 供职机构：河北医科大学第一医院更多>>
- 发文基金：河北省科学技术研究与发展计划项目河北省医学科学研究重点课题河北省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学自动化与计算机技术更多>>
- SIX1、TGF-β在人参皂甙Rg3抑制喉鳞癌淋巴转移中的机制研究
- 张继华王燕王来薛海涛祖金美陈春菊
- 实验通过临床病理组织、体外细胞两个方面，采用免疫组织化学、Western Blot、QPCR标记等检测方法，对人喉鳞癌中CSE1L、SIX1、TGF-β及E-cadherin蛋白及其mRNA的表达进行了探讨，通过RNA干...
- 关键词：
- 关键词：喉鳞癌淋巴转移基因表达
- 肿瘤坏死因子受体相关蛋白1基因沉默CD24^-CD44^+人喉鳞癌干细胞生物学特性的改变被引量：1
- 2017年
- 背景:肿瘤坏死因子受体相关蛋白1的异常表达与多种肿瘤的发生、发展密切相关。因此靶向抑制肿瘤坏死因子受体相关蛋白1的表达成为治疗或干预肿瘤生长的重要靶点。目的:观察肿瘤坏死因子受体相关蛋白1基因沉默对人喉鳞癌干细胞生长及凋亡的影响。方法:采用流式细胞技术特异性分离出CD24-CD44+喉鳞癌干细胞。设计及合成肿瘤坏死因子受体相关蛋白1的si RNA序列,脂质体TM2000转染CD24-CD44+喉鳞癌干细胞。流式细胞仪、MTT实验、细胞克隆形成实验、TUNEL凋亡实验评价沉默肿瘤坏死因子受体相关蛋白1基因对CD24-CD44+喉鳞癌干细胞增殖、凋亡的影响。结果与结论:(1)相关因子表达:相比于CD24+CD44-的人喉鳞癌细胞,CD24-CD44+人喉鳞癌干细胞内干性基因OCT4,SOX2,NANOG,肿瘤坏死因子受体相关蛋白1的表达均上调(P<0.05)。RNA干扰后,肿瘤坏死因子受体相关蛋白1的表达显著降低(P<0.05);(2)细胞周期及增殖:肿瘤坏死因子受体相关蛋白1基因沉默后人喉鳞癌干细胞的生长速度明显减慢(P<0.05),细胞停滞在G0/G1期,在S期细胞数减少(P<0.05),M期细胞无明显变化。肿瘤坏死因子受体相关蛋白1基因沉默后人喉鳞癌干细胞的增殖受到明显的抑制(P<0.05);(3)细胞克隆形成能力:相比于未经转染的人喉鳞癌干细胞,肿瘤坏死因子受体相关蛋白1基因沉默后人喉鳞癌干细胞克隆形成能力显著下调(P<0.05);(4)细胞凋亡:相比于未经转染的人喉鳞癌干细胞,肿瘤坏死因子受体相关蛋白1基因沉默后人喉鳞癌干细胞的凋亡基因BAD及BAX表达上调(P<0.05);(5)结果表明,特异性干扰肿瘤坏死因子受体相关蛋白1基因表达可抑制人喉鳞癌干细胞增殖并促进其凋亡。
- 苏静薛海涛田君海张继华
- 关键词：干细胞人喉鳞癌克隆形成
- 人参皂苷Rg3对低氧条件诱导的Hep-2细胞作用机制的初步研究被引量：5
- 2008年
- 目的:研究人参皂苷Rg3对低氧条件下人喉鳞癌细胞Hep-2中低氧诱导因子-1α(HIF-1α)及血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法:通过体外低氧培养Hep-2人喉鳞癌细胞株,同时设立阴性对照组和阳性对照组(顺铂)。人参皂苷Rg3作用24 h后,应用免疫细胞化学技术和流式细胞技术检测Hep-2细胞HIF-1α和VEGF蛋白表达的变化;应用RT-PCR技术检测HIF-1α和VEGF mRNA表达的变化。结果:在低氧条件下,Rg3组和顺铂对照组的Hep-2细胞中的HIF-1α和VEGF蛋白表达低于阴性对照组(P<0.05);Rg3组的HIF-1α和VEGF mRNA水平明显低于阴性对照组(P<0.05),顺铂组的HIF-1α和VEGF mRNA水平无明显变化。结论:低氧条件下,人参皂苷Rg3抑制Hep-2细胞中的HIF-1α和VEGF蛋白和mRNA的表达,这可能是Rg3抗肿瘤作用的机制之一。
- 宋冬梅张丽莎王宝山张继华
- 关键词：人参皂苷RG3低氧
- 低氧条件下γ射线对Hep-2细胞p53表达的影响被引量：2
- 2008年
- 目的模拟在体肿瘤细胞微环境,体外建立不同氧供状态下的细胞模型,探讨乏氧再氧合条件下^(60)Coγ射线照射对人喉鳞癌Hep-2细胞凋亡的影响。方法将体外培养的人喉鳞癌细胞分为3组:A组(常氧组)、B组(低氧组)、C组(低氧再氧合组)。流式细胞仪检测HIF-1α、p53蛋白表达及细胞凋亡;细胞爬片免疫组化检测各组细胞HIF-1α、p53蛋白表达;RT-PCR检测各组细胞HIF-1αmRNA。结果低氧能明显增加Hep-2细胞HIF-1α蛋白及其mRNA表达,同时p53蛋白表达相应上调。再氧合之后HIF-1α蛋白及其mRNA表达均呈现下调趋势,p53蛋白表达下调。同低氧(B组)相比再氧合之后(C组)Hep-2细胞凋亡率明显升高(P<0.05)。结论低氧降低^(60)Coγ射线照射对Hep-2细胞的诱凋亡作用,再氧合之后其诱凋亡作用明显提高。但在Hep-2细胞凋亡率明显升高的同时却并未出现p53蛋白表达的增强,提示低氧再氧合之后^(60)Coγ射线诱导Hep-2细胞凋亡作用可能是通过p53以外的其它促凋亡途径实现的。
- 王宝山刘艳梅宋冬梅张继华张丽莎
- 关键词：HEP-2细胞低氧诱导因子-1ΑP53
- 原代培养人喉鳞癌细胞中SIX1、TGF-β、VEGF-C表达的相关性被引量：5
- 2016年
- 目的探讨原代人喉鳞癌细胞中SIX1、TGF-β、VEGF-C表达相关性。方法取新鲜人喉鳞状细胞癌组织,进行原代细胞培养,利用基因干扰技术,制备SIX1、TGF-β及SIX1+TGF-β靶向si RNA转染至人喉鳞癌细胞,转染成功后将实验细胞分为5组:A组(未转染组)、B组(转染空载体组)、C组(SIX1-si RNA组)、D组(TGFβ-si RNA组)、E组(SIX1+TGF-β-si RNA组)。Western blot及细胞爬片免疫荧光检测各组细胞SIX1、TGF-β及VEGF-C蛋白的表达。RT-PCR检测各组细胞SIX1、TGF-β及VEGF-C m RNA的表达。结果 SIX1、TGF-β、VEGF-C蛋白及其m RNA的表达在未转染组、转染空载体组中差异无统计学意义。同未转染组相比,SIX1蛋白及其m RNA的表达在SIX1-si RNA组降低的同时出现了VEGF-C表达的降低;TGF-β蛋白及其m RNA的表达在TGFβ-si RNA组降低的同时也出现了VEGF-C表达的降低,差异均有统计学意义。同SIX1-si RNA组、TGFβ-si RNA组相比,VEGF-C蛋白及其m RNA的表达在SIX1+TGF-β-si RNA组未出现进一步降低。结论 SIX1和TGF-β能够共同作用促进VEGF-C蛋白及其m RNA的表达,进而促进人喉鳞癌的淋巴转移。SIX1、TGF-β的变化可能成为临床抑制人喉鳞癌淋巴结转移的潜在靶点。
- 张继华陈春菊韩彩莉苏静李丹王来
- 关键词：TGF-ΒVEGF-C
- 低氧条件下γ射线对Hep-2细胞周期、凋亡的影响被引量：1
- 2010年
- 目的体外建立不同氧供状态下的细胞模型,探讨不同剂量^(60)Coγ射线对喉鳞癌Hep-2细胞周期及凋亡的影响。方法将体外培养的人喉鳞癌Hep-2细胞分为两组:A组(常氧组)、B组(低氧组),两组细胞分别接受1、3、5、10、20、40(Gy)不同剂量^(60)Coγ射线照射,两组分别设0Gy对照组。流式细胞仪检测HIF-1α蛋白表达、细胞凋亡及细胞周期变化;免疫细胞化学检测各组细胞HIF-1α蛋白表达。结果A组Hep-2细胞在接受1～5Gyγ射线照射后,主要发生了G0/G1期阻滞,在接受10～40Gyγ射线照射后,发生了G2/M期阻滞;B组细胞主要发生了G2/M期阻滞。B组0Gy对照组发生了明显的G0/G1期阻滞;A组Hep-2细胞凋亡曲线成抛物线状,凋亡率呈现明显的剂量依赖性,在5Gy处出现最大值41.56±2.25。B组细胞凋亡率同A组相比总体上呈现明显的下调趋势,但不同剂量的γ射线没有对Hep-2细胞的凋亡率产生明显的影响。结论不同剂量^(60)Coγ射线照射会导致常氧条件下Hep-2细胞发生不同周期阻滞,而不同的周期阻滞会对Hep-2细胞的凋亡产生明显的影响。低氧条件下γ射线照射未能导致Hep-2细胞发生明显的凋亡,可能同Hep-2细胞G2/M期阻滞有关,而HIF-1a蛋白的表达上调可能是Hep-2细胞G2/M期阻滞的原因之一。
- 宋冬梅刘艳梅王宝山张继华
- 关键词：低氧Γ射线细胞周期凋亡HIF-1Α
- Six1和TGF-β及VEGF-C在人喉鳞状细胞癌裸鼠移植瘤淋巴转移中的作用被引量：7
- 2016年
- 目的：探讨Six1、转化生长因子β（TGF-β）在人喉鳞状细胞癌裸鼠移植瘤淋巴转移中对血管内皮生长因子C（VEGF-C）的作用。方法：利用基因干扰技术,分别沉默人喉鳞状细胞癌细胞内Six1和TGF-β基因的表达,制备Six1和TGF-β靶向siRNA转染至喉鳞状细胞癌细胞,筛选出阳性克隆细胞进行扩增,制备荷瘤裸鼠模型。致瘤小鼠随机分为5组：A组（未转染组）,B组（转染空载体组）,C组（Six1转染组）,D组（TGF-β转染组）,E组（Six1＋TGF-β转染组）。肿瘤生长到6～12mm时,将裸鼠脱颈处死,观察并记录各组肿瘤的体积及转移情况。Western blot及免疫组织化学检测各组Six1、TGF-β及VEGF-C蛋白的表达;RT-PCR检测各组Six1、TGF-β及VEGF-C mRNA的表达。结果：A、B组比较,平均肿瘤体积及转移只数无明显差异;同A组比较,C、D、E组中平均肿瘤体积无明显减轻,但转移只数减少;与C、D组比较,E组平均肿瘤体积无明显减轻,转移只数无明显减少。Western blot、免疫组织化学及RT-PCR结果显示,A、B组比较,VEGF-C蛋白及其mRNA表达无明显变化;与A组比较,C、D、E组中VEGF-C蛋白及其mRNA表达均出现减弱;与C、D组比较,VEGF-C蛋白及其mRNA的表达在E组未出现进一步降低。结论：Six1和TGF-β均能够调控VEGF-C mRNA及其蛋白的表达,进而调控人喉鳞状细胞癌的淋巴转移,提示Six1、TGF-β的变化可能成为临床抑制人喉鳞状细胞癌淋巴转移的潜在靶点。
- 王来朱孟沙田君海薛海涛刘海龙张继华
- 关键词：血管内皮生长因子C裸鼠
- 定位X射线侧位头颅片在诊断儿童阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征中的价值被引量：3
- 2012年
- 目的采用定位X射线侧位头颅片的检查技术,观察儿童阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征的腺样体肥大及颅骨测量,评估该方法在评估腺样体肥大及对上颌骨及下颌骨发育影响的价值。方法选择2006年至2010年在河北医科大学第一医院治疗的腺样体肥大患儿65例,其中男性31例,女性34例;年龄6岁1个月～7岁4个月,平均年龄7.10岁。并发分泌性中耳炎12例,慢性鼻-鼻窦炎20例,明显发育迟缓13例。在定位X射线侧位头颅片上把腺样体肥大程度分为Ⅰ组(n=35)A/N≥0.76,Ⅱ组(n=30)A/N≤0.75;以病程的长短分为A组(n=41)病程在3年以上(包括3年),B组(n=24)病程3年以下。回顾性分析比较两种情况下两组的颅骨测量值。结果腺样体的体积越大,对患儿面颅骨发育的影响越明显,Ⅰ、Ⅱ组的∠SNA(84.15°±1.76°vs 82.18°±2.11°;P<0.01)、∠SNB(78.91°±1.35°vs 77.92°±1.97°;P<0.05)和∠ANB(5.18°±1.09°vs 4.25°±0.95°;P<0.01)差异均有统计学意义。患病时间越长对患儿面颅骨发育的影响越重,A、B组的∠SNA(84.02°±1.73°vs 81.89°±2.17°;P<0.01)、∠SNB(78.92°±1.36°vs 77.65°±1.99°;P<0.01)和∠ANB(5.06°±1.06°vs4.23°±1.03°;P<0.01)差异均有显著统计学意义。结论定位X射线侧位头颅片可以很好地显示和测量腺样体;腺样体肥大可明显影响颅骨的发育;颅骨发育异常的严重程度与腺样体的体积和病程持续时间有关。
- 刘志明左艳萍张继华宋冬梅
- 阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征患者鼾声响度与颈动脉内膜斑块形成的相关性分析被引量：2
- 2020年
- 目的探讨阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征患者鼾声响度与颈动脉内膜斑块形成的关系。方法选取2015年1月—2017年8月在河北医科大学第一医院耳鼻喉科确诊的阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征患者97例,均进行多导睡眠监测(PSG)和/或Watch-PAT检测,根据患者鼾声的响度将其分为轻度鼾声组(≤35 dB)、中度鼾声组(35~55 dB)、重度鼾声组(≥55 dB)。同时选取同期健康查体者68例作为健康对照组(排除阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征以及发作性睡病、中枢性睡眠呼吸暂停低通气综合征等睡眠相关疾病)。记录4组受试者一般资料及颈动脉彩超检查结果,采用Logistic回归分析鼾声响度与颈动脉斑块形成的关系。结果轻度鼾声组28例,中度鼾声组34例,重度鼾声组35例。健康对照组颈动脉斑块检出率为17.6%(12/68),轻度鼾声组、中度鼾声组、重度鼾声组颈动脉斑块检出率分别为39.3%(11/28)、61.8%(21/34)、82.9%(29/35),各鼾声组颈动脉斑块检出率明显高于健康对照组,且重度鼾声组高于中度鼾声组,中度鼾声组高于轻度鼾声组,差异均有统计学意义(P均<0.05)。Logistic回归分析显示,中、重度打鼾为颈动脉斑块的危险因素,其OR(95%CI)分别为5.216(2.387,18.652)和22.371(3.598,131.230)。结论中、重度打鼾与颈动脉斑块检出率有关,鼾声的响度越大,阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征患者发生颈动脉斑块的风险越高。
- 薛静黄乃磊孙会凤张继华
- 关键词：阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征
- 缺氧反应元件同肿瘤治疗的研究进展
- 2011年
- 研究表明，在肿瘤适应低氧过程中缺氧诱导因子（HIF）起着中枢纽带作用，HIF是肿瘤适应低氧，产生一系列低氧行为的中心环节，而最近研究发现，缺氧反应元件（hypoxia response elements，HRE）是介导细胞低氧反应的重要调控序列，HRE是一种缺氧敏感诱导性调控元件，在实体瘤内的活性较高，在肿瘤细胞生长、浸润及转移等过程中发挥着重要的作用。
- 王宝山杨建旺张继华
- 关键词：缺氧反应元件肿瘤
