徐旭栋
- 作品数:7 被引量:44H指数:4
- 供职机构:浙江中医药大学附属第二医院更多>>
- 发文基金:浙江省中医药优秀青年人才基金计划浙江省教育厅科研计划国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域:医药卫生农业科学更多>>
- 铁皮石斛SCoT-PCR反应体系的优化被引量:9
- 2012年
- 目的对铁皮石斛的目标起始密码子(start condon targeted polymorphism,SCoT)多态性反应体系进行优化,为进一步对铁皮石斛遗传多样性的SCoT分析奠定基础。方法以铁皮石斛的新鲜叶片为试验材料,采用控制单一变量的方法分别研究模板DNA用量、引物浓度、TaqDNA聚合酶用量、dNTPs浓度、及退火温度共5个因素对SCoT-PCR扩增结果的影响。结果铁皮石斛SCoT标记的20μL优化反应体系为:DNA模板20 ng、引物浓度为30μmol/L、Taq DNA聚合酶用量为1.0 U、dNTP浓度为100μmol/L。适宜的PCR扩增程序为95℃预变性4 min;95℃变性50 s,56.1℃复性退火40 s,72℃延伸2 min,循环36次;72℃延伸5 min,4℃保存。1.5%琼脂糖凝胶电泳显示扩增产物在600~2 000 bp。结论该体系的建立为铁皮石斛种质遗传多样性分析、分子标记辅助育种等研究奠定了基础。
- 徐旭栋蒋瑞彬蓝小明颜美秋丁志山吕圭源金波
- 关键词:铁皮石斛遗传多样性分析分子标记辅助育种
- 活体成像技术动态观测华蟾素对裸小鼠BxPC3-luc2异体移植胰腺癌的抗肿瘤作用被引量:8
- 2015年
- [目的]利用小动物成像技术,探讨华蟾素对裸小鼠Bx PC3-luc2胰腺癌的抗肿瘤作用。[方法]Bx PC3-luc2胰腺癌细胞接种于24只雄性裸小鼠皮下7d后,分成3组:即空白组、华蟾素组[6g·kg-1华蟾素(生药)]、顺铂组(2mg·kg-1DDP),每组8只,连续腹腔注射给药14d;用游标卡尺和活体生物发光成像仪分别在第7d和第14d检测各组裸小鼠胰腺癌肿瘤生长情况,并在第14d处死小鼠,取实体瘤称重。[结果]与空白组比较,华蟾素组体重无明显变化,肿瘤体积和重量明显减小,肿瘤光子量明显降低,在给药第7d和14d时,肿瘤光子量抑制率分别为30.11%和63.81%,但6g·kg-1华蟾素作用弱于2mg·kg-1顺铂,而华蟾素对小鼠体重无明显变化,具有一定的优势。[结论]华蟾素具有较好的抑制裸小鼠Bx PC3-luc2胰腺癌的作用。
- 王剑超范丽萍徐旭栋屠珏寿旗扬傅惠英
- 关键词:华蟾素
- EDTA依赖的假性白细胞减少的实验分析与纠正对策被引量:1
- 2017年
- 目的 研究EDTA依赖的白细胞聚集对血液分析仪检测结果的影响,探讨抗凝剂介导的白细胞聚集的可能机制和白细胞计数纠正方法 .方法统计与分析2014年10月至2016年10月345600例门诊、住院血常规标本发生EDTA诱导的白细胞聚集导致假性白细胞减少例数的相关情况.结果 共发生EDTA依赖的白细胞聚集7例,其它原因导致白细胞聚集27例,发生率分别为0.002%和0.008%.由于白细胞聚集导致仪器自动白细胞计数结果假性偏低,与人工显微镜计数结果比较差异存在统计学意义(P〈0.01),进一步的实验表明EDTA诱导的白细胞聚集在37℃水浴30min和更换枸橼酸钠抗凝剂后白细胞聚集情况未得到纠正,相较于白细胞人工镜检计数差异有统计学意义(P〈0.01),而标本采用仪器稀释液与标本血浆等量置换以及标本中加入卡那霉素20mg/ml方法后,标本中白细胞聚集现象得到部分纠正,但仪器结果与人工镜检计数差异仍存在统计学意义(P〈0.01).结论 EDTA抗凝剂诱导的假性白细胞减少发生率为0.002%,极易漏诊.发现有白细胞聚集的情况应采用人工显微镜计数进行检测结果纠正,以防发生误诊误治.
- 陈龙徐旭栋张永为陆新建肖湘阳王剑超
- 关键词:EDTA白细胞聚集
- 人工栽培铁皮石斛种质资源遗传多样性的SCoT分析被引量:19
- 2013年
- 目的:将目标起始密码子多态性分子标记(SCoT)技术应用于铁皮石斛的遗传多样性研究。方法:采用SCoT分子标记技术和非加权平均距离法(UPGMA)对20份不同来源的人工栽培铁皮石斛样品进行遗传多样性分析。结果:从备选的56个引物中筛选出20个SCoT引物,对共扩增共获得226个条带,平均每个引物产生11.3个条带,其中多态性条带204条,多态性比率达到90.3%。结论:本实验发现不同来源的铁皮石斛人工栽培种存在较大的遗传差异,目前药材市场中的人工栽培铁皮石斛遗传多样性丰富,SCoT技术可有效应用于铁皮石斛的遗传多样性研究。
- 徐旭栋蒋瑞彬蓝小明颜美秋丁志山金波吕圭源
- 关键词:铁皮石斛
- 野生白及SRAP-PCR反应体系的优化被引量:7
- 2013年
- 采用浓度梯度设计法研究适合白及的SRAP-PCR反应体系。对影响SRAP-PCR的DNA模板、引物、dNTP、Mg2+、Taq酶、退火温度等6个因素进行优化。最终确定白及的SRAP-PCR优化体系:在20μL体系中,DNA模板30 ng、Mg2+2.5 mmol/L、dNTPs 0.25μmol/L、引物20μmol/L、Taq酶2.0U,扩增体系为:94℃预变性5 min;5个循环的94℃变性1 min,36℃退火1 min,72℃延伸1 min;之后35个循环:94℃变性1 min,48℃退火1 min,72℃延伸1 min;72℃最后延伸5 min。该体系的建立为野生白及种质资源遗传多样性的进一步相关遗传分析奠定了基础。
- 蒋瑞彬徐旭栋蓝小明王鸯妮丁志山金波
- 关键词:白及
- 干扰素调节因子8在骨髓增生异常综合征伴原始细胞增多亚型中的表达研究
- 目的:骨髓增生异常综合征(myelodysplasticsyndromes,MDS)是一组源于髓系造血干细胞的克隆性疾病,其骨髓增生异常综合征伴原始细胞增多(Myelodysplastic Syndromes with ...
- 徐旭栋
- 关键词:实时荧光定量PCR
- 干扰素调节因子8在骨髓增生异常综合征伴原始细胞增多亚型中的表达研究被引量:2
- 2017年
- 目的研究干扰素调节因子8(interferon regulatory factor 8,IRF-8)在骨髓增生异常综合征伴原始细胞增多(Myelodysplastic Syndromes with Excess Blasts,MDS-EB)亚型中是否存在表达异常,并分析其与MDS-EB的相关性。方法收集三组共30例实验标本。其中20例为MDS-EB病例标本,分为MDS-EB1组和MDS-EB2组。10例为健康体检的健康对照组。30例标本均采集自受试者外周静脉血,采集后立即进行外周血总RNA提取,并经逆转录PCR后,以实时荧光定量PCR检测各标本的IRF-8 mRNA表达水平。各组平均表达量以RQ值(x±s)表示。结果三组样本实时荧光定量PCR的平均RQ值:MDS-EB1组(0.59±0.08),MDS-EB2组(0.26±0.10),健康对照组(1.20±0.26),三组表达水平存在显著差异(P<0.01)。MDS-EB组的IRF-8表达水平均显著低于健康对照组(P<0.01),MDS-EB2组内IRF-8表达水平低于MDS-EB1组(P<0.05)。结论 IRF-8在MDS-EB中表达水平降低,表明IRF-8在MDS-EB中表达受抑,组间统计结果提示IRF-8的表达可能与疾病的恶性程度及进展相关。
- 徐旭栋肖湘阳陈龙王剑超
- 关键词:逆转录PCR实时荧光定量PCR