徐苗
- 作品数：10 被引量：21H指数：2
- 供职机构：四川大学华西医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 转录通读环状RNA rt-circ-HS促进低氧诱导因子1α表达和肾癌细胞增殖与侵袭
- 2023年
- 目的:鉴定肾癌细胞中由染色体14q23上相邻基因低氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor 1α,HIF1α)和小核RNA激活复合多肽(small nuclear RNA activating complex polypeptide 1,SNAPC1)形成的转录通读RNA及转录通读环状RNA(read-through circular RNA HIF1α-SNAPC1,rt-circ-HS),研究rt-circ-HS在肾癌细胞及组织样本中的表达、对肾癌细胞生物学行为的影响以及对其亲本分子HIF1α的调控机制。方法:逆转录PCR(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)和Sanger测序检测不同肿瘤细胞中由HIF1α-SNAPC1形成的转录通读RNA和rt-circ-HS的表达。构建不同类型的肾细胞癌(renal cell carcinoma,RCC)组织芯片共437例,用原位杂交检测rt-circ-HS表达。采用小干扰RNA(small interference RNA,si-RNA)和人工过表达质粒干预rt-circ-HS,用细胞计数实验(cell counting kit 8,CCK8)、EdU掺入实验、Transwell细胞迁移和细胞侵袭实验分别检测rt-circ-HS对肾癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。用RT-PCR和Western blot验证干预rt-circ-HS对亲本分子HIF1α和SNAPC1表达的影响。构建包含rt-circ-HS、HIF1α3′端非翻译区(3′untranslated region,3′UTR)与微小RNA 539(microRNA 539,miR-539)结合序列的野生型和突变型质粒,用双荧光素酶报告基因系统检测rt-circ-HS、HIF1α3′UTR与miR-539的结合。结果:发现一个新的rt-circ-HS,由HIF1α外显子(exon)6-SNAPC1 exon 2转录通读本产生,在肾癌细胞786-O中高表达。Sanger测序证实rt-circ-HS全长1144 nt,包括HIF1αexon 2-exon 6和SNAPC1 exon 2-exon 4,是一个新的转录通读环状RNA。原位杂交结果显示,rt-circ-HS在RCC中阳性表达率为67.5%(295/437),在不同类型RCC中表达率不同。发现miR-539是HIF1α的转录后负调控分子;rt-circ-HS作为分子海绵与miR-539结合,竞争性抑制miR-539与HIF1α3′UTR的结合,解除其对HIF1α的转录后负调控作用,促进亲本分子HIF1α表达及肾癌细胞增殖、迁移和侵袭。结论:rt-circ-HS作为分子
- 许云屹许云屹郑林茂张孟尼谭珺娅谭珺娅张梦鑫徐苗徐苗陈铌陈雪芹
- 关键词：低氧诱导因子1Α
- 抗凋亡基因Bfl-1在前列腺癌中的表达及作用
- 2013年
- 目的检测Bcl2相关蛋白A1(Bfl-1)mRNA在前列腺癌细胞株、前列腺癌组织及良性前列腺增生组织中的表达,观测阻断Bfl-1表达对前列腺癌细胞的影响,探讨Bfl-1在前列腺癌发生发展中的作用。方法采用RT-PCR、实时荧光定量PCR(Q-PCR)、cDNA探针原位杂交(ISH)等技术检测Bfl-1mRNA在前列腺癌组织、细胞株和良性前列腺增生组织的表达水平;结合临床资料分析Bfl-1的表达与临床病理指标的关系;利用反义寡核苷酸干预前列腺癌细胞株,RT-PCR检测Bfl-1表达,MTT法检测细胞的存活,倒置显微镜下观察前列腺癌细胞的形态变化。结果 RT-PCR、Q-PCR结果显示Bfl-1mRNA在激素非依赖性前列腺癌细胞株PC-3和DU145中高表达,在激素依赖性前列腺癌细胞株LNCaP中未见表达,表达差异有统计学意义(P<0.05);原位杂交结果显示Bfl-1mRNA在前列腺癌组织中高表达,而在良性前列腺增生组织中未见表达,表达差异有统计学意义(P<0.05);有转移、分期高的前列腺癌病例的Bfl-1mRNA表达水平高于无转移、分期低的病例(P<0.05);Bfl-1反义寡核苷酸转染PC-3和DU145细胞后,Bfl-1表达下调,细胞生长受到抑制(P<0.05),细胞脱落、碎裂形成大小不一的细胞团块。结论激素非依赖性前列腺癌细胞的生长与Bfl-1过表达有关;干预Bfl-1表达可能成为晚期前列腺癌治疗的新策略。
- 李星斓陈雪芹聂玲徐苗李秋尧商维维陈铌黄蕤曾浩周桥
- 关键词：前列腺癌细胞生长反义寡核苷酸
- 组蛋白去乙酰化下调对肾细胞癌BNIP3基因表达的影响
- 2017年
- 目的探讨肾细胞癌中线粒体促凋亡蛋白BNIP3表达下调机制。方法运用CCK-8法及流式细胞技术检测组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古霉素A(TSA)对肾癌细胞株786-O、ACHN、A498增殖、凋亡的影响;运用实时荧光定量PCR(Q-PCR)和蛋白质免疫印记(Western blot)技术检测TSA对肾癌细胞BNIP3表达的影响;运用染色质免疫沉淀(ChIP)技术检测TSA对肾癌细胞BNIP3基因启动子区组蛋白H3乙酰化状态的影响。结果经TSA处理后,3种肾癌细胞增殖均受到显著抑制(P<0.05),细胞早期凋亡明显增加,BNIP3mRNA(P<0.05)和蛋白表达水平上调。786-O、ACHN的BNIP3基因启动子区组蛋白H3呈去乙酰化状态,TSA恢复了其乙酰化状态;A498的BNIP3基因启动子区组蛋白H3呈乙酰化状态。结论 BNIP3基因启动子区组蛋白去乙酰化是其在肾癌中表达下调的主要机制,并可能参与了肾癌的发生发展。
- 刘健帮王海舟刘振华徐苗李响
- 关键词：肾细胞癌BNIP3组蛋白去乙酰化曲古霉素染色质免疫沉淀
- 尿路上皮癌429例HER2表达情况及临床病理学分析
- 2023年
- 目的:探讨尿路上皮癌患者HER2表达情况与临床病理特征之间的关系。方法:收集2019年1月至2022年6月四川大学华西医院诊断的429例尿路上皮癌,通过免疫组织化学检测HER2、细胞角蛋白(CK)20、CK5/6的表达情况。HER2评价标准参照“中国尿路上皮癌人表皮生长因子受体2检测临床病理专家共识”,HER22+及3+定义为HER2阳性。分析本组病例HER2表达与临床病理特征、分子分型之间的关系。结果:(1)本组病例共429例,其中166例根治标本,263例经尿道电切/局部整体切除标本。患者年龄范围31~93岁(平均年龄67.6岁,中位年龄69.0岁),男女比为2.9∶1.0。HER2总体阳性率为45.7%(196/429),其中HER22+占比最多(172/429,40.1%)。(2)经尿道电切标本中HER2阳性率为51.7%(136/263),高于根治标本(36.1%,60/166,P<0.05)。(3)膀胱尿路上皮癌HER2阳性率为49.1%(157/320),高于上尿路尿路上皮癌(35.2%,37/105,P<0.05)。(4)高级别尿路上皮癌中HER2阳性率为52.8%(168/318),高于低级别尿路上皮癌(25.2%,28/111,P<0.01)。(5)166例根治标本可进行肿瘤准确分期,HER2阳性比例分别为Ta(26.1%,6/23)、T1(41.7%,20/48)、T2(40.0%,10/25)、T3(28.1%,16/57)、T4(8/13),HER2表达与pT分期无明显相关性(P>0.05)。肌层浸润性尿路上皮癌中HER2阳性率为35.8%(34/95),非肌层浸润肿瘤中HER2阳性率为36.6%(26/71),二者差异无统计学意义(P>0.05)。(6)采用CK5/6和CK20免疫组织化学进行初步分子分型,结果显示,CK20+/CK5/6-组HER2阳性率最高(124/194,63.9%),余依次为双阳组(CK20+/CK5/6+,18/40,45.0%)、双阴组(CK20-/CK5/6-,14/41,34.1%),CK20-/CK5/6+组HER2阳性率最低(25/131,19.1%,P<0.01)。(7)微乳头型尿路上皮癌HER2阳性比例最高(14/15);余依次为伴腺样分化(11/14)、经典型(161/360,44.7%)、伴鳞状分化(6/35,17.1%,P<0.01)。(8)伴淋巴结转移的病例HER2阳性率为45.5%(10/22),高于无淋巴结转移的病例(31.0%,13/42),但差异无统计学意义(P>0.05)。结论:尿路上皮癌
- 张孟尼龚静陈雪芹聂玲徐苗卫昱燕周桥陈铌
- 关键词：泌尿系肿瘤基因ERBB-2病理学
- 应用CRISPR／cas9系统敲除HIF1α基因抑制前列腺癌DU145细胞的增殖和侵袭被引量：2
- 2018年
- 目的应用新型基因编辑工具CRISPR/cas9（clustered regularly interspaced palindromic repeat/CRISPR-associated system 9）在前列腺癌DU145细胞中部分敲除HIF1α基因，以探讨转录因子HIF1α（hypoxia-inducible factor-1α）的功能及其对前列腺癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响。方法以HIF1α-exon 1为靶点，设计两条sgRNA序列，构建CRISPR/cas9系统，在前列腺癌DU145细胞中敲除HIF1α基因，并利用CCK8、Transwell实验分析部分敲除HIF1α对前列腺癌DU145细胞增殖、迁移、侵袭的影响。结果酶切及测序结果显示HIF1α部分敲除成功。部分敲除HIF1α基因后，其表达水平明显下调，可显著抑制DU145细胞增殖、迁移、侵袭。结论成功构建了HIF1α CRISPR/cas9基因敲除系统，可显著抑制前列腺癌DU145细胞增殖、迁移、侵袭能力。该系统可为深入研究HIF1α基因的功能提供新的工具。
- 许云屹徐苗张孟尼谭珺娅苏征征陈雪芹周桥
- 关键词：前列腺癌DU145细胞
- 肿瘤分子病理学中的调节性RNA被引量：1
- 2022年
- 肿瘤发生与发展的主要分子基础是基因表达调控紊乱.调节性RNA在基因表达调控各个环节和各种细胞生物学过程中发挥重要作用.microRNA,circRNA,lncRNA,piRNA,snoRNA,tsRNA等各类调节性RNA的生成、生物学功能及其在肿瘤中的作用和分子机制,是近年肿瘤分子生物学研究的重要进展,并逐步转化应用于临床实践.本文综述了近年来肿瘤分子生物学领域中调节性RNA的研究进展,并对其发展方向和实践应用进行了展望.
- 潘秀懿苏征征钟金晶余婷卫昱燕许云屹尹晓雪郭小煜张孟尼聂玲徐苗龚静陈铌陈雪芹周桥
- 关键词：MICRORNAPIRNASNORNA
- 肾透明细胞癌组织中BNIP3的表达及意义被引量：1
- 2014年
- 目的研究肾透明细胞癌中BNIP3表达及意义。方法收集肾癌手术切除的肾癌组织和对应癌旁正常肾组织新鲜标本,共30例。运用实时荧光定量PCR、蛋白质印迹法(Western blot)检测各组BNIP3、von Hippel-Lindan(VHL)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)的表达情况。并分析BNIP3与VHL、HIF-1α、VEGF表达相关性,及各个基因表达与临床病理参数间关系。结果实时荧光定量PCR检测结果示:在RNA水平,BNIP3、VHL在肾癌组织中表达水平低于癌旁正常肾组织(P<0.05),HIF-1α和VEGF在肾癌组织中表达水平高于癌旁正常肾组织(P<0.05),BNIP3表达与VHL、HIF-1α、VEGF无相关性,肾癌组织中BNIP3低表达与各个临床病理学特征无相关性。Western blot检测结果示:在蛋白水平,BNIP3、VHL在肾癌组织中表达水平低于癌旁正常肾组织(P<0.05),HIF-1α和VEGF在肾癌组织中表达水平高于癌旁正常肾组织(P<0.05)。BNIP3蛋白表达与VHL、HIF-1α、VEGF蛋白亦无相关性(P>0.05)。结论可能存在某种调控机制使BNIP3在肾透明细胞癌表达下调,且BNIP3低表达与VHL、HIF-1α、VEGF表达无相关性。
- 黄龙赵涛田义阳王海舟陈雪芹徐苗李响
- 关键词：肾透明细胞癌BNIP3缺氧诱导因子-1Α蛋白质印迹法
- 弥漫浸润性胶质肿瘤中TERT和IDH突变联合分析的预后价值被引量：9
- 2018年
- 目的探讨弥漫浸润性胶质肿瘤中端粒酶逆转录酶（TERT）及异柠檬酸脱氢酶（IDH）基因热点突变情况及二者结合的预后价值。方法采用Sanger测序法检测四川大学华西医院2012至2014年手术的236例胶质瘤标本（WHO I-Ⅳ级肿瘤分别为16、89、72和59例）中TERT基因启动子区（228位点和250位点）、IDHl（132密码子）和IDH2（172密码子）突变情况，分析这些突变与患者预后的关系。结果WHOI级16例毛细胞型星形细胞瘤中均未检出IDH和TERT基因突变。WHOⅡ-IV级的220例弥漫浸润性胶质肿瘤中，年龄≥40岁患者TERT突变比例（60．8％，93／153）明显高于〈40岁患者（32．8％，22／67；P〈0．01），少突胶质瘤中TERT突变率（87．5％，56／64）明显高于星形细胞瘤（37．8％，59／156：P〈0．01）。年龄〈40岁、IDH1突变和少突胶质瘤为弥漫浸润性胶质肿瘤预后好的因素。TERT突变不能单独提示胶质瘤预后。TERT和IDH1突变联合检测可将弥漫浸润性胶质瘤分为4个分子亚组：IDH（＋）／TERT（＋）组、IDH（＋）／TERT（-）组、IDH（-）／TERT（-）组和IDH（-）／TERT（＋）组，4组间具有明显预后差异，IDH（＋）／TERT（＋）组患者预后最好，IDH（-）／TERT（＋）组患者预后最差。结论IDH和TERT基因突变状态可细化胶质瘤患者预后分组，特别是可将IDHl野生型的病例进一步进行预后亚组划分。具有较好的临床应用价值。
- 刘千琪尹晓雪邹艳余天平龚静陈雪芹聂玲徐苗张孟尼周桥陈铌
- 关键词：末端转移酶异柠檬酸脱氢酶DNA突变分析
- 微灶前列腺癌206例临床病理学分析被引量：1
- 2022年
- 目的探讨微灶前列腺癌患者的临床和病理学特征及预后。方法收集2013—2019年四川大学华西医院接受前列腺穿刺并诊断为"微灶前列腺癌"患者的临床及病理资料。微灶前列腺癌定义如下:穿刺标本Gleason评分3+3=6分,穿刺总针数≥10针,阳性针数≤2针且单针病灶小于穿刺组织的50%。收集患者的临床病理参数、治疗方案及随访资料。对比穿刺与根治标本的病理信息,分析微灶前列腺癌患者临床和穿刺病理参数与根治标本不良病理特征(根治标本Gleason评分升高、前列腺外扩散、手术切缘阳性、神经侵犯)的相关性。结果(1)前列腺穿刺活检诊断微灶前列腺癌共206例,占所有腺癌的6.7%(206/3076)。其中穿刺阳性针数为1针者139例,2针者67例。(2)与非微灶前列腺癌相比,微灶前列腺癌患者的年龄更小(69岁∶71岁,P<0.001)、穿刺前总前列腺特异性抗原(tPSA)和游离前列腺特异性抗原(fPSA)水平更低(11.2μg/L∶23.7μg/L;1.4μg/L∶3.0μg/L,P<0.001)、fPSA/tPSA水平更高(12.9%∶10.7%,P<0.05)、前列腺体积更大(38.9 mL∶34.3 mL,P<0.05)、PSA密度更低(0.3μg/L^(2)∶0.8μg/L^(2),P<0.001)。(3)130例患者选择前列腺根治,30例患者选择积极监测,31例患者选择内分泌或放射治疗,15例患者失访。积极监测组中有3例患者在观察21~39个月后疾病进展行前列腺根治术;行根治术组中2例患者出现生化复发;余患者目前均无疾病进展。(4)对比穿刺与根治标本,64/115例(55.7%)患者根治标本Gleason评分升高;根治标本中,前列腺外扩散14例(12.2%,14/115);神经侵犯35例(30.4%,35/115);切缘阳性16例(13.9%,16/115)。(5)单因素和多因素分析结果显示:fPSA/tPSA比值低、穿刺阳性针数2针是微灶前列腺癌根治标本Gleason评分升高的独立危险因素;fPSA/tPSA比值低是微灶前列腺癌根治标本检出神经侵犯的独立危险因素;患者fPSA/tPSA水平低和前列腺体积小与根治标本切缘阳性有
- 聂玲陈雪芹宋燕坤张孟尼徐苗龚静周桥陈铌
- 关键词：前列腺肿瘤预后病理学
- 肾源性腺瘤临床病理和免疫组化分析被引量：7
- 2012年
- 目的探讨肾源性腺瘤(nephrogenic adenoma,NA)的临床病理表现和免疫组化特征。方法收集5例膀胱和输尿管NA,分析其临床病理和免疫表型特征。结果 3例NA位于膀胱,2例位于输尿管。眼观NA呈乳头状或息肉状,镜下见病变主要由增生上皮细胞形成的小管状、囊状和乳头状结构组成;增生上皮为单层立方状或扁平状,部分呈"鞋钉"样;间质慢性炎。免疫组化染色示增生上皮细胞呈PAX2、CK7、EMA、AMACR/P504S(+),p63、CD10、CD31、PSA(-),Ki-67增殖指数<2%。结论 NA是较少见的瘤样病变,可误诊为其他肿瘤(甚至腺癌)。熟悉其病理学和免疫表型特征是正确诊断的关键。
- 陈铌陈雪芹徐苗聂玲李星斓李秋尧余天平周桥
- 关键词：膀胱肿瘤输尿管肿瘤免疫组织化学
