戚晓熙
- 作品数：5 被引量：8H指数：1
- 供职机构：东北农业大学食品学院乳品科学教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：教育部重点实验室开放基金国家自然科学基金国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程生物学化学工程更多>>
- N-乙酰神经氨酸醛缩酶基因在大肠杆菌中的高效表达被引量：1
- 2015年
- 以大肠杆菌TG1的染色体总DNA为模板,通过引物设计和PCR扩增,克隆获得编码Neu5Ac醛缩酶基因(nanA)的片段;以p ET28(b)构建的nanA基因重组质粒p ET28(b)-nanA转化大肠杆菌BL21(DE3),达到高产N-乙酰神经氨酸醛缩酶的目的。在得到的转化子大肠杆菌BL21(DE3)/pNA1中,nanA基因受lac启动子控制,为IPTG或乳糖所诱导表达。此工程菌产酶量在浓缩后达到6.13mg/m L。
- 李春戚晓熙杨鹤龚雅丽祁昕梁婉婷刘丽波
- 关键词：大肠杆菌工程菌基因表达
- 不同时段嗜酸乳杆菌干预对β-乳球蛋白过敏缓解的作用被引量：1
- 2014年
- 目的:分析和比较嗜酸乳杆菌预防和治疗β-乳球蛋白过敏的作用和效果,为抗过敏性能益生菌的使用提供科学依据。方法:BALB/c小鼠随机分为空白组、β-乳球蛋白过敏组、嗜酸乳杆菌预防组和嗜酸乳杆菌治疗组。建模结束后,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组小鼠血清中IgE及Thl/Th2型细胞因子(IL-12、IFN-γ、IL-4)的含量;RT-PCR法检测脾脏中T-bet和GATA-3 mRNA的表达量。结果:嗜酸乳杆菌干预可有效缓解β-乳球蛋白过敏,与过敏组小鼠比较,其血清总IgE和特异性IgE水平明显降低(P<0.05),IFN-γ、IL-12含量及T-bet mRNA表达量显著增加,IL-4含量及GATA-3 mRNA表达显著降低(P<0.05)。特别是嗜酸乳杆菌预防组的抗过敏效果优于治疗组,且预防组调节IFN-γ/IL-4比值(代表Thl/Th2细胞平衡)的能力显著优于治疗组(P<0.05)。结论:嗜酸乳杆菌预防β-乳球蛋白过敏的效果优于其治疗效果。
- 郑全玲李艾黎戚晓熙郜雪飞季晓梅
- 关键词：Β-乳球蛋白嗜酸乳杆菌BALBC小鼠RT-PCR法
- 丙酮酸钠与流加发酵结合对唾液酸产量的影响
- 2015年
- 利用微生物发酵法生产唾液酸,凭借其原料价格低廉,唾液酸收率高,产品质量稳定,易于实现连续化生产等优势而备受关注。探讨不同含量的前体物质丙酮酸钠对大肠杆菌K235发酵产唾液酸的影响,以及结合流加发酵进一步提高终产物产量的策略。以唾液酸质量浓度和菌体干质量为参数,通过单因素试验和一次性补料方法分别确定丙酮酸钠的最佳添加量和最佳补料期。试验结果表明,用三口烧瓶模拟发酵罐,在发酵初期添加4 g/L的丙酮酸钠,其发酵液经酸水解后,唾液酸产量达到4.10 g/L。用3.7 L自动生物发酵罐验证,唾液酸产量达到5.24 g/L,比不添加丙酮酸钠时唾液酸的产量提高了146%。丙酮酸钠在发酵8 h时一次性补料,发酵罐中唾液酸的产量达到6.47 g/L,比在单一的分批培养模式中添加丙酮酸钠提高了23.5%。
- 李春王敏戚晓熙孙金威刘丽波刘宁
- 关键词：唾液酸流加发酵
- 乳杆菌肽聚糖对β-乳球蛋白致敏小鼠脾细胞Th1/Th2及Treg/Th17失衡的体外影响被引量：6
- 2014年
- 【目的】观察嗜酸乳杆菌完整肽聚糖(Whole peptidoglycan,WPG)对致敏脾淋巴细胞Th1/Th2及Treg/Th17平衡的体外调节作用。【方法】通过腹腔注射β-乳球蛋白(β-Lg)建立BALB/c小鼠牛乳过敏模型。造模成功后,分离致敏小鼠的脾淋巴细胞并分别与不同剂量的WPG共同孵育,酶联免疫法检测细胞上清液中抗体(总IgE和特异性IgE),Th1/Th2及Treg/Th17相关细胞因子(IFN-γ,IL-4,TGF-β,IL-17)水平,流式细胞术检测脾淋巴细胞中CD3+、CD4+和CD8+的百分含量,荧光定量PCR法检测过敏小鼠脾细胞中Th1/Th2及Treg/Th17相关转录因子T-bet、GATA-3、Foxp3和RORγt mRNA的表达量。【结果】WPG体外刺激致敏脾细胞后可显著抑制IgE的产生,上调CD3+、CD4+细胞数及CD4+/CD8+比值,下调Th2型因子(IL-4,GATA-3mRNA)和Th17型因子(IL-17,RORγt mRNA)的表达,且与过敏组相比,中、高剂量WPG的作用效果显著(P<0.05);另外,WPG体外作用还上调了Th1型因子(IFN-γ,T-bet mRNA)及Treg型因子(TGF-β,Foxp3 mRNA)的表达,且具有剂量依赖性。【结论】嗜酸乳杆菌WPG体外刺激可有效纠正致敏脾淋巴细胞的Th1/Th2及Treg/Th17失衡。
- 李丹李艾黎季晓梅姚蕾郜雪菲戚晓熙
- 关键词：完整肽聚糖TREGTH17
- RP-HPLC测定保加利亚乳杆菌腺苷酸方法的建立与应用
- 2013年
- 建立适用于测定保加利亚乳杆菌腺苷酸的反相高效液相色谱方法,为评价代谢组学研究中淬灭液的淬灭效果提供方法支持。采用SinoChrom ODS-BPC18色谱柱,甲醇-30mmol/L磷酸钾(V/V=5∶95)缓冲液(pH7.0)作为流动相,流速0.7mL/min,柱温25℃,紫外检测波长254nm。结果表明该方法具有较好的线性和较高的精密度,回收率在94.12%～109.6%之间。利用该方法测定了使用最广泛的60%(v/v)冷甲醇/水溶液淬灭保加利亚乳杆菌的效果,结果发现ATP的泄露率高达70.43%±2.3%,能荷值是0.42±0.015,从而推断该淬灭方案不但会造成胞内代谢物的大量泄漏,而且菌体的代谢反应也没有完全停止,故该淬灭方案不适合保加利亚乳杆菌。
- 孙茂成李艾黎霍贵成孟祥晨戚晓熙
- 关键词：保加利亚乳杆菌反相高效液相色谱腺苷酸淬灭
