方艳辉
- 作品数：38 被引量：125H指数：8
- 供职机构：承德医学院更多>>
- 发文基金：河北省自然科学基金国家自然科学基金河北省卫生厅资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学社会学更多>>
- 《病原生物学》课程线上线下混合教学的探索与实践
- 2022年
- 为顺应网络时代新的教学模式和理念的的变革与发展,充分利用优质的互联网教育资源,文章以《病原生物学》课程为研究对象,利用线上教学在学习空间、时间、媒介和内容方面的灵活性,与传统的填鸭式课堂教学互为补充,并把课程思政理念融入线上线下教学中,以润物细无声之效培养学生的高阶性思维能力,立德树人,增强教学中学生的主体地位。
- 李丹邴玉艳方艳辉谢广成杜娈英
- 关键词：病原生物学
- 旋毛虫排泄分泌蛋白对小细胞肺癌NCI-H446细胞凋亡的影响被引量：8
- 2014年
- 目的研究旋毛虫肌幼虫排泄分泌蛋白对人小细胞肺癌NCI-H446细胞凋亡的影响。方法旋毛虫肌幼虫培养24 h,收集培养液,取上清,即为旋毛虫肌幼虫排泄分泌蛋白。将人小细胞肺癌NCI-H446细胞(编号A054)随机分为3组,实验组(A组)和细胞凋亡组(B组)的NCI-H446细胞(5×106/ml)分别与旋毛虫排泄分泌蛋白(终浓度为0.3 mg/ml)和顺铂(6.4μg/ml)共培养24 h,空白对照组(C组)的NCI-H446细胞培养24 h,不作任何处理。RT-PCR检测3组NCI-H446细胞中凋亡抑制基因Bcl-2、凋亡相关基因Fas和Fas配体(Fasl)mRNA的表达水平。以抗原癌基因C-myc标签鼠单克隆抗体为一抗,蛋白质印迹(Western blotting)检测3组细胞C-myc蛋白的表达情况。免疫荧光检测3组NCI-H446细胞中C-myc蛋白阳性表达情况。结果 RT-PCR结果显示,经旋毛虫排泄分泌蛋白处理的NCI-H446细胞(A组),Bcl-2 mRNA相对表达水平最低,为(0.575±0.047),与B(0.850±0.073)、C组(0.975±0.069)比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。A组Fas mRNA相对表达量最高,为(0.975±0.115),B(0.817±0.121)、C组(0.769±0.061)相对较低(P<0.05)。A、B和C组细胞Fasl mRNA相对表达水平分别为0.669±0.051、0.787±0.124、0.875±0.125(P<0.05)。A、B和C组细胞Fas/Fasl mRNA比值分别为1.475、1.038和0.878。Western blotting分析结果显示,A组C-myc相对表达水平最低(0.566±0.054),B(1.074±0.069)、C组(1.172±0.026)相对较高(P<0.05)。免疫荧光定位结果显示,旋毛虫排泄分泌蛋白和顺铂作用后24 h,C-myc蛋白在细胞浆/细胞核表达。结论旋毛虫排泄分泌蛋白可促进人小细胞肺癌细胞系NCI-H446细胞凋亡,可能是通过调节凋亡蛋白C-myc表达、进而抑制Bcl-2 mRNA的表达并调节Fas/Fasl mRNA比例来实现的。
- 常红敏赵蕾王小杰方艳辉李丹罗婧梅杜娈英
- 关键词：旋毛虫小细胞肺癌NCI-H446凋亡基因凋亡蛋白
- 旋毛虫成虫cDNA文库构建及特异性基因的克隆、序列分析和表达
- 陈晓宁张丽王丽娜赵蕾邴玉艳许士奇方艳辉刘金霞杜娈英李欣石艳华
- 该项目建立了云南株、黑龙江株旋毛虫的动物模型，通过计算感染小鼠膈肌虫荷、囊包指数、旋毛虫的繁殖力指数，比较云南、黑龙江、河南株旋毛虫囊包幼虫对小鼠的感染性，可为进一步探讨不同株旋毛虫对人的感染性提供有用的临床资料。同时探...
- 关键词：
- 关键词：旋毛虫病基因克隆药物治疗
- 穿山龙体外给药对T淋巴细胞增殖的抑制作用被引量：19
- 1998年
- 应用ＭＴＴ比色法观察了穿山龙水煎醇提剂体外给药对ＣｏｎＡ刺激小鼠脾细胞增殖的影响。结果表明，此药可抑制ＣｏｎＡ诱导的脾细胞增殖反应，此种抑制作用只有在培养早期加入药物才能发生，并证明此种作用并非穿山龙的细胞毒作用引起。
- 宋鸿儒高继红方艳辉孙肖红陈子云
- 关键词：穿山龙T淋巴细胞MTT药理
- 一种TaqMan探针实时荧光RT-PCR检测黄病毒的非诊断性方法
- 本发明公开了一种TaqMan探针实时荧光RT-PCR检测黄病毒的非诊断性方法，该非诊断性方法包括一对引物和探针对待检样本进行实时定量检测，旨在针对黄病毒属成员多、检测繁琐，给新发虫媒病毒监测检测带来不便的问题。该非诊断性...
- 孙肖红郭金金燕清丽方艳辉杨鹏飞
- 文献传递
- 生黄合剂抗柯萨奇病毒性心肌炎的实验研究
- 宋鸿儒郭亚春邢恩鸿张凤英王凯华方艳辉戎凤娥焦素芬周晓春高玉峰
- 该研究首先在体外应用细胞培养观察生脉饮与黄芩茎叶总黄酮联用及两者单用对病毒的直接抑制作用初步探讨生黄合剂对柯萨奇病毒性心肌炎的保护机理，并采用柯萨奇病毒B组3型(CVB3)的小鼠病毒性心肌炎动物模型，应用ELISA、免疫...
- 关键词：
- 关键词：柯萨奇病毒性心肌炎
- 人IL-2信号肽基因增强柯萨奇B3病毒VP1DNA疫苗诱导的中和抗体应答
- 该研究的目的就是将hIL-2信号肽及成熟hIL-2N末端11个氨基酸残基的基因与CVB3 VP1的cDNA融合,并克隆至真核表达载体pcDNA3,构建分泌型重组真核表达质粒pcDNA3/sVP1;免疫小鼠后,通过血清中和...
- 方艳辉
- 关键词：人白细胞介素2柯萨奇B3病毒信号肽基因拼接
- 文献传递
- 一种TaqMan探针实时荧光RT-PCR检测黄病毒的非诊断性方法
- 本发明公开了一种TaqMan探针实时荧光RT-PCR检测黄病毒的非诊断性方法，该非诊断性方法包括一对引物和探针对待检样本进行实时定量检测，旨在针对黄病毒属成员多、检测繁琐，给新发虫媒病毒监测检测带来不便的问题。该非诊断性...
- 孙肖红郭金金燕清丽方艳辉杨鹏飞
- 黄病毒属TaqMan探针荧光定量RT-PCR检测方法建立被引量：4
- 2012年
- 目的建立用于检测黄病毒属的TaqMan探针荧光定量RT-PCR方法。方法从GenBank中检索黄病毒属代表株的全基因序列,通过DNAstar进行序列比对和blast进行保守序列搜索和分析,用Beacon Designer 7.0软件进行引物和TaqMan探针设计,以乙脑毒株MB090509 RNA为模板,优化反应条件并应用于现场蚊虫标本检测。结果确定黄病毒属TaqMan探针荧光定量RT-PCR反应条件为:45℃15 min,95℃10 min,95℃10 s→54℃45 s,40次循环,引物和探针终浓度为200 nmol/L。灵敏度为常规RT-PCR方法 100倍,检出限2.9×10-3噬斑形成单位(PFU)/mL,与甲病毒属、东南亚十二节段RNA病毒属、布尼亚病毒属均无交叉反应。从161份现场蚊虫标本中检测出11份阳性标本,经病毒分离、测序均被证实为乙脑病毒。结论本研究建立的黄病毒属TaqMan探针荧光定量RT-PCR方法具有广泛应用价值。
- 郭金金孙肖红燕清丽方艳辉杨鹏飞魏莲张晓龙姚李四
- 关键词：黄病毒属
- 医学细菌学总论“四步八项”综合性实验探讨被引量：3
- 2013年
- 针对传统细菌学总论实验零散和造成学生实验被动及积极性不高等问题,作者精心设计了"四步八项"细菌学总论综合性实验,将8个独立的验证性实验综合成一个需要4次完成的、具有连贯性和递进性的小型综合性实验,并在实施过程中综合运用多种教学法,从而丰富了细菌学总论的实验内涵,改善了实验结果,激发了学生的主动参与热情,提高了实验教学效果。
- 方艳辉刘立新陈晓宁杜娈英
- 关键词：医学微生物学
