施蓉
- 作品数：3 被引量：30H指数：3
- 供职机构：上海第二医科大学更多>>
- 发文基金：上海市高等学校科学技术发展基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 乙型肝炎病毒聚合酶链反应液相杂交酶免疫检测的定性判断值研究被引量：3
- 2001年
- 目的探讨乙型肝炎病毒 (HBV)聚合酶链反应 (PCR)液相杂交酶免疫检测的定性判断值设立和灰区范围的计算方法。方法以 HBV为目的靶 DNA,引物 P1 5’端标记 Bio,PCR扩增 35个循环。扩增产物与 5’端标记Dig的探针混合进行液相杂交 ,杂交后产物被 SA酶标板固定 ,经酶标记抗 Dig抗体结合、显色。结果实验结果显示 ,本试剂的检测敏感度在 3× 10 4拷贝 /m l。 3种参比品 A450 值的 95 %、99%分布范围之间不存在交叉区 ,其中临界阳性参比品 95 %分布范围下限值 (A450 )为 0 .182。 5 85例献血员血清标本的 A450 均值为 0 .0 37,P99上限值为 0 .12 3,灰区范围在 0 .12 3～ 0 .182。本试剂对“HBs Ag+/HBe Ag+/抗 - HBc+”标本的阳性检出率为 98.8% ,“HBs Ag+/抗 - HBe+/抗 - HBc+”标本的检出率为 5 4.8% ,阴性标本的检测有较高的特异性。结论本试剂设立的定性判断值(灰区计算方法 )具有很高的正确性。
- 李稻程新建施蓉杭勤黄冬生顾文莉姜节洪陶义训
- 关键词：乙型肝炎病毒聚合酶链反应酶免疫
- 液相杂交技术在聚合酶链反应酶联免疫检测的应用被引量：21
- 2001年
- 目的 采用液相杂交技术 ,简化核酸杂交过程 ,建立乙肝病毒 (HBV)的液相杂交的聚合酶链反应 酶联免疫检测 (PCR ELISA)方法。方法 将 5′端标记生物素的PCR扩增产物与 5′端标记地高辛的探针呈液相混合 ,90℃ 2min ,5 5℃ 1min杂交。杂交后产物被链霉亲和素酶标板固定 ,经酶标记抗地高辛标记抗体结合、显色。结果 液相杂交酶联免疫检测条件优化 :探针浓度 3pmol 次 ,酶标记抗体稀释度 1∶10 0 0。液相杂交时间 3min ,固相杂交时间 12 0min ,但其检测结果无明显差别。检测灵敏度 1× 10 4拷贝 ml,34份HBsAg(+ ) ,HBeAg(+ ) ,抗HBc(+ )标本的阳性检出率为 97.1% ;34份HBsAg(+ ) ,抗HBe(+ ) ,抗HBc(+ )标本的阳性检出率 6 7.7% ;17份HBsAg(+ )、抗HBc(+ )阳性检出率 5 8.8% ;其他免疫检测指标组合标本为 34份 (5 .9% ) ;34份献血员标本均为阴性。结论 在PCR ELISA中使用液相杂交技术可使实验操作简便、快速 。
- 李稻程建新罗伟施蓉杭勤黄东生顾文莉陶义训
- 关键词：核酸杂交聚合酶链反应酶联免疫检测
- 酶联杂交法定量检测乙型肝炎病毒DNA的聚合酶链反应产物被引量：7
- 1999年
- 近年文献报告采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）定量检测乙型肝炎（乙肝）病毒（ＨＢＶ）ＤＮＡ，但大多操作复杂，或需要特殊仪器设备。为此，我们建立了一种特异、灵敏、准确且简便的微孔板酶联杂交法，以定量检测ＨＢＶＤＮＡ的ＰＣＲ产物，报告如下。一、材料和方法１材...
- 顾文莉李稻黄冬生罗伟程新建施蓉陶义训
- 关键词：乙型肝炎病毒DNA聚合酶链反应
