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化学发光微粒子免疫分析法、酶联免疫吸附法在丙肝病毒抗体检测中的应用对比观察被引量：10: 2019年; 目的比较化学发光微粒子免疫分析(CMIA)法、酶联免疫吸附(ELISA)法在丙肝病毒抗体(HCV-Ab)检测中的应用效果。方法 190例疑似丙肝病毒感染者,收集空腹促凝血,分别采用CMIA法、ELISA法检测HCVAb,采用RFQ-RT-PCR检测HCV RNA。529例健康查体者,收集空腹促凝血,分别采用CMIA法、ELISA法检测HCV-Ab。精密度试验分析CMIA法、ELISA法检测HCV-Ab的精密度,绘制浓度与S/CO曲线分析CMIA法、ELISA法检测HCV-Ab的灵敏度。特异度实验分析CMIA法、ELISA法检测HCV-Ab的特异度。根据719例份(190例疑似丙肝病毒感染者+529例健康查体者)空腹促凝血HCV-Ab检测结果,比较CMIA法、ELISA法检测HCV-Ab的阴性、阳性一致率及总一致率。结果 190例份疑似丙肝病毒感染者中,CMIA法检测HCV-Ab阳性、阴性分别为190、0例,ELISA法分别为145、45例。529例份健康查体者标本中CMIA法检测阳性、阴性分别为0、529例,ELISA法分别为156、563例。CMIA法、ELISA法检测HCV-Ab的批内精密度水平1分别为4. 70%±0. 27%、7. 11%±0. 90%(P <0. 05),水平2分别为19. 10%±0. 59%、22. 08%±2. 22%(P <0. 05),CMIA法、ELISA法检测HCV-Ab的批间精密度水平1分别为4. 64%±0. 16%、6. 71%±0. 81%(P <0. 05),水平2分别为19. 11%±0. 48%、21. 39%±1. 67%(P <0. 05)。CMIA法检测HCV-Ab的灵敏度高于ELISA法(P <0. 05)。CMIA法与ELISA法检测HCV-Ab阴性一致率为97. 92%,阳性一致率为72. 32%,总一致率为92. 21%,两者一致率比较,χ2=4. 400,P <0. 05;CMIA与ELISA法HCV RNA检测阳性率分别为54. 21%和46. 32%,CMIA法的HCV RNA检测阳性率高于ELISA法(χ2=51. 045,P <0. 05)。结论与ELISA法比较,CMIA法测定HCV-Ab的精密度、灵敏度、特异度、阳性预测值均较高。; 薛海玲曾昭伟孙兰菊常艳敏; 关键词：化学发光微粒子免疫分析法酶联免疫吸附法丙肝病毒丙肝病毒抗体

检测重组蛋白表达情况的试剂盒及其使用方法: 本发明提供了一种检测重组蛋白表达情况的试剂盒及其使用方法，所述试剂盒包括偶联抗His-标签抗体的受体微球、生物素标记的多克隆抗体、亲和素标记的供体球。本发明基于抗原抗体特异性结合、生物素-亲和素放大系统、以及活性氧传递均...; 常艳敏李会芳孙兰菊侯丽英朱黎娜曾昭伟张伟; 文献传递

同型半胱氨酸、D-二聚体与急性胰腺炎严重程度的相关性研究被引量：3: 2020年; 目的:探讨同型半胱氨酸(Hcy)、D-二聚体(D-dimer)与急性胰腺炎(AP)严重程度的相关性。方法:选取2018年10月—2020年7月天津市南开医院住院和门诊收治的AP患者87例,根据病情严重程度分为轻度AP48例、重度AP组39例;选取同期健康体检者50例为对照组,检测各组的血清Hcy和D-dimer水平并进行比较,采用受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析Hcy、D-dimer对AP病情严重程度的预测价值。结果:AP组患者的血清Hcy、D-dmier水平明显高与对照组,差异有统计学意义(P<0.01),87例AP患者的血清Hcy和D-dmier的阳性率为71.26%、58.62%。AP组患者血清Hcy、D-dimer阳性率高于CON组,差异有统计学意义(P<0.001)。SAP组与MAP组患者的血清Hcy、D-dmier阳性率差异无统计学意义。Hcy、D-dmier的受试者工作特征曲线下面积(AUC)分别为0.956、0.722,差异有统计学意义,Hcy诊断AP的敏感度为92.0%,特异度为92.0%,分别高于D-dmier的78.2%及68.2%,差异有统计学意义(P<0.01)。Hcy检测对AP早期预测及严重程度评估的价值优于D-dmier检测。结论:AP患者Hcy和D-dmier水平高于对照组,且随着疾病严重程度的加深而增高,Hcy检测诊断AP的临床价值优于D-dmier检测。; 曾昭伟薛海玲陈淑莲常艳敏; 关键词：同型半胱氨酸 D-二聚体急性胰腺炎

2018—2021年临床常见胆道感染病原菌分布及耐药性变迁被引量：6: 2022年; 目的:分析2018—2021年我院胆道感染患者病原菌构成及耐药性变迁。方法:收集2018—2021年天津市南开医院胆道感染病原菌,采用VITEK2 Compact对其进行鉴定及药敏检测,药敏结果按照CLSI 2020年版标准判定,数据采用WHONET 5.6软件进行统计分析。结果:胆汁培养共分离出病原菌4906株,其中革兰阴性菌3306株,占67.39%;革兰阳性菌1494株,占30.45%;真菌106株,占2.16%。耐碳青霉烯的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌检出率分别为2.31%、12.99%。非发酵菌中碳青霉烯类耐药的铜绿假单胞菌(CRPA)和鲍曼不动杆菌(CRAB)检出率分别为62.88%、70.59%。耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌(MRSA)和耐甲氧西林的凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)检出率分别为45.71%、64.40%,未发现对万古霉素、喹努普汀/达福普汀、利奈唑胺、替加环素耐药的葡萄球菌属。肠球菌对万古霉素、利奈唑胺和替加环素的耐药性均较低,万古霉素耐药的屎肠球菌(VRE)检出率0.67%。结论:胆道感染患者病原菌以肠源性细菌为主,主要为革兰阴性菌,多重耐药菌增加,应密切关注胆道感染常见菌群的分布及耐药性变迁。; 薛海玲张爱民曾昭伟房杰陈明慧陈莎燕孙兰菊; 关键词：胆道感染胆汁病原菌抗菌药物耐药性

基于抗原表位分析的妊娠相关血浆蛋白A的克隆表达及其临床诊断应用研究: 目的：　　针对妊娠相关血浆蛋白A(PAPP-A)CDS区的特定抗原表位，利用重组克隆技术，制备PAPP-A重组蛋白，利用这种抗原蛋白免疫家兔，制备多克隆抗体，在此基础上制备酶标记抗体以及生物素化抗体。建立一种针对PAPP...; 曾昭伟; 关键词：妊娠相关血浆蛋白A 唐氏综合征急性冠状动脉综合征抗原表位血浆蛋白克隆表达; 文献传递

EPO酶联免疫检测方法学的建立与临床应用研究: 目的: 建立一种针对促红细胞生成素/(EPO/)的酶联免疫学检测/(enzyme linkedimmunosorbent assay,ELISA/)方法,建立相关的试剂盒。应用直接包被与间接包被方法。并运用此...; 曾昭伟; 关键词：促红细胞生成素生物素酶联免疫吸附试验缺铁性贫血; 文献传递

妊娠相关血浆蛋白A重组抗原表位分析及抗体制备被引量：1: 2013年; 目的探讨妊娠相关血浆蛋白A(PAPP-A)的抗原表位及抗PAPP-A抗体制备方法。方法把PAPP-A的CDS序列翻译成氨基酸序列,利用互联网分析蛋白的疏水性和信号肽区段,利用DNAstar软件分析二级结构、表面可及性、亲水性、抗原指数以及柔韧性,综合分析抗原表位。通过分子生物学技术制备重组PAPP-A,进而免疫新西兰家兔制备抗PAPP-A抗体。结果 PAPP-A抗原性较强,抗原优势表位位于23～94、1 110～1 131氨基酸区段;PAPP-A重组蛋白以及抗PAPP-A抗体制备成功。结论本研究方法建立了PAPP-A的高灵敏免疫检测体系,能进一步提高PAPP-A的临床应用价值。; 曾昭伟王学谦常艳敏蔡迪娅; 关键词：妊娠相关血浆蛋白A 抗原表位抗体

妊娠相关血浆蛋白A的原核表达及蛋白纯化被引量：1: 2016年; 目的构建原核表达PAPP-A重组蛋白,并对蛋白质进行纯化。方法根据DNAstar软件分析获得的编码PAPP-A特异抗原表位,利用Primer Premier 5.0软件设计引物,以PAPP-A c DNA-质粒转化菌液为模板,进行PCR扩增。PAPP-A的DNA和p ET42a质粒分别双酶切,经琼脂糖凝胶电泳及胶回收后进行连接反应,转化至大肠埃希菌Top10,筛选阳性克隆经测序鉴定正确后,转化至大肠埃希菌BL21,诱导产生PAPP-A重组蛋白,利用镍柱初步纯化及离子交换层析柱进一步纯化,用SDS-PAGE及DEAE层析鉴定重组抗原蛋白。结果筛选出抗原表位集中区,在大肠埃希菌BL21中高效表达了重组的PAPP-A蛋白,经过镍柱及离子交换层析纯化后,PAPP-A浓度为0.22 g/L,DEAE层析分析证实其纯度较高。结论成功筛选出PAPP-A的抗原表位集中区,并制备了重组抗原蛋白,为PAPP-A的后续临床研究提供依据。; 曾昭伟常艳敏王学谦; 关键词：妊娠相关血浆蛋白A 抗原表位原核表达

橘半枳术丸的质量标准被引量：3: 2012年; 目的:对橘半枳术丸的质量控制方法进行研究,建立橘半枳术丸定性和定量检测方法。方法:采用薄层色谱法对制剂中的枳实、陈皮、白术进行定性鉴别;采用HPLC法测定黄芩中黄芩苷的含量,甲醇-水-磷酸(47∶53∶0.2)为流动相,流速为1.0 ml.min-1,柱温:40℃,检测波长为280 nm。结果:TLC鉴别法能特征鉴别枳实、陈皮和白术,斑点显色清晰,阴性样品无干扰。黄芩苷在0.078～1.561μg范围内线性关系良好,平均加样回收率99.9%,RSD为1.49%(n=6)。结论:本法操作简便、准确、重复性好,可用于该制剂的质量控制。; 杨静马志鹏陈娜孙皓何姗曾昭伟; 关键词：枳实陈皮白术薄层色谱法黄芩苷

促红细胞生成素酶联免疫吸附测定法的研究被引量：1: 2009年; 目的:建立血清促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)的酶联免疫检测(ELISA)方法,观察其临床应用价值。方法:制备EPO多克隆抗体,异丙醇洗涤处理酶标板以增强其吸附能力,利用交叉反应法选择出抗原、抗体及酶标抗体的最佳的配对工作浓度。反应后,观察本方法的灵敏度、回收率、特异度、稳定性等指标,观察效果。以正常血清为对照组,测定缺铁性贫血组、乳腺癌组,并与放射免疫检测对比。结果:酶标板结合蛋白能力增强。抗体、酶标抗体、抗原最佳工作浓度分别为1∶1000,1∶6000,1∶800。灵敏度为0.46U/L,与生长激素、铁蛋白交叉反应率低;高浓度、低浓度样品平均回收率分别为96.3%、97.3%,批内和批间变异分别为8.31%、7.82%,稳定性好。乳腺癌组、缺铁性贫血组EPO水平均明显高于正常对照组。放射免疫检测及酶联免疫检测检出结果差别无统计学意义。结论:本血清EPO双抗体夹心ELISA法的建立在诊断相关疾病方面有一定的临床应用价值。; 曾昭伟王蕊孙辉; 关键词：红细胞生成素酶联免疫吸附测定乳腺肿瘤放射免疫测定

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曾昭伟

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