朱中元
- 作品数：62 被引量：225H指数：8
- 供职机构：海南农垦总局医院更多>>
- 发文基金：海南省自然科学基金海南省卫生厅科研基金海南省重点科技项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 结核分枝杆菌16kDa与GST融合表达及纯化被引量：1
- 2009年
- 目的:构建融合表达GST和结核分枝杆菌16kDa蛋白的表达系统,摸索表达条件及制备方法。方法:根据16kDa蛋白的基因序列设计引物,从结核菌基因组DNA中扩增该基因,酶切后插入表达载体,测序证实后转入大肠杆菌JM109菌株,经IPTG诱导表达,产物经谷胱甘肽-琼脂糖凝胶法纯化。结果:16kDa基因产物大小、酶切片断大小和载体的大小与设计一致、16kDa基因测序的结果与目的基因完全符合。表达纯化的蛋白的大小与蛋白质分子量标准相比较一致。结论:构建的表达载体成功,纯化的蛋白即为目的蛋白。
- 郭庆水朱中元罗越华王海波黄惜刘贤杰
- 关键词：结核分枝杆菌纯化
- 结核患者辅助性T细胞和C3b受体改变与BACTEC12B2培养…被引量：1
- 1997年
- 本文报道了ＢＡＣＴＥＣ１２Ｂ检测结核患者结核杆菌的结果与Ｔ细胞亚群和红细胞免疫粘附功能的关系。１２Ｂ培养阳性患者的ＣＤ＾＋３，ＣＤ＾＋４细胞和红细胞Ｃ３ｂＲＲ显著低于阴性患者。而痰涂片阳性患者仅ＣＤ＾＋３Ｔ细胞显著低于阴性患者。
- 朱中元张贵琛
- 关键词：BACTEC结核病辅助性T细胞
- 海口地区人乳头瘤病毒感染的分子流行病学研究被引量：2
- 2013年
- 利用PCR扩增和Southen杂交技术,对海口地区人乳头瘤病毒(HPV)型别进行了调查,结果显示,在所抽取的1 045份样本中,有436份检出HPV-DNA,总阳性率为41.72%(436/1 045),其中有337份只检出1种型别感染(单侵染),65份检出2种型别感染(二重侵染),34份检出3种或3种以上型别感染(三重或三重以上侵染),分别占感染样本的77.29%,14.91%和7.80%;在单侵染中,高危型所占比例为74.78%(252/337).不同型别的检出率从高到低分别是HPV16(22.25%),HPV58(17.89%),HPV43(16.74%),HPV52(16.06)和HPV6(8.94%).其中HPV16,HPV58和HPV43为高危型,其检出率较高,具有一定的区域性.
- 翁志聪朱中元蒋艳琴李敏
- 关键词：人乳头瘤病毒流行病学
- 基因芯片技术检测结核分支杆菌耐利福平基因突变的研究被引量：2
- 2008年
- 目的建立基因芯片检测结核分支杆菌耐利福平基因突变,结合基因测序和常规药物敏感性试验进行比较,探讨其实用价值。方法根据结核菌rpoβ基因突变特点,设计不同的寡核苷酸探针,点样制备可检测rpoβ基因突变的芯片,检测利福平(Rifompicin,RFP)株的rpoβ变异情况。结果137株临床分离结核菌,49株耐RFP,占35.8%,平均MIC为179.6±135.0μg/mL。Rpoβ突变率为95.7%(47/49),主要为点突变。突变点依次为531 Ser(TCG)→Leu(TTG)(40.8%)、531 Ser(TCG)→Trp(TGG)(12.2%)、526 His(CAC)→Tyr(TAC)(6.1%)、526 His(CAC)→Asp(GAC)(6.1%)、526 His(CAC)→Asn(AAC)(6.1%)、526 His(CAC)→Pro(CCC)(8.2%)、516Asp(GAC)→Val(GTC)(12.2%)、533Leu(CTG)→Arg(CGG)(4.1%)和513Gln(CAA)→Pro(CCA)(2.1%)。结论本研究建立的检测结核菌rpoβ基因突变的基因芯片技术敏感性高,特异性强,可应用于结核菌耐RFP基因的检测。
- 朱中元王海波谢勇谢萌王莉朱义明郭洁
- 关键词：结核分支杆菌利福平
- 耐多药结核杆菌分离林KatG及inhA基因变异的研究被引量：2
- 1999年
- 目的用直接测序法研究临床分离的多耐药结核杆菌的katG和inhA的基因变异机理。方法用未见报还katG和inhA基因中的片须为引物，PCR法扩增产物，克隆后大量制备质粒，经全自动测序系统测定其DNA序列。结果15株耐INH≥1ug/ml的细菌均有katG突变，主要为点突变。其中14株有463位和315位AA密码子改变。13个变异位点中，9个未见文献报告。关于inhA变异，在18个耐INH≥1ug/ml的菌株中，全部出现inhA基因变异，主要为点突变和缺失，其中又以单个位点变异为主。各菌株之间变异不同。耐式菌株中，katG和inhA同时出现变异的比例较大。结论结核杆菌耐药基因变异机理复杂，我国分离的多耐药结核菌株与国外的菌株上述二基因变异特点不同。
- 朱中元陈贻平陈允凤王海波张贵琛邵寒霜
- 关键词：结核杆菌多耐药KATGINHA
- 原发性肝癌患者血清中血管内皮生长因子的研究被引量：2
- 2004年
- 目的 探讨VEGF对PLC的诊断、疗效评估和复发监控的意义及与AFP的协同价值。 方法 用ELISA法测定69例PLC患者血清中VEGF和AFP。 结果 PLC组患者血清中VEGF水平 ( 4 3 2 4± 2 96 7)pg/ml与肝硬化组 ( 14 0 5± 89 1)pg/ml、乙型肝炎组 ( 12 9± 5 9)pg/ml及健康组 ( 12 9 4± 5 8 7)pg/ml比较 ,差异均有显著性 (P <0 ,0 1) ;血清VEGF和AFP对PLC诊断的阳性率分别为 72 :5 %和 73 9% ,二者联合应用对PLC诊断的阳性率和特异性分别为 85 5 %和 88 3 %。PLC患者血清VEGF水平手术前与手术后 1周无显著性差异 (P >0 0 5 ) ,而复发患者 ,其血清VEGF和AFP均高于参考值。 结论 VEGF对PLC诊断、疗效评估和复发监控有重要意义 ,和AFP联合应用可提高VEGF的监控价值。
- 姚中吉潘辅全王秀桂何长友朱中元段珊廖翠华
- 关键词：VEGFAFP血管内皮生长因子阳性率显著性差异
- 对各种结核杆菌培养方法的评价
- 1997年
- 张贵琛王莹莹肖友书陈允凤朱中元
- 关键词：结核病结核杆菌细菌培养
- 结核分枝杆菌DNA疫苗pVS85B的构建及免疫保护实验研究被引量：2
- 2006年
- 评价构建的结核DNA疫苗pVS85B免疫小鼠后脾细胞体外产生细胞因子和抵抗结核分枝杆菌H37Rv攻击的能力。利用基因操作技术将结核菌ag85b插入pVAX1载体,构建表达结核菌Ag85B分泌型蛋白的DNA疫苗pVS85B。将雌性C57BL/6小鼠分成5组,每组20只,分别用pVS85B、pVAX1、pIL2S和PBS分别免疫3次,均间隔2周,以相同剂量加强免疫2次。另一组用BCG(105CFU)免疫1次。每组10只鼠在最后一次加强免疫后,无菌取脾培养,检测上清细胞因子。另10只鼠用结核菌H37Rv经静脉攻击,2周后取脾、肝和肺培养结核菌并进行菌落计数。结果是pVS85B免疫组鼠脾淋巴细胞培养上清的mIL-2和mIFN-γ平均含量分别为(311.3±46.2)和(273.6±55.4)pg/ml,显著高于3个阴性对照组(P<0.001),与BCG免疫组无显著性差异(P>0.05)。5个组的平均mIL-6和mIL-10无显著性差异。pVS85B免疫组小鼠的脾、肝和肺的平均结核菌载量分别为(47 716.6±5 689.0)、(50 113.4±6 532.2)和(51 095.3±2 788.9)CFU/g,分别低于pVAX1、pIL2S和PBS三个阴性对照组的相应器官的结核菌载量(P<0.001)。pVS85B免疫组脾、肝和肺的结核菌载量显著高于BCG免疫对照组。提示,表达结核菌分泌型Ag85B的DNA疫苗pVS85B能够刺激机体产生抗结核菌所需的Th1型免疫应答,免疫鼠获得抵抗H37Rv攻击的能力。
- 刘建兵朱中元王海波谢勇张春发张颖
- 关键词：DNA疫苗结核分泌蛋白细胞免疫免疫保护
- 结核分枝杆菌MPT63抗原蛋白的表达及纯化
- 2011年
- 目的克隆结核分枝杆菌MPT63抗原蛋白的编码基因Rv1926c,并在大肠杆菌中表达纯化,获得结核分枝杆菌重组MPT63蛋白。方法以结核分枝杆菌H37Rv基因组为模板,PCR扩增Rv1926c基因编码序列,克隆入原核表达载体pET-30a,构建重组表达质粒,转化大肠杆菌后用IPTG诱导表达,纯化表达产物,获得重组MPT63抗原蛋白。结果测序表明重组质粒pET30aRv1926c具有正确的编码序列,质粒构建成功,重组蛋白MPT63在大肠杆菌中以包涵体形式稳定表达。结论结核分枝杆菌MPT63重组蛋白能在大肠杆菌工程菌种成功表达,为进一步的应用研究奠定基础。
- 杨倩朱中元王海波
- 关键词：结核分枝杆菌克隆蛋白
- 结核杆菌融合蛋白DNA疫苗构建及免疫保护研究
- 2006年
- 目的:评价结核DNA疫苗免疫鼠产生细胞因子和抵抗结核分枝杆菌攻击的能力。方法:将结核菌Mtb8.4基因和谷胱甘肽S转移酶基因插入pVAX1载体,构建表达Mtb8.4和GST融合蛋白的DNA疫苗pVS8.4G。小鼠分成5组,用pVS8.4G、pVAX1、pIL2S 100μg和PBS 0.1mL各免疫3次,间隔2w。另一组用BCG免疫1次。每组10只鼠在加强后,无菌取脾培养。另外10只小鼠用H37Rv攻击,2w后取脾、肝和肺培养结核菌并计数。结果:pVS8.4G免疫鼠脾细胞培养上清mIL-2和mIFN-γ平均为380.9和422.1pg/mL,显著高于阴性对照组,与BCG组无显著差异。5个组的平均mIL-6和mIL-10无显著差异。pVS8.4G免疫小鼠脾、肝和肺的平均结核菌载量分别为42 093.2、43 264.1和37 264.8CFU/g,低于pVAX1、pIL2S和PBS组相应器官的载量。结论:DNA疫苗pVS8.4G能刺激产生Th1型免疫应答,免疫鼠抵抗H37Rv攻击的能力增强。
- 朱中元王海波谢勇陈英兰郑冰冰张春发张颖
- 关键词：结核DNA疫苗免疫保护
