朱丽丹
- 作品数：7 被引量：9H指数：2
- 供职机构：河北农业大学植物保护学院更多>>
- 发文基金：国家现代农业产业技术体系建设项目公益性行业(农业)科研专项国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 五种杀菌剂对马铃薯晚疫病菌孢子萌发的抑制作用被引量：2
- 2015年
- 测定河北双吉75%代森锰锌水分散粒剂、河北双吉80%代森锰锌可湿性粉剂、美国陶氏80%代森锰锌可湿性粉剂、25%双炔酰菌胺悬浮剂和68.75%氟菌·霜霉威悬浮剂5种杀菌剂对马铃薯晚疫病菌[Phytophthora infestans(Mont.)de Bary]孢子囊直接萌发、间接萌发(释放游动孢子)及游动孢子萌发的抑制作用。结果表明,5种杀菌剂对孢子囊直接萌发的抑制效果均比较好,而对孢子囊间接萌发和游动孢子萌发的抑制效果各不相同。其中,河北双吉75%代森锰锌水分散粒剂和河北双吉80%代森锰锌可湿性粉剂对孢子囊直接和间接萌发的抑制效果最显著,浓度在5μg/m L以上时抑制率均为100%。美国陶氏80%代森锰锌可湿性粉剂和25%双炔酰菌胺悬浮剂,浓度在20μg/m L时几乎能完全抑制孢子囊的直接萌发或间接萌发,68.75%氟菌·霜霉威悬浮剂对孢子囊间接萌发的抑制作用相对较差。游动孢子的萌发对5种药剂较为敏感,1μg/m L的药剂浓度就能使游动孢子萌发得到显著抑制。
- 朱丽丹徐进杨志辉朱杰华赵冬梅
- 关键词：杀菌剂孢子萌发抑制率
- 致病疫霉NLP家族基因PITG_10839的克隆和功能分析被引量：1
- 2014年
- 【目的】分析致病疫霉(Phytophthora infestans)NLP(Necrosis-and ethylene-inducing like proteins)家族基因PITG_10839的致坏死功能及所编码蛋白的活性位点对其功能的影响。【方法】以PITG_10839作为研究对象,选inf1作为正对照,以致病疫霉菌株HK09-19的总RNA为模板,通过RT-PCR获得基因的cDNA全长序列。将所得cDNA与表达载体pBI121连接,构建所选基因的重组表达载体,并采用冻融法将其转入农杆菌LBA4404中。利用农杆菌介导的瞬时表达体系在本生烟(Nicotiana benthamiana)中对PITG_10839的表达和功能进行分析。利用over-lap PCR方法定点突变基因PITG_10839的活性位点,同时构建活性位点突变后的重组表达质粒,并通过农杆菌注射接种本生烟来研究各活性位点在基因坏死功能中所起的作用。通过荧光定量PCR分析致病疫霉游动孢子侵染马铃薯叶片后不同时期PITG_10839的表达模式。【结果】获得了PITG_10839和inf1的全长cDNA,分别为405及357 nt。同时,成功构建了PITG_10839和inf1的真核表达载体pBI121-10839和pBI121-inf1,并成功转入农杆菌。将含有重组质粒pBI121-10839的农杆菌注射接种本生烟,5 d后接种叶片开始逐渐黄化,7 d后叶片出现典型的皱缩坏死症状。然而含有对照重组质粒pBI121-inf1的农杆菌在注射接种3 d后,本生烟叶片便开始出现萎蔫,5 d时则出现坏死症状,7 d时坏死症状严重。进一步对PITG_10839编码蛋白的活性位点进行突变,发现D9A、E22A和D20A 3个氨基酸位点的突变使基因PITG_10839所编码蛋白的致坏死功能丧失,叶片仅出现轻微的黄化现象,然而H17A位点氨基酸的突变对该基因的致坏死功能没有影响,注射接种7 d后,仍然可以使本生烟叶片出现皱缩坏死的症状。同时,荧光定量PCR表明,致病疫霉游动孢子接种后不同侵染阶段PITG_10839的表达呈现出了不同水平的增加。接种后12 h至36 h,表达量变化水平稳定,增加了20倍左右;48 h�
- 赵冬梅杨志辉徐进朱杰华朱丽丹
- 关键词：致病疫霉功能分析
- 致病疫霉NPP1-like和PcF//SCR-like坏死基因功能研究
- 由致病疫霉（Phytophthora infestans）引起的马铃薯晚疫病是世界范围内普遍发生的一种马铃薯病害，给全球马铃薯生产造成了巨大的经济损失。致病疫霉属于卵菌（Oomycota），卵菌病原物能分泌多种效应分子，...
- 朱丽丹
- 关键词：致病疫霉
- 文献传递
- 我国马铃薯主要土传病害发生与防治研究进展
- 马铃薯土传病害正日趋成为限制我国马铃薯产业的可持续发展的重要因素。本文简要综述了我国马铃薯土传病害的发生和危害,总结了土传病害危害的特点,并概述了我国马铃薯土传病害的主要防治方法和研究进展。
- 朱杰华齐明星周园张春艳王倩朱丽丹杨志辉
- 关键词：马铃薯土传病害防控技术
- 文献传递
- 疫霉属果胶裂解酶基因家族的系统发育分类被引量：1
- 2013年
- 以疫霉属果胶裂解酶(pectin lyase,PL)基因家族的蛋白序列为材料,用邻接法和最小进化法构建系统发育树,根据所形成的分支确定PL基因家族的类群和分布规律。研究了疫霉属(Phytophthora)的果胶裂解酶基因家族的类群及在病原菌间的分布规律,以期为研究病原菌果胶裂解酶的专化性和病原菌的寄主专化性的关系奠定基础。结果表明:所构建的疫霉属PL基因家族的系统发育树共形成了11个分支,分别将其命名为PL1~PL11。其中,致病疫霉、橡树疫霉和大豆疫霉等3个病原疫霉属所共有的分支为5个,即PL1、PL6、PL7、PL10和PL11。橡树疫霉和大豆疫霉共有的分支为PL8。而上述3种疫霉均具其独有的1~2个分支,即PL4为橡树疫霉特有的分支,PL3和PL5为大豆疫霉的特有的分支,而PL2和PL9是致病疫霉特有的分支。利用疫霉果胶裂解酶基因家族的系统发育树的分支对其进行了分类和命名,并探究了疫霉属病原菌果胶裂解酶基因家族的分化与其寄主专化性的关系。
- 齐明星朱杰华杨志辉杨玉荣朱丽丹
- 关键词：疫霉属果胶裂解酶系统发育树专化性
- 致病疫霉NLP家族基因PiNLP30的克隆、原核表达及蛋白质纯化被引量：1
- 2014年
- 为了制备致病疫霉NLP家族中PiNLP30蛋白的多克隆抗体,根据GenBank中PiNLP30的cDNA序列及原核表达载体pET28b中的多克隆位点设计引物,对PiNLP30基因进行RT-PCR扩增和重组质粒pET28b-PiNLP30的构建,将重组质粒在大肠杆菌BL21(DE3)表达体系中进行诱导表达,通过SDS-PAGE检测蛋白质表达,并利用镍琼脂糖亲和层析进行蛋白质纯化。克隆和序列分析显示,该基因cDNA全长714bp,编码237个氨基酸。该基因编码蛋白质是一个主要由不规则卷曲组成的亲水蛋白,含有一段19个氨基酸的信号肽序列。预测蛋白质分子量为26.6kD,等电点5.49。经PCR、酶切及测序验证,成功构建了原核表达载体pET28b-PiNLP30,使用0.6mmol/L IPTG于37℃下诱导6h后蛋白质大量表达,表达的蛋白质主要以包涵体形式存在。经镍琼脂糖亲和层析进行纯化,获得了纯化的PiNLP30蛋白,其质量浓度约为0.3mg/mL。
- 朱丽丹朱杰华赵冬梅杨志辉徐进
- 关键词：致病疫霉基因原核表达蛋白质纯化
