朱敏
- 作品数:5 被引量:2H指数:1
- 供职机构:南通医学院神经科学研究所江苏省神经再生重点实验室更多>>
- 发文基金:江苏省教育厅自然科学基金江苏省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- β-1,4-半乳糖基转移酶Ⅱ、Ⅴ表达的亚细胞结构定位研究
- 2003年
- 为了研究β-1,4-半乳糖基转移酶 和 (β-1,4-Gal T- and )蛋白表达的亚细胞结构定位 ,本实验构建了β-1,4-Gal T- 和 融合绿色荧光蛋白 (GFP)表达质粒 ,分别将构建的质粒转染到 PC12细胞和肝癌 772 1细胞中 ,在荧光显微镜下观察β-1,4-Gal T- 和 在其中表达的亚细胞结构定位。发现 ,β-1,4-Gal T- 和 主要表达在这两种细胞的细胞核旁的 Golgi复合体 ,说明它们主要分布在 Golgi复合体上。提示它们可能是在
- 沈爱国何江虹丁斐朱敏王汉洲顾建新
- 关键词:Β-1,4-半乳糖基转移酶亚细胞结构肝癌细胞
- β-1,4半乳糖基转移酶-I在大鼠坐骨神经损伤后的表达变化被引量:2
- 2003年
- 目的 分析 β 1,4半乳糖基转移酶 I (β 1,4 galactosyltransferaseI,β 1,4 GalT I)mRNA在正常和损伤坐骨神经髓鞘上的定位及其表达变化。方法 采用RT PCR方法 ,分析 β 1,4 GalT I在小鼠坐骨神经中的表达水平。将RT PCR扩增的 β 1,4 GalT I片段 ,克隆到pGEM T载体中。采用体外转录的方法合成地高辛标记的正、反义 β 1,4 GalT IRNA探针。通过原位杂交及图像分析的方法 ,分析 β 1,4 GalT ImRNA在正常和损伤大鼠坐骨神经的定位及其表达变化。结果 检测到 β 1,4 GalT I在大鼠坐骨神经的髓鞘中有表达 ,并在坐骨神经损伤后 1~ 2d内表达最高 ,随后表达下降。结论 提示 β 1,4 GalT I可能在周围神经最主要的胶质细胞—施万细胞中表达 ,并在周围神经损伤后发生表达变化 ,这样为进一步分析 β 1,4 GalT I在周围神经再生中的调控机制奠定基础。
- 朱敏沈爱国丁斐顾建新顾晓松
- 关键词:坐骨神经损伤RNA探针原位杂交胶质细胞
- β-1,4半乳糖基转移酶-Ⅰ在大鼠坐骨神经髓鞘中的表达
- 2003年
- 目的 :分析β -1,4半乳糖基转移酶 -Ⅰ(β -1,4-galactosyltransferaseⅠ ,β -1,4-GalT -Ⅰ)mRNA在正常和损伤坐骨神经髓鞘上的定位及其表达变化。方法 :首先采用RT -PCR方法 ,分析 β -1,4-GalT -Ⅰ在小鼠坐骨神经中的表达存在。以RT -PCR扩增的DNA片断 ,将其克隆到pGEM -T载体中。采用体外转录的方法合成地高辛标记的正、反义 β -1,4-GalT -ⅠRNA探针。最后通过原位杂交及图像分析的方法 ,分析 β -1,4-GalT -ⅠmRNA在正常和损伤大鼠坐骨神经的定位及其表达变化。 结果 :首先通过RT -PCR方法 ,检测到 β -1,4-GalT -Ⅰ在小鼠坐骨神经中的表达存在。应用地高辛标记的正、反义β -1,4-GalT -ⅠRNA探针 ,通过原位杂交发现 β -1,4-GalT -Ⅰ在大鼠坐骨神经的髓鞘中表达 ,并发现其在坐骨神经损伤后 2~ 3天内表达最高 ,随后表达下降。结论 :本实验发现 β -1,4-GalT -Ⅰ在坐骨神经主要表达在髓鞘中 ,并在坐骨神经损伤后发生表达变化。这样把 β -1,4-GalT -Ⅰ的修饰调控功能和雪旺氏细胞的功能相联系在一起 ,为进一步分析β -1,4-GalT
- 朱敏沈爱国丁斐顾建新顾晓松
- 关键词:雪旺氏细胞
- β-1,4-半乳糖基转移酶Ⅱ、Ⅴ表达的亚细胞结构定位研究
- 2003年
- 目的 :研究 β1,4-半乳糖基转移酶II和V(β1,4-galactosyltransferaseⅡandⅤ ,β -1,4-GalT -ⅡandⅤ )蛋白表达的亚细胞结构定位。方法 :构建 β -1,4-GalT -Ⅱ和Ⅴ融合绿色荧光蛋白 (greenfluorescenceprotein ,GFP)表达质粒 ,分别将构建的质粒转染到PC12细胞和肝癌 772 1细胞中 ,荧光显微镜下观察 β -1,4-GalT -Ⅱ和Ⅴ在其中表达的亚细胞结构定位。 结果 :β -1,4-GalT -Ⅱ和Ⅴ主要表达在这两种细胞细胞核旁的高尔基复合体。结论 :β -1,4-GalT -Ⅱ和Ⅴ主要分布在高尔基复合体上 。
- 严美娟沈爱国朱敏王汉洲顾建新
- 关键词:亚细胞结构高尔基复合体
- β1,4-半乳糖基转移酶-I表达质粒在许旺细胞中的转染与鉴定
- 2003年
- 目的 构建 β1,4 半乳糖基转移酶 I(β1,4 galactosyltransferaseI,β 1,4 GalT I)表达质粒 ,并将其转染到许旺细胞中 ,为探讨周围神经许旺细胞表达 β 1,4 GalT I的生物学意义提供研究基础。 方法 构建 β 1,4 GalT I表达质粒 ,并将其转染到分离培养的许旺细胞中 ;用特异识别 β1,4 半乳糖苷键的蓖麻凝集素 I(RicinusCommunisAgglutinin I,RCA I)免疫组织化学方法和NorthernBlot鉴定转染情况。结果 通过酶切鉴定和测序分析 ,实验成功构建 β 1,4 GalT I表达质粒。将构建的表达质粒转染到许旺细胞中 ,经鉴定表明 ,转染的表达质粒在许旺细胞中能表达 β 1,4 GalT I,并随转染浓度增高而表达增加。 结论 β 1,4 GalT I在许旺细胞中的转染和表达 ,对分析许旺细胞表达 β 1,4 GalT I的意义如对其自身增殖的影响和对神经元生长作用 。
- 沈爱国丁斐朱敏龚蕾蕾王汉洲顾建新
- 关键词:许旺细胞转染表达质粒周围神经