朱浩君
- 作品数：5 被引量：28H指数：4
- 供职机构：华中农业大学生命科学技术学院农业微生物学国家重点实验室更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学更多>>
- Avermectin C5-O-甲基转移酶基因的克隆、序列分析及其基因置换被引量：12
- 2003年
- C5 O 甲基转移酶基因 (aveD)位于阿维链霉菌 (Streptomycesavermitilis)染色体 3 4kbBamHI的片段上 ,通过构建avermectin基因组约 3 4kbBamHI片段的亚基因文库 ,用PCR的方法获得该基因的连锁基因C5 酮基还原酶基因 (aveF) ,并作为探针筛出aveD的克隆子。测序后和GenBank做同源比较 ,结果一致。构建基因置换穿梭载体 pHJ5 80 3 (pHZ13 5 8∷aveD&Amr) ,通过ET12 5 67::pUZ80 0 2属间接合转移导入S .avermitilis。放松培养后筛选出双交换重组菌株 ,并用PCR验证重组菌株的aveD已经破坏 ,将重组菌株摇瓶发酵液提取avermectin进行色谱质谱联机分析 ,发现重组菌株仅产生 4个组分 ,与出发菌株的 4个B组分完全一致。
- 朱浩君郑应华
- 关键词：AVERMECTIN基因置换
- 阿维链霉菌bkdAB的基因中断对阿维菌素合成的影响被引量：9
- 2004年
- 以阿维菌B组分菌株StreptomycesavermitilisBjbm0 0 0 6为出发菌株 ,用PCR的方法构建bkdAB基因簇(Branched_chainα_ketoaciddehydrogenasegeneAB)的基因置换质粒pHJ582 1(pHZ13 58∷bkdAB&erm) ,并对其进行基因中断 ,得到重组菌株Bjbm582 1。Bjbm582 1的发酵产物经HPLC检测发现 ,除了产生B1a和B2a外 ,还产生一种原菌株没有的新组分 ,3个组分的总含量只有出发菌株Bjbm0 0 0 6的 2 5%。结果表明bkdAB的中断不仅部分阻断了阿维菌素的合成 ,还阻断了阿维菌素b组分的合成 ,可以推测bkdAB的产物在阿维菌素合成途径中主要承担了α酮基异戊酸脱氢酶 (α_ketoisovalericaciddehydrogenase)
- 朱浩君梁运祥周俊初郑应华
- 关键词：阿维链霉菌基因中断阿维菌素生物合成
- 阿维菌素有效组分的定点改造
- 阿维菌素(avermectin)是一组含有8个组分(Bla、B2a、B1b、B2b、A1a、A2a、A1b和A2b)的大环内酯类衍生物.其中avermectin Bla的生物活性最强.该研究通过基因置换技术定位中断了av...
- 朱浩君
- 关键词：阿维菌素基因置换核磁共振发酵工艺
- 阿维链霉菌bkdF的基因中断对阿维菌素合成的影响被引量：6
- 2004年
- 以阿维菌素B组分菌株StreptomycesavermitilisBjbm0 0 0 6为出发菌株 ,用PCR方法构建支链α 酮酸脱氢酶基因bkdF(Branched chainα ketoaciddehydrogenasegene)的重组质粒pHJ5 816 (pHZ135 8 bkdF&Ermr)对其进行基因中断 ,得到重组菌株Bjbm5 816。经HPLC检测和核磁共振分析发现 ,Bjbm5 816发酵产物产生的单一组分新化合物为Oligo mycinA。
- 朱浩君梁运祥周俊初郑应华
- 关键词：阿维链霉菌阿维菌素基因中断菌株生物合成
