李怀方
- 作品数：98 被引量：918H指数：15
- 供职机构：中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所国家林业局森林保护学重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金科技基础性工作专项国家攀登计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学自动化与计算机技术经济管理更多>>
- 西瓜种传尖孢镰刀菌致病性及其粗毒素对种子发芽的影响被引量：14
- 2010年
- 采用浸胚根法和浸根法对京欣一号西瓜种壳分离得到的尖孢镰刀菌（Fusarium oxysporum）进行致病性试验。结果表明：从接种后发病幼苗上分离得到的分离物与最初接种所用的镰刀菌菌落形态和生长速率等性状基本相同,采用相同的引物对rDNA进行PCR扩增获得的核苷酸序列完全相同,说明这二者为同一种菌,从而证明西瓜种子上所携带的尖孢镰刀菌具有致病性,在国内首次报道了西瓜种传尖孢镰刀菌具有致病性。西瓜种传尖孢镰刀菌培养滤液和粗毒素提取物处理西瓜种子后,种子的发芽势、发芽率和发芽指数均显著降低,其中发芽势下降了16.7%-29.0%,发芽率下降了14.4%-22.3%,发芽指数下降了19.1%-37.1%,说明培养滤液和粗毒素提取物可影响西瓜种子发芽。
- 吴学宏卢志军陈倩韩鲁明李怀方古勤生
- 关键词：西瓜尖孢镰刀菌粗毒素
- 烟草花叶病毒侵染番茄后内源细胞分裂素的变化
- 李怀方
- 关键词：烟草花叶病毒番茄
- 钙、镁离子对烟草花叶病毒侵染的抑制作用被引量：6
- 1994年
- 用珊西烟半叶法接种，测定了钙、镁离子以及离子螯合剂（ＥＤＴＡ）等对ＴＭＶ浸染的抑制作用。结果高浓度的钙离子或镁离子溶液与等体积的ＴＭＶ稀释液混合接种，显著地抑制病毒的侵染（抑制率高达８０％─９０％）；而且处理半叶上的枯斑直径小于对照，用ＥＬＩＳＡ方法检测病毒明显减少。接种前、后间隔一定时间使用钙、镁离子，抑制率仍在５０％─９０％；ＥＤＴＡ的作用依赖于叶片生理状态。说明植物、病毒与此二离子间存在复杂的相互关系。
- 李怀方张莉
- 关键词：钙离子镁离子花叶病毒侵染
- 树舌MP-01菌株提取液抑制TMV生物活性研究被引量：6
- 2007年
- 本实验从病毒体外钝化、抑制病毒初侵染、抑制病毒增殖和诱导抗性4个方面测定了树舌MP-01菌株提取液对烟草花叶病毒(TMV)生物活性的影响。结果表明,MP-01菌株提取液对TMV体外钝化效果显著;对TMV初侵染、增殖有一定的抑制作用,且能诱导烟草产生一定的抗病性。
- 黄金光李怀方宋爱荣
- 关键词：树舌烟草花叶病毒生物活性
- 根癌农杆菌对感染植原体的泡桐组培苗症状的影响被引量：9
- 2001年
- 采用含有激素合成相关基因的根癌农杆菌 ,伤口接种已感染植原体的泡桐丛枝组培苗和健康组培苗 ,结果发现对丛枝苗的致瘤能力明显低于健康对照苗 ,且被接种病苗的丛枝症状缓解。从健苗获得的 T- DNA转化泡桐瘤组织细胞能在无激素培养基上稳定生长和连续继代培养 2年以上 ,说明瘤组织细胞自身已获得了细胞分裂素和生长素合成能力。根据已报道的根癌农杆菌株系p Til5955T- DNA的异戊烯基转移酶基因 ( ipt)的保守序列 ,设计了一对引物 ( CYT和 CYT′) ,用多聚酶链式反应 ( PCR)扩增了我国杨树致瘤农杆菌 ipt基因部分序列 ( 4 2 7bp片段 ) ,也从遗传转化的两个泡桐无性系瘤组织 At- ZH和 At- T35扩增出此特异片段 ,从而进一步肯定了 T- DNA已被整合到泡桐的染色体上 ,表明泡桐易于通过 Ti质粒载体途径进行基因转移操作 ,但用此引物未能从泡桐、甘薯健株和感染植原体的组培病苗扩增出相应的 4 2 7bp特异片段。当用此遗传转化瘤组织嫁接病苗时 ,可减轻丛枝症状的严重度 ,延长病苗的存活时间和诱导病株生根 。
- 田国忠朱水芳罗飞李怀方裘维蕃
- 关键词：根癌农杆菌病害症状异戊烯基转移酶基因组培苗
- 电生功能水防治葡萄炭疽病的药效试验被引量：4
- 2005年
- 经田间试验表明,电生功能水防治葡萄炭疽病能达到较75%百菌清可湿性粉剂700倍稀释液更好的防治效果,且对葡萄生长未造成任何生理障碍,在十分易于发生炭疽病的条件下防治效果达40%,而百菌清防效仅达28%。
- 李里特肖卫华武龙李怀方
- 关键词：葡萄炭疽病电生功能水药效试验田间试验生理障碍稀释液
- 西瓜种传镰刀菌形态和分子鉴定及其对种子发芽的影响被引量：26
- 2009年
- 采用洗涤检验法和PDA培养基法,从京欣一号和新京欣一号西瓜种子的种壳上分离得到镰刀菌,通过形态学观察和分子检测进行了鉴定,并研究了其对种子发芽的影响。通过菌落形态、色素颜色、菌落生长速率、大型分生孢子、小型分生孢子、厚垣孢子以及分生孢子梗等形态学观察,初步认为其为尖孢镰刀菌;采用真菌rDNA ITS区的通用引物、镰刀菌属特异性引物和尖孢镰刀菌特异性引物对其DNA进行PCR扩增,PCR产物经连接转化并验证后测序,将测序结果登录GenBank进行BLAST分析,分子检测结果与形态学观察结果一致,表明西瓜种子种壳携带的镰刀菌为尖孢镰刀菌,此结果为国内首次报道。用种传尖孢镰刀菌孢子悬浮液处理西瓜种子后,发芽势、发芽率和发芽指数均显著降低。
- 吴学宏韩鲁明陈倩李怀方古勤生
- 关键词：西瓜尖孢镰刀菌形态学观察分子鉴定种子发芽
- 马铃薯Y病毒属病毒HC-Pro研究进展被引量：6
- 2000年
- 马铃薯Y病毒属病毒HC -Pro是一种多功能的蛋白 ,参与病毒多聚蛋白的酶切加工、病毒的蚜传、病毒在细胞间和长距离移动、影响病毒的复制、毒性和症状表达 ,并可抑制植物的基因沉默机制。本文介绍了这几个方面的研究进展 ,并讨论了HC
- 李向东李怀方范在丰裘维蕃
- 关键词：马铃薯Y病毒属HC毒性酶切症状
- 全文增补中
- 甘蔗花叶病毒HC-Pro基因原核表达及表达产物抗血清制备被引量：6
- 2006年
- 采用RT-PCR方法自甘蔗花叶病毒北京玉米分离物(SCMV-BJ)的基因组中分离出其HC-Pro基因,通过T4DNA聚合酶连接到原核表达载体pET-22b(+)上,获得的重组子pETHC转化大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG在37℃进行诱导表达。SDS-PAGE和Westernblot分析表明,HC-Pro基因在大肠杆菌中获得了高效表达,产生分子量约为52kDa的融合蛋白。将融合蛋白纯化后免疫兔子,获得了特异性的抗血清并提取了抗体IgG。ACP-ELISA测定抗血清的效价为1/8192。结果表明,该血清可用于SCMV-BJ的检测,并为进一步分析HC-Pro的功能奠定基础。
- 梁新苗范在丰李怀方
- 关键词：甘蔗花叶病毒原核表达抗血清ELISA
- 脱叶琼脂培养法饲养介体桃蚜的研究
- 1992年
- 本文报道一种饲养传毒介体桃蚜(Myzus persicae)新方法——脱叶琼脂培养法。将一定叶龄的植物叶片剪下,在1%琼脂培养基(含 N、P、K 等营养元素,抗生素及抑真菌剂)上培养。结果表明,油青菜(Brassica chinensis)、白菜(Brassica pekinensis)、萝卜(Raphanus sativus L.)、烟草(Nicotiana tabacum)不同叶位的脱叶在培养基上保持鲜活状态可达2—3周,脱叶保鲜时间与叶龄呈负相关,与培养基营养成分有密切联系。生化测定结果表明,油青菜脱叶离开植物母体后生理变化明显,可溶性氮含量增高,在一定时间内(9天以内),脱叶下表皮细胞渗透压及可溶性 C/N 值与对照叶无显著差异。饲养器置于光照培养箱中(LRH-250G),在24±1℃,15小时光照/24小时,0—7000lx、光强的条件下饲养桃蚜。结果表明,于培养的脱叶上饲养桃蚜,其死亡失踪率明显低于对照,每雌产仔数也显著增多。
- 杨普云雷新云李怀方裘维蕃
- 关键词：桃蚜传毒介体
