李波
- 作品数：47 被引量：203H指数：9
- 供职机构：新疆农业科学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金新疆维吾尔自治区高技术研究发展计划项目国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程更多>>
- 棉花咖啡酸-O-甲基转移酶基因（GhCOMT）的克隆、表达及功能分析
- 棉花纤维是从胚珠外表皮细胞分化而来的单细胞,是纺织工业的重要原料,具有重要的经济价值。棉花体内通过苯丙氨酸途径进入木质素特异途径合成木质素,这条代谢途径涉及许多酶的参与,其中咖啡酸-O-甲基转移酶（caffeic aci...
- 李波
- 关键词：棉纤维原核表达GUS基因
- 干旱处理对不同棉花材料SOD,CAT,MDA的影响被引量：15
- 2008年
- 将28份不同的棉花材料,分别种植于干旱处理、对照(正常浇水)条件下,试验设2次重复。分别于苗期和开花期测定了干旱处理、正常浇水条件下28份棉花材料的超氧化物歧化酶(SOD)活性、过氧化氢酶(CAT)活性、丙二醛(MDA)含量的变化。结果表明,干旱处理后,28份棉花材料叶片的SOD,CAT,MDA均发生了变化,经3项生理指标的综合分析并结合28个棉花材料的抗旱性表现,筛选出具有较强抗旱能力的棉花材料为红叶白絮、红叶棉、硕丰1号、新陆早1号;不抗旱的棉花材料有:石阳1号、库车96518和新炮1号。
- 于健陈全家李波贺雅婷高文伟曲延英
- 关键词：棉花干旱处理开花期生理生化指标
- 棉花肉桂醇脱氢酶基因GhCAD3的克隆及原核表达被引量：10
- 2010年
- 肉桂醇脱氢酶(CAD)是木质素生物合成过程中的一个关键酶类。本研究从棉花中克隆了一个CAD基因,命名为GhCAD3(GenBank登录号为FJ376601)。GhCAD3全长1573 bp,具有1个1080 bp的开放阅读框,5′非编码区为35 bp,3′非编码区为458 bp,编码359个氨基酸,预测分子量约为39.116kD,等电点为7.48。氨基酸同源性分析发现,GhCAD3与其他CAD一致性为64.13%。为了进一步研究GhCAD3基因的功能,构建了该基因的原核表达载体pET-28a-CAD3,经酶切鉴定后转化到大肠杆菌BL21(DE3)中。SDS-PAGE电泳分析表明,最佳诱导表达条件为0.5 mmol/L IPTG在37℃下诱导7 h。
- 倪志勇李波范玲
- 关键词：棉花肉桂醇脱氢酶原核表达
- 棉花转基因“喷花法”应用条件优化的研究被引量：1
- 2013年
- 针对目前众多的棉花转基因方法存在转化过程复杂、成本高、效率较低等问题，实验对转基因方法一“喷花法”进行优化，明确了在棉花育种科研中应用条件，达到快速、高效转化外源基因的目的。实验选用了5个陆地棉品种（系）和2个海岛棉品种为转化受体材料，转化了2个外源基因-抗虫（Bt＋CpTI）和增强纤维品质基因（NPTII-GhCAD6），并对转化时等渗液各成分的比例、转化的时间段、温度及湿度条件等因素对转化率的影响进行研究。结果表明，转化效率最高时等渗液各成分的含量：陆地棉为1／2MS＋10％蔗糖＋0．5g／LMES＋0．01mg／L6-BA＋200μl／／L表面活性剂，pH=6菌株浓度OD600=0．5；海岛棉为1／2MS＋15％蔗糖＋0．5g／LMES＋0．01mg／L6-BA＋200μl／L表面活性剂，pH=6菌株浓度OD600=0．5；转化效率最高时转化的时间段为11：00—13130，相应的温度为22～29℃、湿度为70％-85％；转化后的哟代受体材料，首先在田间进行抗生素检测，然后在获得的阳性植株中，转抗虫基因材料用金标BT-CryIAb／Ac试纸条定性检测，转纤维品质基因材料做PCR电泳检测，经检测最终获得了一批转基因阳性植株。最终建立一种应用在农业育种科研中大批量、高效快速、简易实用的转基因方法。
- 聂新辉尤春源雷江荣杨洋李波李晓东吕军冯国礼孔杰张大伟
- 关键词：棉花转基因
- 棉花SNC2基因的克隆及表达分析
- 2017年
- 以陆地棉(Gossypium hirsutum)TM-1为材料,利用同源克隆技术从棉花中分离出SNC2基因,以actin基因为内参,采用半定量RT-PCR分析该基因在棉花组织中的表达,并采用实时定量RT-PCR分析不同棉花品种经大丽轮枝菌侵染后,SNC2基因在不同时段、不同组织的表达水平。研究分析发现该基因CDS序列长度为1 308 bp,编码435个氨基酸,蛋白的等电点(p I)为6.98,理论分子量为46.93 k D,命名为SNC2,Gen Bank登录号为AOO35322.1,SNC2基因编码多肽链中包含信号肽和跨膜结构域,且亚细胞定位于质膜,编码受体类蛋白。组织表达分析显示SNC2基因在根、侧根、茎、叶和花中均有表达,茎中的表达量较高,而在苞片组织中基本不表达。该基因在接菌后的感病品种军棉1号的根和耐病品种中棉49号的茎中呈现不断上升的趋势,而在两个棉花品种的其他组织中呈现出"升-降-升"的趋势,且在不同抗性的棉花品种中的表达存在差异,暗示SNC2基因可能在不同抗性品种抵御生物胁迫过程中扮演重要角色,研究结果为进一步研究SNC2基因的功能及应用该基因提供帮助。
- 陈方圆王冬梅李波胡文冉杨洋李晓荣范玲
- 关键词：棉花基因克隆实时荧光定量
- 新疆节水灌溉现状及其展望被引量：9
- 1996年
- 本研究在总结新疆节水灌溉经验教训的基础上，指出今后新疆节水灌溉的发展方向和研究解决的问题。
- 赵荣海李波张宗友
- 关键词：灌水技术节水农业灌溉
- 棉花GhCOMT3基因的原核表达、纯化及鉴定被引量：6
- 2010年
- 为了深入研究GhCOMT3基因的功能,将GhCOMT3基因构建到原核表达载体pET-28a中,并转化到大肠杆菌BL21(DE3)中。用0.2mmol/L IPTG诱导融合蛋白表达,结果发现,16℃诱导12h、30℃诱导3h和37℃诱导3h后融合蛋白均以包涵体的形式表达;30℃诱导的蛋白表达量最大,之后对包涵体进行变性溶解,进行SDS-PAGE检测,再经过蛋白标记亲和层析柱(His TrapTMHP)纯化得到变性的pET-28a-GhCOMT3融合蛋白,用SDS-PAGE和Western blotting检测纯化效果,鉴定表达产物,目的蛋白相对分子量约为39.119kDa,检测结果与预期一致。结果表明,pET-28a-GhCOMT3蛋白在大肠杆菌中获得了高效表达产物,为在蛋白水平上研究GhCOMT3基因功能奠定了基础。
- 李波倪志勇范玲
- 关键词：原核表达蛋白纯化WESTERNBLOTTING
- 棉花肉桂醇脱氢酶基因在棉纤维中的表达及对其结构组分的影响被引量：4
- 2019年
- 利用农杆菌介导法获得‘新陆早36号’转棉花肉桂醇脱氢酶基因(GhCAD6)材料,以转基因T6代植株为试材,对GhCAD6基因在叶片基因组中的整合情况和不同发育阶段棉花纤维中的表达量进行分析,研究该基因对棉纤维中结构多糖和苯丙烷类化合物含量及纤维中苯丙烷类结构单体的影响。结果显示:(1)GhCAD6基因以单拷贝的形式整合到受体棉花基因组中。(2)转基因植株纤维中GhCAD6基因的表达量低于相同发育阶段对照样品,在对照样品中GhCAD6基因的表达量表现为先升高,在20DPA(开花后天数)时表达量最高,之后下降,而在转基因植株纤维中先上升,并于发育15DPA时表达量下降,20DPA时又上升至最高,之后再次下降。(3)成熟纤维中,转GhCAD6基因植株纤维中苯丙烷类化合物含量低于对照,但结构多糖含量的差别不明显。(4)转GhCAD6基因纤维中苯丙烷类结构单体——紫丁香基木质素(S-木质素)和愈疮木基木质素(G-木质素)的比值下降。研究表明,棉花转入GhCAD6基因后,纤维发育(15DPA)中GhCAD6基因的表达量变化可能导致棉花中苯丙烷类化合物含量及其结构单体比率变化,从而造成棉花纤维品质改变。该研究结果可为深入分析GhCAD6基因在改良棉花纤维品质的作用机理提供理论依据。
- 胡文冉李晓东周小云杨洋李波李晓荣
- 关键词：棉花纤维纤维品质
- 海岛棉与陆地棉不同纤维发育时期苯丙烷代谢相关基因表达差异比较
- 2012年
- 【目的】比较研究在海岛棉与陆地棉纤维发育过程中苯丙烷代谢相关基因(PAL和4CL)表达模式的差异。【方法】利用荧光定量PCR,检测不同品种来源纤维在不同发育时期目的基因表达量。【结果】发现PAL1及4CL1基因的表达量随纤维发育天数的增加而增加,在陆地棉军棉1号中,基因表达量在15 DPA达到最高,而在海岛棉新海20号中PAL1及4CL1基因的表达高峰期则为20 DPA。【结论】发现PAL1基因与4CL1基因的表达模式在海岛棉与陆地棉纤维发育过程中出现差异,海岛棉中两个基因的表达高峰期均晚于陆地棉,为逐步揭示海岛棉和陆地棉纤维品质差异的分子机理奠定了一定实验基础。
- 吕淑萍李波李晓东杨洋范玲
- 关键词：陆地棉海岛棉纤维品质基因表达
- 棉花GhCOMT1基因原核表达载体构建及蛋白纯化和Western鉴定被引量：6
- 2012年
- 为进一步研究GhCOMT1基因的功能,构建了原核表达载体pET-28a-GhCOMT1,酶切鉴定并测序后转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,在0.2mmol/L IPTG浓度条件下分别进行不同温度梯度诱导,用蛋白标记亲和层析柱(His TrapTM HP)对重组蛋白进行纯化,并用SDS-PAGE和Western blotting方法鉴定表达产物。结果表明:16℃诱导12h、30℃诱导3h和37℃诱导3h后融合蛋白均以包涵体的形式表达,其中16℃诱导12h的蛋白表达量最大;SDS-PAGE检测目的蛋白相对分子量约为39.748kD;Western blotting分析表明,目的蛋白能与His多克隆抗体起特异性反应。
- 李波倪志勇李晓东范玲
- 关键词：原核表达蛋白纯化WESTERNBLOTTING
