- 猪细环病毒2型（TTSuV2）ORF1主要优势抗原表位区的原核表达及间接阻断ELISA方法的建立
- 猪细环病毒（Torque teno suis virus, TTSuV）是一种无囊膜、呈单股环状的球形负链DNA病毒,包括TTSuV1和TTSuV2两种基因型。2002年,TTSuV首次在猪体内检测出来,随后,世界各国相...
- 李淞
- 关键词：原核表达
- 文献传递
- 四川省部分地区猪场猪伪狂犬病野毒感染的血清流行病学调查被引量：1
- 2011年
- 伪狂犬病（Pseudorabies，PR）是由伪狂犬病病毒（Pseudorabies virus，PRV）引起的一种高度接触性传染病，猪感染伪狂犬病毒可导致种猪繁殖障碍，仔猪发生腹泻、生长发育受阻、神经症状等，同时伪狂犬病病毒也是引起猪呼吸道病综合征的重要原发性病原之一。感染伪狂犬病病毒后可引起种猪繁殖障碍、产弱仔，新生仔猪出现共济失调、抽搐以及突然死亡；在生长肥育猪群中，
- 李淞朱玲赵玲
- 关键词：猪伪狂犬病流行病学调查伪狂犬病病毒猪呼吸道病综合征猪繁殖障碍血清
- 猪上呼吸道3种主要细菌病原及其疫苗研究被引量：1
- 2011年
- 猪的呼吸道疾病是当今大型养殖场主要疾病之一，尤其以细菌性感染为主，危害着我国乃至世界养猪业的发展。在规模化养猪场，转群应激、免疫注射应激、冷热应激以及饲养管理粗放等因素将导致突发性呼吸道疾病暴发。猪链球菌、猪胸膜肺炎放线杆菌、副猪嗜血杆菌是猪上呼吸道的3种主要病原菌，分别引起猪链球菌病、猪传染性胸膜肺炎、副猪嗜血杆菌病。
- 代洪波李淞刘孟良林艳高平赵玲朱玲
- 关键词：细菌性感染上呼吸道副猪嗜血杆菌病猪胸膜肺炎放线杆菌
- 副猪嗜血杆菌四川株的分离鉴定与耐药性分析
- 2011年
- 副猪嗜血杆菌病是由副猪嗜血杆菌（Haemophilus parasuis，Hps）引起的猪的多发性浆膜炎和关节炎，主要临床症状为呼吸困难、咳嗽、发烧、被毛粗乱，发病后期可见关节肿大、跛行等症状；部分血清型可导致脑膜炎，引起共济失调。病理剖检可见胸膜炎、渗出性心包炎、纤维素性肺炎、腹膜炎、关节炎、脑膜炎，同时伴有胸腔积液、腹腔积液、关节积液等。该病于1910年由Glasser首次发现，因此又被称为猪革拉瑟病（G1asser’s disease）。
- 代洪波刘孟良李淞林艳高平赵玲朱玲
- 关键词：副猪嗜血杆菌病耐药性分析多发性浆膜炎胸腔积液关节炎
- 猪细环病毒实验室诊断方法的研究进展
- 2012年
- 1997年12月，日本学者Nishizawa等利用代表性差异分析（representationaldifferenceanalysis）法，首次从一位名为TorqueTero的输血后非甲一非庚型肝炎病人的血清中克隆获得了一种新的不明病原DNA（N22），
- 梅淼赵玲朱玲李淞
- 关键词：病毒实验室日本学者病原肝炎
- 猪嵴病毒RT-PCR检测方法的建立及应用被引量：8
- 2013年
- 根据GenBank中猪嵴病毒(porcine kobuvirus)3D-RNA聚合酶基因序列设计并合成了1对特异性引物,建立了一种猪嵴病毒RT-PCR检测方法。反应产物测序结果与GenBank中猪嵴病毒SH-W-CHN/2010/China株比较,基因序列同源性为93%。利用该方法对猪蓝耳病毒、猪伪狂犬病病毒、猪瘟病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪流行性腹泻病毒、猪轮状病毒、链球菌、猪巴氏杆菌和大肠杆菌等病原核酸进行扩增,均无条带出现,表明该方法具有较高的特异性;敏感性试验表明,该方法最低能检测到的病毒核酸含量为1pg。利用所建立的RT-PCR方法检测采集自我国四川地区123份临床样品,结果阳性率为59.3%,表明猪嵴病毒在四川地区猪群中流行率较高。
- 李淞朱玲周远成吴云飞陈蕾徐志文郭万柱
- 关键词：RT-PCR
- 动物嵴病毒病原特点及检测被引量：9
- 2012年
- 本文综述了动物嵴病毒的发现、流行病学、分子生物学特点以及病原检测的研究进展,探索分析了嵴病毒仍需进一步研究和解决的问题。
- 代洪波李淞周远成朱玲徐志文
- 猪细环病毒2型ORF1基因的原核表达及其多克隆抗体的制备被引量：1
- 2013年
- 为制备猪细环病毒2型(TTSuV2)ORF1多克隆抗体,以TTSuV2阳性DNA为模板,经PCR扩增目的基因,并克隆于表达载体pET-32a(+),构建了ORF1基因的重组表达载体pET-TTSuV2-ORF1。重组质粒鉴定验证后,转化至大肠杆菌Rosetta(DE3)感受态细胞中,经IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析结果显示重组蛋白分子质量约为45.3ku,主要以可溶性蛋白的形式存在,Western-blot分析结果显示重组蛋白能够与TTSuV2阳性血清反应。表达的蛋白经HisTrapFF组氨酸标签融合蛋白纯化柱纯化后,免疫家兔,制备多克隆抗体,Western-blot分析结果显示制备的抗体具有高度的特异性,ELISA测定抗体效价为1∶1 600。证明,成功制备了特异的TTSuV2ORF1多克隆抗体。
- 李淞朱玲周远成陈蕾徐志文郭万柱
- 关键词：原核表达多克隆抗体
- 猪嵴病毒VP1基因的克隆及生物信息学分析被引量：8
- 2012年
- 为研究猪嵴病毒VP1蛋白的结构与功能,运用RT-PCR技术扩增猪嵴病毒VP1基因,测序并对其进行生物信息学分析。结果显示,成功获得了762bp的猪嵴病毒VP1基因(GenBank登录号为JX294863)。经生物信息学分析,此序列编码253个氨基酸,理论等电点(pI)为4.81,理论分子质量为26 879.2u,不稳定系数为35.93;在同一氨基酸的不同密码子的选择上存在一定的偏向性;最大疏水指数为1.967,最小疏水指数为-2.244;无信号肽和跨膜区;N末端和C末端抗原指数较高,预测抗原表位位于这些区域;蛋白核心结构为8个β折叠片围成一个柱状结构;进化树分析结果显示,JX294863与匈牙利株在一个分支上,两者亲缘关系较近。
- 陈蕾朱玲李淞周远成徐志文
- 关键词：VP1基因克隆生物信息学分析
- 猪环曲病毒RT-PCR检测方法的建立及其应用被引量：8
- 2012年
- 为建立猪环曲病毒快速检测方法,根据GenBank中猪环曲病毒S基因设计合成1对特异性扩增引物,建立了检测猪环曲病毒的RT-PCR方法。以伪狂犬病病毒、猪嵴病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪流行性腹泻病毒、A群猪轮状病毒、猪瘟病毒、猪链球菌和大肠杆菌进行特异性试验;结果显示,仅猪环曲病毒阳性模板扩增得到451bp的目的基因,测序结果与GenBank中猪环曲病毒S基因序列(GenBank登录号:AJ575372.1)的同源性为93%。敏感性试验显示,该方法能检测到的最低核酸含量为10pg。利用该方法对采集自四川省部分地区的43份临床样品进行检测;结果,临床样品中猪环曲病毒阳性率为25.6%。结果表明,建立的RT-PCR方法特异性强、灵敏度高,可用于猪环曲病毒的临床检测和流行病学调查。
- 周璐李淞徐薇薇周远成赵睿蔡雨函吴江江朱玲徐志文郭万柱
- 关键词：RT-PCR
