李蕾
- 作品数：34 被引量：93H指数：5
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- PP2R1A逆转录病毒的构建及对细胞周期的影响
- 2011年
- 目的:构建重组PP2R1A基因的逆转录病毒感染HEKTER细胞,观察其定位,验证表达,研究过表达PP2R1A对细胞生长及周期的影响。方法:逆转录病毒载体pMIG-Flag-PP2R1A-IRES-GFP与Pcl10A1瞬时共转染293T细胞,收集病毒感染HEKTER细胞,在荧光显微镜下观察定位,标记荧光单克隆。挑取不同表达强度单克隆做western验证PP2R1A蛋白表达。运用流式细胞分析、体外创伤试验及生长曲线试验研究单克隆细胞的增殖及周期。结果:获得了过表达PP2R1A的单克隆细胞株,PP2R1A在细胞内广泛表达,结合western及细胞试验证实PP2R1A高表达阻滞细胞周期并减慢细胞生长。结论:PP2R1A是丝苏氨酸蛋白磷酸酶PP2A的结构A亚基的a亚型,在细胞内广泛表达。本文成功构建了表达PP2R1A的细胞株,研究发现PP2R1A高表达会影响细胞生长及细胞周期,减缓了细胞增殖。为进一步深入研究PP2R1A对PP2A全酶活性及功能、细胞转化的影响奠定了重要的实验基础。
- 付鹤玲李靓云李蕾李建民
- 关键词：单克隆亚细胞定位细胞周期
- TLR4/NF-κB通路在脂多糖诱导喉癌细胞释放HMGB1中的研究
- 目的探讨脂多糖(LPS)对喉癌细胞高迁移率族蛋白B1(HMGB1)释放的诱导作用。方法采用酶联免疫吸附试验、实时荧光定量PCR和Western blot检测LPS诱导人喉癌细胞Hep-2不同时间对上清液中HMGB1含量、...
- 吴国荣刘鸿生王琼李蕾
- 关键词：高迁移率族蛋白B1喉癌
- 文献传递
- 肥大细胞功能和介质释放机制的研究进展被引量：23
- 2010年
- 肥大细胞不仅在超敏反应中起重要作用,还参与急、慢性炎性反应,对机体发挥防御作用,并能加工递呈抗原,是重要的效应和调节性免疫细胞。肥大细胞针对病原信号的特异性受体系统,通过受体识别相关病原体。肥大细胞激活后能合成和释放多种介质和细胞因子,介导机体的诸多生理、病理和免疫反应。了解肥大细胞功能及介质释放机制,对深入研究肥大细胞参与的有关疾病的发生机制和防治有重要意义。
- 杨岚李蕾陈国千
- 关键词：肥大细胞免疫炎症
- 黄连素抑制人喉癌Hep-2细胞增殖及机制研究被引量：2
- 2015年
- 目的探讨黄连素对人喉癌Hep-2细胞增殖的抑制作用及其可能机制。方法体外培养Hep-2细胞,使用不同浓度黄连素诱导不同时间,应用MTT法检测细胞增殖抑制率;流式细胞术测定细胞周期及凋亡;实时荧光定量PCR和蛋白质免疫印迹(Western blot)法分别检测细胞周期蛋白D(Cyclin D)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)基因和蛋白表达水平。结果与0μmol/L黄连素对照组比较,2.5、5.0、10.0、20.0μmol/L黄连素作用Hep-2细胞24、48 h,可明显抑制细胞增殖,且呈浓度时间依赖性(P<0.05);2.5、5.0、10.0μmol/L黄连素作用Hep-2细胞48 h,细胞早期凋亡率明显升高,呈浓度依赖性(P<0.05);G0/G1期细胞增多(P<0.05),诱导细胞阻滞于G0/G1期;10μmol/L黄连素作用Hep-2细胞48 h,Bax基因和蛋白表达水平明显升高(P<0.05),Cyclin D、Bcl-2基因和蛋白表达水平明显下降(P<0.05)。结论黄连素能抑制喉癌细胞增殖,引起G0/G1期阻滞,并诱导其凋亡,其作用机制可能与Bax基因表达上调及Cyclin D、Bcl-2基因表达下调有关。
- 李蕾丁小青周建业周卫东汤夏冰
- 关键词：黄连素喉癌细胞增殖
- 重组高迁移率族蛋白B1致小鼠肝损伤实验研究被引量：3
- 2010年
- 目的观察高迁移率族蛋白B1(HMGB1)对小鼠肝脏的病理作用。方法 BALB/c小鼠分为正常对照组、重组HMGB1组和重组HMGB1加抗HMGB1抗体组,每组5只,腹腔注射重组HMGB1和抗HMGB1抗体的剂量分别为100μg/只和500μg/只,注射后24 h,观察血清丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶活力、肿瘤坏死因子-α水平以及肝组织形态病理学的变化。另外,采用腹腔注射高剂量的重组HMGB1(500μg),观察小鼠存活情况。结果注射重组HMGB1后,血清丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶活力和肿瘤坏死因子-α水平均明显升高(P<0.01),肝组织显示凝固性局部坏死、血管充血并伴大量炎性细胞浸润;同时使用抗HMGB1抗体处理后,血清上述指标明显下降(P<0.05),组织坏死和炎性细胞浸润明显减轻。5只小鼠注射高剂量重组HMGB1后24、48 h各死亡1只。结论 HMGB1对小鼠肝脏组织细胞具有损伤作用。
- 胡志刚杨岚李蕾郭继中邵俊良王春新帅朝霞陈国千
- 关键词：高迁移率族蛋白B1肝脏
- HMGB1在缺血再灌注损伤中作用的研究进展
- 2010年
- 高迁移率族蛋白B1（HMGB1）为广泛存在于真核细胞中的一种非组蛋白.HMGB1可通过活化细胞的主动分泌和受损坏死细胞的被动释放进入胞外,作为一种重要的炎症介质介导炎症免疫反应.近年研究显示,HMGB1在肝脏、心脏、肾脏、脑组织和小肠等组织器官缺血损伤或缺血再灌注损伤中具有重要作用,HMGB1有可能成为防治缺血再灌注损伤的靶标.
- 邵俊良李蕾陈国千
- 关键词：高迁移率族蛋白B1炎症介质缺血再灌注损伤
- 脂多糖诱导肥大细胞释放HMGB1研究被引量：3
- 2010年
- 目的:研究脂多糖(LPS)对肥大细胞高迁移率族蛋白B1(HMGB1)释放的诱导作用及其胞内信号通路。方法:采用小鼠肥大细胞株P815,观察不同剂量LPS诱导后细胞培养上清液中HMGB1含量和细胞HMGB1mRNA表达水平的变化,及不同剂量丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路抑制剂(SB203580、SB202190、U0126和PD98059)对LPS诱导后HMGB1胞外释放的影响。HMGB1含量采用酶联免疫吸附试验检测。结果:LPS诱导后细胞培养上清液中HMGB1含量明显升高,并与LPS剂量、诱导时间有关;100μg/LLPS分别诱导8、24、48h后,HMGB1mRNA表达水平明显增强(P<0.01);SB203580和SB202190对LPS诱导HMGB1释放有明显的抑制作用(P<0.05),但U0126和PD98059不显示抑制作用。结论:LPS诱导肥大细胞释放HMGB1,其释放机制与胞内p38MAPK信号通路有关。
- 杨岚李蕾邵俊良许飞陈国千
- 关键词：高迁移率族蛋白B1丝裂原活化蛋白激酶
- 干细胞转录因子SOX2和OCT4在喉癌中的表达及与预后的关系被引量：8
- 2013年
- 目的:探讨喉癌组织中干细胞转录因子SOX2和OCT4的表达及其与临床病理特征和预后的关系。方法:构建69例喉癌组织及20例癌旁正常组织芯片,应用免疫组织化学法检测喉癌组织及癌旁正常组织中SOX2和OCT4蛋白表达。结果:SOX2和OCT4蛋白在喉癌组织中的阳性表达率高于癌旁正常组织(P<0.05)。SOX2蛋白表达与喉癌T分期、临床分期和淋巴结转移有关(P<0.01);OCT4蛋白表达与喉癌分化程度有关(P<0.05);Kaplan-Meier生存分析结果显示,SOX2阳性表达患者的生存率明显低于阴性表达患者(P<0.01);OCT4阳性表达患者的生存率与阴性表达患者比较,差异无统计学意义。COX回归分析显示,SOX2是危险因子,其表达越高,患者预后越差(P<0.01)。结论:SOX2与喉癌的浸润、转移有关,可能是影响预后的独立危险因素。
- 汤夏冰李蕾沈晓辉张宜芬陈国千周卫东
- 关键词：喉肿瘤SOX2OCT4预后
- MAPK/NF-κB通路在缺氧诱导喉癌细胞释放HMGB1中的作用研究
- 2013年
- 目的:观察缺氧对喉癌细胞高迁移率族蛋白B1(HMGB1)释放的诱导作用,并探讨其可能的机制。方法:采用人喉癌细胞株Hep-2,观察缺氧(1%O2)培养不同时间对细胞培养上清液中HMGB1含量、细胞HMGB1蛋白和mRNA的影响,及不同浓度的MAPK信号通路抑制剂(PD98059、SP600125、SB202190)、NF-κB抑制剂(PDTC)对缺氧诱导的HMGB1释放的影响。上清液HMGB1含量和细胞HMGB1蛋白表达水平分别采用酶联免疫吸附试验和Western blot检测;细胞HMGB1mRNA表达水平采用实时荧光定量PCR法检测。结果:培养上清液中HMGB1含量和细胞HMGB1蛋白表达水平均于缺氧诱导12h后升高,呈时间依赖性;细胞HMGB1mRNA表达水平于缺氧诱导6h开始升高,并随诱导时间延长而进一步升高;20μmol/L PD98059、SP600125和50mg/L PDTC对缺氧诱导的HMGB1释放有不完全的抑制作用。结论:缺氧诱导喉癌细胞释放HMGB1,其机制可能与MAPK/NF-κB信号通路有关。
- 李蕾汤夏冰王发龙韩菲菲周卫东陈国千
- 关键词：喉肿瘤缺氧高迁移率族蛋白B1丝裂原活化蛋白激酶
- 脂多糖及缺氧诱导肺上皮细胞释放高迁移率族蛋白B1的研究被引量：2
- 2012年
- 目的研究脂多糖、缺氧对肺上皮细胞高迁移率族蛋白B1(HMGB1)释放的诱导作用及其机制。方法采用BEAS-2B人正常肺上皮细胞,分别观察100μg/L脂多糖诱导(脂多糖组)和1%O2缺氧培养(缺氧组)不同时间对细胞培养上清液中HMGB1含量的影响,同时以常规培养作为对照(对照组);并观察不同浓度N-乙酰半胱氨酸对HMGB1释放的抑制作用;HMGB1含量采用酶联免疫吸附试验检测。结果脂多糖组脂多糖诱导6h后,培养上清液中HMGB1含量为(7.4±1.6)μg/L,对照组(2.3±0.6)μg/L,脂多糖组与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01),并随时间延长而进一步升高;缺氧组缺氧培养12h后,培养上清液中HMGB1含量为(7.1±1.6)μg/L,对照组为(2.1±0.4)μg/L,缺氧组明显高于对照组(P<0.01),同样随时间延长而进一步升高;N-乙酰半胱氨酸对缺氧培养HMGB1释放呈剂量依赖性抑制作用,但对脂多糖诱导的HMGB1释放无影响。结论脂多糖、缺氧诱导肺上皮细胞释放HMGB1,缺氧诱导机制可能与胞内氧自由基产生有关。
- 李蕾王发龙朱旭明马坚耿先龙韩菲菲刘洁陈国千
- 关键词：高迁移率族蛋白B1上皮细胞缺氧脂多糖
