杨颖
- 作品数:7 被引量:36H指数:3
- 供职机构:西北农林科技大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金黄土高原土壤侵蚀与旱地农业国家重点实验室开放基金国家转基因植物研究与产业化专项更多>>
- 相关领域:生物学农业科学交通运输工程建筑科学更多>>
- 水分胁迫下小麦类脱水素基因表达的半定量RT-PCR分析被引量:23
- 2007年
- 以‘郑引1号’小麦为材料,经水分胁迫后进行RT-PCR扩增,结果在胁迫条件下获得500bp的脱水素基因(wzy1-1)。利用半定量RT-PCR方法,分析‘陕合6号’和‘郑引1号’小麦在正常供水条件下及PEG6000胁迫后18、24和42h,以及复水6和12h时wzy1-1在叶片中的表达。结果表明:2个小麦品种中wzy1-1在水分胁迫后18h均有表达,至胁迫24、48h时表达量较18h均有所增多;复水6h后该基因表达迅速降低,至复水后12h表达消失。且该基因在‘陕合6号’(抗旱性较强)叶片中表达量较‘郑引1号’(抗旱性较弱)高,表明该基因的表达与小麦的抗旱性密切相关。
- 张晓娟张林生杨颖
- 关键词:半定量RT-PCR水分胁迫基因表达小麦
- 小麦类脱水素的表达、纯化及多克隆抗体的制备被引量:8
- 2007年
- 脱水素在胚胎发育后期累积,外源脱落酸(ABA)、低温、干旱和其他一些环境条件下能诱导脱水素的产生,尽管植物在脱水条件下脱水素广泛存在于细胞中,但其生化功能仍不清楚.为研究小麦在不同时期脱水素基因的表达情况和生物学功能及抗体制备,以小麦幼芽为材料,经干旱胁迫处理后,提取总RNA,通过RT-PCR得到小麦类脱水素基因片段(WZY1-1),再连接至克隆载体PUCM-T,并成功构建重组表达质粒PET-32a(+)-wzy1-1,将阳性重组质粒转化于受体菌BL21(DE3)感受态细胞中,经IPTG诱导表达,进行表达产物的聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测.结果表明,表达蛋白位于37ku处,小麦类脱水素基因获得高效表达.表达蛋白经Ni2+琼脂糖凝胶亲和层析和透析袋电洗脱法纯化后,对兔子进行免疫,制备的抗血清通过ELISA检测到较高的多克隆抗体效价.蛋白质印迹结果显示,利用纯化的蛋白质制备的兔抗血清可以很好地和所表达的蛋白质带特异性结合,且郑引1号小麦幼苗进行干旱处理,提取粗蛋白,SDS-PAGE,蛋白质印迹检测显示,在分子质量28ku处出现特异的蛋白质条带,这说明所制备的抗血清可以与小麦叶片所表达的dehydrin蛋白特异性结合,证明其具有良好的免疫原性.
- 杨颖张林生张晓娟山仑
- 关键词:原核表达多克隆抗体制备
- 兔病毒性出血症病毒YL株衣壳蛋白(VP60)基因的克隆和生物信息学分析被引量:5
- 2007年
- 应用RT-PCR方法从兔出血症病毒(RHDV)西北分离株YL株中克隆出衣壳蛋白VP60基因并测序,YL株是中国西北地区首株被测序的RHDV,测序结果显示VP60基因全长1 740 bp,编码579个氨基酸,测序结果在GenBank中注册(登录号为DQ530363)。从GenBank下载全部已发表的40株RHDV序列,运用生物信息学软件分析,构建系统进化树和氨基酸序列同源性表,结果表明,世界不同地区RHDV分离株基因序列虽然非常保守,达到90%以上,但可以分为5个基因群,并且基因型和地域性没有必然联系,中国的分离株除了WX84株外,其它均处于第V基因群,该基因群内近年分离出的中国4个不同大地区(西北、华东、东北、西南)的RHDV毒株与NJ85株遗传距离很近,很可能都来自同一毒株NJ85。同时,对4个不同大地区的近年的4个代表性分离株的二级结构、抗原性进行了预测分析,结果显示二级结构有一定差异,但抗原性相同,这与RHDV只有一个血清型的看法相一致。
- 李传山杨颖张守涛杨增岐郭蔼光
- 关键词:兔出血症病毒RT-PCR生物信息
- 集约型商业综合体外部空间的景观设计研究
- 随着我国城市人口和建筑密度的增加,城市空间出现了土地资源紧缺与空间品质下降的问题,作为应对这些问题的措施之一,城市商业综合体的建设逐渐成为重点。本文从景观角度出发,以集约型商业综合体外部空间的景观设计为研究对象,探求城市...
- 杨颖
- 关键词:景观设计土地利用
- 文献传递
- 小麦类脱水素基因克隆及其生物信息学分析
- <正>植物在生长过程中,干旱能诱导许多基因表达,以抵御逆境胁迫,减轻干旱造成的损伤,植物这种耐旱机制是与体内一系列调控因子的改变引起的分子效应相关,胚胎发育后期丰富蛋白(Late Embryogenesis Abunda...
- 张林生杨颖
- 关键词:小麦脱水素生物信息
- 文献传递
- 时滞水轮机调节系统非线性容错控制研究
- 水轮机调节系统是水电站系统的重要组成部分,承担着调节机组频率和转速、调整负荷分配、平稳开停机、同步并网等任务,水轮机调节系统的稳定和有效控制影响着整个电站乃至电网的安全稳定运行。本文将容错控制策略应用于水轮机调节系统中,...
- 杨颖
- 关键词:水轮机调节系统容错控制故障检测
- 小麦类脱水素基因的克隆和WZY1-1抗体的制备
- LEA蛋白是当前植物胚胎学以及逆境生理学研究的热点之一,胚胎晚期丰富蛋白(LEA蛋白)是一个大的基因家族,其表达产物LEA蛋白随着种子脱水而合成的植物蛋白,其中一些蛋白能够被干旱、高盐、寒冷以及ABA等胁迫诱导。根据不同...
- 杨颖
- 关键词:麦类表达蛋白原核表达载体可溶性蛋白含量胁迫处理
- 文献传递