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犬细小病毒和犬冠状病毒双重PCR方法的建立及应用被引量：7: 2011年; 根据GenBank中犬细小病毒(CPV)和犬冠状病毒(CCV)基因序列各设计了一对引物,经试验条件的优化,建立了检测CPV的PCR方法和CCV的RT-PCR方法,扩增目的片段大小分别为337bp和852bp。在此基础上建立了检测CPV和CCV双重PCR方法。该双重PCR方法能特异的扩增CPV和CCV,且分别扩增出1.08ng和3.2ng总核酸量。通过检测96份临床样品,对双重PCR方法和胶体金试纸条方法进行了对比试验。结果表明,建立的双重PCR方法快速、敏感、特异性高,可以用于CPV和CCV鉴别检测。; 林颖耿庆华付海滨李俊环闫明媚李成镛林书铭; 关键词：犬细小病毒犬冠状病毒双重PCR

犬细小病毒和犬冠状病毒双重PCR方法的建立及应用: 建立CPV和CCV双重PCR方法，即一次实验可同时快速鉴别诊断CPV和CCV两种病毒感染的检测技术，为预防和控制这两种疾病提供快速诊断方法。本试验结果表明，在进行CPV和CCV单项PCR基础上，通过对反应条件的优化可以建...; 林颖耿庆华付海滨李俊环李成镛林书铭; 关键词：犬细小病毒犬冠状病毒

犬细小病毒和犬冠状病毒双重PCR方法的建立及应用: 引言/目的犬细小病毒病又称犬传染性出血性肠炎,是由犬细小病毒(CPV)引起的犬急性传染病。犬冠状病毒性腹泻是由犬冠状病毒(CCV)引起的犬急性肠道性传染病。CPV与CCV临床表现极为相似,且常发生混合感染,给鉴别诊断带来...; 林颖耿庆华付海滨李俊环李成镛林书铭

鹅副粘病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立: 2011年; 根据GenBank所载鹅副粘病毒(GPMV)的F基因保守区序列设计一对特异性引物,应用RT-PCR方法扩增F基因片段,克隆、测序后,采取Taqman探针法建立了检测鹅副粘病毒的荧光RT-PCR方法。结果表明,该方法特异性强,敏感性高,可以用于鹅副粘病毒的检测。; 张桐源林颖耿庆华龙朕林书铭赵玉军; 关键词：鹅副粘病毒

犬瘟热病毒和犬腺病毒2型双重PCR方法的建立及应用被引量：5: 2012年; 根据犬瘟热病毒(canine distemper virus,CDV)和犬腺病毒2型(Canineadenovirus type2,CAV-2)GeneBank登陆的基因序列各设计一对引物,经试验条件优化,建立了检测CAV-2的PCR方法和CDV的RT-PCR方法,CAV-2可扩增1108bp片段、CDV可扩增560bp的目的片段,特异性试验表明建立的方法只能特异扩增CAV-2和CDV,不能扩增犬细小病毒、犬冠状病毒、犬副流感病毒、犬钩端螺旋体和犬黄胆出血群、狂犬病病毒。敏感性试验表明,所建立的双重PCR方法可以扩增4.63ng总核酸量。在上述试验基础上继续优化条件建立了能同时检测CAV-2和CDV两种病毒的双重PCR检测方法,并用该方法检测来自辽宁、吉林等15家动物医院134份鼻液和眼眵样品,与商品化试纸条检测结果相比,本方法更加敏感和方便。研究结果表明,本实验建立的方法敏感、特异,适用于动物犬瘟热病毒和犬腺病毒2型的快速检测和鉴别诊断。; 耿庆华林颖裴程程胡殊林书铭; 关键词：犬瘟热病毒双重PCR

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林书铭