梁筱燕
- 作品数：3 被引量：10H指数：1
- 供职机构：西南大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项重庆市自然科学基金博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 优球蛋白法纯化南方鮎血清免疫球蛋白及多克隆抗体制备
- 2011年
- 采用优球蛋白法和Sepharose-4B柱层析纯化南方鮎血清免疫球蛋白,SDS-PAGE结果表明,重链相对分子质量约为7.4×104,轻链相对分子质量约为2.6×104;用纯化蛋白免疫Balb/c小鼠制备多克隆抗体,ELISA测定多克隆抗体效价高达1∶216;Western-blotting结果显示多克隆抗体与免疫球蛋白重链和轻链都有反应,与不同科的沟鮎血清和不同目的草鱼血清无交叉反应.利用优球蛋白法和Sepharose-4B柱层析首次纯化南方鮎血清免疫球蛋白,与Sepharose-4B柱层析相比优球蛋白法更简单、快速;制备的多克隆抗体具有特异性,可做为以后进一步研究南方鮎的免疫系统和免疫防治的工具.
- 邱艳张小萍魏静梁筱燕
- 关键词：免疫球蛋白
- 尼罗罗非鱼血清免疫球蛋白单克隆抗体的制备及鉴定
- 尼罗罗非鱼(Oreochromisniloticus)为我国重要的经济鱼类。近年来，随着养殖规模的不断扩大，高密度养殖和水体污染导致鱼类疾病的大规模暴发，给渔民造成了巨大的经济损失。采用鱼塘消毒或者抗生素治疗可以在一定程...
- 梁筱燕
- 关键词：尼罗罗非鱼免疫球蛋白单克隆抗体免疫应答
- 文献传递
- 尼罗罗非鱼血清免疫球蛋白单克隆抗体制备及鉴定被引量：9
- 2013年
- 目的制备抗尼罗罗非鱼血清免疫球蛋白的单克隆抗体,并对其免疫学特性进行鉴定,运用它们监测嗜水气单胞菌免疫尼罗罗非鱼血清抗体水平。方法采用重组蛋白A亲和层析法纯化尼罗罗非鱼血清免疫球蛋白,纯化蛋白经SDS-PAGE检测后免疫Balb/c小鼠,取免疫鼠脾细胞与Sp2/0细胞融合;用ELISA法对杂交瘤进行筛选以及测定单抗的特性和效价,Western blot和叠加ELISA分析单抗的抗原结合表位;灭活嗜水气单胞菌免疫尼罗罗非鱼,用单抗建立ELISA检测体系监测血清特异性抗体水平。结果 SDS-PAGE电泳条件下血清免疫球蛋白重链和轻链的相对分子质量分别约为77 000和27 000;共获得4株抗罗非鱼血清Ig的单抗,分别命名为3D9、9D4、8G3和7B7,它们的细胞上清ELISA效价为1∶3 200～1∶6 400,抗体Ig亚类均为IgG1;4株单抗都能特异识别罗非鱼免疫球蛋白,而与鲫、草鱼、南方鲇、斑点叉尾鮰、鲈鱼血清无任何交叉反应。3D9识别变性条件下的尼罗罗非鱼Ig重链,9D4、8G3和7B7为轻链特异性。初次免疫后1～15 d尼罗罗非鱼血清中嗜水气单胞菌特异性抗体水平显著上升,第3次免疫后3周抗体水平达到峰值。结论成功制备抗尼罗罗非鱼血清免疫球蛋白单克隆抗体,为尼罗罗非鱼免疫球蛋白的结构分析、免疫应答水平监测和病原诊断等研究提供有力工具。
- 张小萍梁筱燕张庆璜张武凤魏静
- 关键词：尼罗罗非鱼免疫球蛋白单克隆抗体
