沈叙庄 作品数:249 被引量:1,502 H指数:21 供职机构: 首都医科大学附属北京儿童医院北京市儿科研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家科技重大专项 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 文化科学 哲学宗教 更多>>
儿童患者中对碳青霉烯类耐药的绿脓假单胞菌产金属酶基因型研究 被引量:2 2007年 目的研究儿童患者中对碳青霉烯类抗生素耐药的绿脓假单胞菌产金属酶的基因型。方法本研究收集了2003年12月至2005年11月我院住院患儿中分离出的对碳青霉烯类抗生素耐药的绿脓假单胞菌59株。使用 E 试验法检测产金属酶的耐药表型,PCR 技术检测编码金属酶的IMP、VIM、SPM 和 GIM 4种基因型。PCR 反应产物进行纯化后,使用双脱氧末端终止法进行 DNA 测序。将得到的拼接序列与 GenBank 中 Blast 进行同源分析,确定其基因亚型。结果 59株对碳青霉烯类抗生素耐药的绿脓假单胞菌中,纸片法检测金属酶表型结果阳性29株,占49.2%。PCR 检测金属酶基因型阳性39株,占66.1%,其中 IMP 型阳性35株,占89.7%,VIM 型阳性4株,占10.3%。未检测出 SPM 和 GIM 型金属酶。测序结果显示,IMP 型测序结果均为产 IMP-1亚型金属酶的绿脓假单胞菌。VIM 型测序结果均为产 VIM-2亚型金属酶的绿脓假单胞菌。结论儿童患者中对碳青霉烯类抗生素耐药的绿脓假单胞菌,产金属酶率高于成人报道。产生的金属酶同时存在 IMP-1和 VIM-2两种基因型,其中以 IMP-1亚型为主,少部分为 VIM-2亚型。产金属酶是儿童患者对碳青霉烯类抗生素耐药的绿脓假单胞菌的重要耐药机制。在儿科进行对碳青霉烯类耐药的绿脓假单胞菌产金属酶的监测十分重要。 董方 徐樨巍 宋文琪 甄景慧 俞桑洁 杨永弘 沈叙庄关键词:假单胞菌 铜绿 酶类 细菌性脑膜炎菌培养基的选择和制备 1990年 小儿细菌性脑膜炎的病原学诊断,关系到此病的治疗和预后。而且可据此作出流行病学估价,为制备疫苗提供依据。然而,国内经细菌学检查只能明确至多20%的病原。原因与培养基敏感性密切相关。b 型流感嗜血杆菌(Hib)生长需要 X、V 因子,可用巧克力和 Levinthal 培养基。近年来国内有人自制 X、V 因子培养基,培养效果良好。但 Hib 在血培养基中生长不好,肺炎链球菌(PNC)和脑膜炎球菌(MC)生长需要血,在上述培养基中生长不好。但临床上很难同时接种两种培养基进行培养。加之, 傅曙光 沈叙庄 张桂荣 李艳 高薇 王永红 袁林 杨永弘关键词:细菌性脑膜炎 病原学诊断 脑膜炎球菌 培养阳性率 羊血清 红霉素耐药肠球菌ermB基因与转座子Tn1545和Tn917的关系及质粒接合试验 目的:分析临床分离红霉素耐药的肠球菌携带ermB、mefA基因与携带转座子Tn1545和Tn917之关系,证实肠球菌红霉素耐药性、耐药基因及转座子在同种同属、同种不同属和异种细菌之间的传递。
方法:采用琼脂稀释... 吕萍 徐樨巍 宋文琪 甄景慧 俞桑洁 杨永弘 沈叙庄关键词:肠球菌 红霉素 耐药基因 转座子 文献传递 动物源性和人源性的肠球菌对抗生素耐药性及ermB基因相关性研究 被引量:2 2008年 目的了解大环内酯类耐药基因在人源和动物源性肠球菌之间水平转移的可能性。方法采用KB法和琼脂稀释法检测52株动物源性和55株儿科临床分离肠球菌对8种抗生素的敏感性;PCR检测肠球菌的ermB、mefA、terM、aac(6′)/aph(2″)基因以及Tn1545的整合酶沈基因;PCR扩增联合测序对比人源性和动物源性ermB等位基因的同源性;接合实验研究ermB基因在不同种属、不同来源的肠球菌之间水平转移。结果两种来源肠球菌对红霉素的耐药率高达80%以上;ermB是肠球菌对红霉素耐药的主要基因,在人源性和动物源性肠球菌的检出率分别为61,82%(34/55)和53.85%(28/52);已测序菌株中53.0%的北京临床分离株与69.5%的动物分离株携带同一ermB等位基因EF525477;通过接合实验,ermB基因可以在不同来源、不同种属分离株之间进行传递。结论动物源性和人源性肠球菌对红霉素和四环素都有高耐药率;滤膜实验证实ermB基因在体外条件下可以在动物源性肠球菌和人源性肠球菌之间传递,但传递频率比较低。动物源性和人源性肠球菌及不同种属的肠球菌有相同ermB等位基因,提示其ermB耐药基因在动物源性和人源性肠球菌水平传递存在的可能性。 汪玲 马耀玲 王咏红 吕萍 徐樨巍 甄景慧 杨永弘 沈叙庄关键词:肠球菌 抗生素耐药 黏膜免疫佐剂及抗原呈递系统研究现状 被引量:2 2005年 经济、稳定、高效的黏膜疫苗是目前疫苗研究的新方向 ,其中 ,黏膜免疫佐剂及抗原呈递系统是黏膜疫苗研究的重点之一 。 岳丽琴 沈叙庄 杨永弘关键词:黏膜疫苗 免疫佐剂 B族链球菌C5a肽酶蛋白表位的克隆、表达和免疫学分析 被引量:4 2006年 目的应用生物信息学方法预测B族链球菌C5a肽酶蛋白表位,结合基因工程手段进行表位重组、表达和免疫原性分析。方法用预测程序ProPred和ANTIGENIC预测B族链球菌C5a肽酶蛋白的表位,应用PCR技术扩增出编码该表位基因片段,克隆PCR产物构建重组质粒,测序验证。在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达融合蛋白。表达的蛋白经质谱分析和Western blot鉴定。纯化该融合蛋白并免疫C57/BL小鼠,萃取GBS表面蛋白,双向琼脂扩散试验检测抗体水平。结果在SCPB中预测到1个既具有MHC结合肽特性又具有B细胞表位特征的肽段。重组和表达了这一肽段,质谱得出与SCPB蛋白的相似性分数为79,Western blot证实能与抗SCPB的抗体反应,纯化后融合蛋白纯度>90%。动物实验证实融合蛋白能产生特异性的抗GBS抗体。结论重组表位具有一定免疫原性,为相关蛋白的毒力机制研究和亚单位疫苗等方面的研究打下了良好的基础。 岳丽琴 沈叙庄 周育森 林粱 王咏红 于丽华 杨永弘关键词:抗原表位 融合蛋白表达 免疫原性 PCR在粪肠球菌特异转录调控基因检测中的应用 2007年 目的探讨粪肠球菌特异的转录调控基因(Ef0027)在快速准确鉴定粪肠球菌的重要价值。方法经 Phoenix 100全自动细菌鉴定系统和 API 鉴定系统鉴定为粪肠球菌、屎肠球菌、坚韧肠球菌、海氏肠球菌、鸟肠球菌、棉子糖肠球菌、肺炎链球菌、化脓链球菌、金黄色葡萄球菌等110株革兰阳性球菌及大肠埃希菌、绿脓假单胞菌、肺炎克雷伯菌等30株革兰阴性细菌,采用 PCR 技术分别检测粪肠球菌特异转录调控基因(Ef 0027)。结果 39株粪肠球菌特异转录调控基因(Ef 0027)为阳性,而其他肠球菌属及其他细菌特异转录调控基因(Ef0027)全部为阴性。结论聚合酶链反应检测粪肠球菌转录调控基因(Ef 0027)为临床快速准确鉴定粪肠球菌提供了一种有效的手段。 吕萍 徐樨巍 宋文琪 甄景慧 俞桑洁 杨永弘 沈叙庄关键词:基因表达调控 儿科重症监护病房抗菌药使用的多中心流行病学调查 被引量:1 2010年 【目的】了解并评估中国5家教学儿童医院儿科重症监护病房(pediatric intensive care unit,PICU)抗菌药使用情况,建立适合我国国情的儿科医院PICU抗菌药使用初步评估体系。【方法】首先调查2002-2006年5家教学儿童医院PICU所有12 743患儿的情况,然后抽查北京、重庆以及复旦儿童医院PICU,均观察以下指标:一般情况、临床资料、抗菌药使用、细菌学检查等。【结果】5家儿童医院2002-2006年收住患儿的住院时间没有明显变化;PICU抗菌药使用的费用占总的药物使用费用的比率均有下降的趋势。在抗菌药使用指征上,各医院PICU还是以经验性治疗为主,但从2002-2006年,经验性治疗在逐年降低,而针对性治疗在逐年升高。540份抽查病例显示:524(97%)例患儿至少使用了一种抗菌药,经验性治疗占71.6%。第三代头孢菌素使用最多(31%)。北京、重庆、复旦的病原菌分离率分别为29%,66%和67%。其中,6种常见的细菌占分离菌的77.2%。大肠埃希菌耐头孢噻肟的耐药率在北京、重庆、复旦分别为73.8%、58.3%和49.2%,北京儿童医院均高于其他2家儿童医院(P=0.00)。【结论】本研究调查得出了5家儿童医院PICU抗菌药使用的基本数据。所抽查的3家医院PICU在抗菌药使用上均存在不同程度的不合理性;由于送检标本的检出率低,所以病原学的结果在指导抗菌药针对性使用上也受到限制。 丁辉 甄琴 沈叙庄关键词:儿科重症监护病房 抗菌药使用 耐药性 儿童临床分离多重耐药铜绿假单胞菌的耐药性分析 被引量:6 2006年 目的了解儿童临床分离多重耐药铜绿假单胞菌的耐药特征。方法收集我院住院患儿中分离的120株多重耐药铜绿假单胞菌,作药敏试验,用琼脂稀释法测定抗菌药物的 MIC 值,按照2005年 CLSI 推荐标准判断结果。数据分析使用WHONET5.3软件。结果多重耐药铜绿假单胞菌对氨曲南的耐药率最高(86.7%),头孢他啶仍具较好的抗菌活性;环丙沙星耐药率最低(2.5%)。亚胺培南和美罗培南的耐药率分别达到34.2%、35.8%,两者 MIC_(50)和 MIC_(90)相同,分别为4和32rag/L。59株细菌对碳青霉烯类抗生素耐药,占49.2%。碳青霉烯类抗生素耐药株与非耐药株对头孢他啶、头孢吡肟、头孢哌酮-舒巴坦、哌拉西林-三唑巴坦的耐药率差异有显著性(P<0.05)。结论目前从儿科临床分离多重耐药铜绿假单胞菌的多重耐药现象严重。 董方 张美和 宋文琪 甄景慧 俞桑洁 杨永弘 沈叙庄关键词:铜绿假单胞菌 抗生素 耐药性 多重耐药 北京地区呼吸道感染患儿卡他莫拉菌携带情况及耐药性分析 被引量:7 2003年 目的 :研究北京地区呼吸道感染患儿鼻咽部卡他莫拉菌的携带情况及其耐药性。方法 :对北京儿童医院 4 2 2例上呼吸道感染患儿的鼻咽拭子进行卡他莫拉菌培养、分离 ,对其携带情况及相关因素进行分析 ,BSAC纸片扩散法进行药敏试验 ,Nitrocefin纸片检测 β内酰胺酶。结果 :4 2 2例呼吸道感染患儿分离到 79株卡他莫拉菌 ,携带率为 1 8.7% ,其中 5月、8月和 9月的携带率分别为 33.0 %、8.4 %和 1 8.3%。 5月携带率明显高于 8、9月份 (P <0 .0 1 )。幼托患儿携带率 2 9.6 % ,明显高于居家患儿 1 7.4 % (P <0 .0 1 )。近期使用过抗菌药物组和未使用过抗菌药物组的携带率分别为 1 6 .0 %和 2 6 .8% ,两组差异有显著性 (P <0 .0 5 )。患儿卡他莫拉菌携带率与年龄无明显相关 (P >0 .0 5 )。 93.7%的分离株产 β内酰胺酶 ,对氨苄西林的耐药率分别为 89.2 % ,对头孢呋辛、头孢噻肟的耐药率为 2 8.4 %和 6 .8% ,对四环素和复方磺胺甲唑的耐药率分别为 33.8%和1 6 .2 % ,对红霉素和克拉霉素的耐药率分别为 6 .8%和 1 .4 %。未发现对头孢克洛、氯霉素和环丙沙星的耐药株。结论 :呼吸道感染患儿卡他莫拉菌的携带率与季节、是否上幼儿园及近期抗菌药物使用有关。北京地区儿童携带的卡他莫拉菌 β内酰胺酶阳性率很高 ,对? 王艳 袁林 沈叙庄 张美和 甄景慧 杨永弘关键词:卡他莫拉菌 抗生素耐药性 Β内酰胺酶